Молекулярно- генетический профиль дофаминовой нейромедиаторной системы при алкоголизме и героиновой наркомании
|
Скачать 1.22 Mb.
|
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериал и методы исследования В работе использованы клинико-катамнестический с использованием методики клинического анкетирования, клинико-генеалогический, клинический, молекулярно-генетический и генетико-математический методы исследования. Группы пациентов. В исследовании принимали участие стационарные пациенты клиники ФГБУ ННЦ наркологии, мужского пола, этнические русские, не родственные между собой. Диагностическую когорту больных алкоголизмом составили 548 пациентов с диагнозом "зависимость от алкоголя" 2-3 стадии (F-10.2 по МКБ-10), средний возраст - 37,5+6,2 лет, диагностическая когорта больных наркоманией состояла из 253 пациентов с диагнозом «Зависимость от опиатов (героин) (F-11.2), средний возраст- 27,3+4,4 года. Пациенты с верифицированной психопатологией (шизофрения, эндогенные депрессивные расстройства, суицидальные попытки) были исключены из исследования. Контроль этнической гомогенности больных проводили в процессе опроса и по результатам анализа фамилий, имен и отчеств участников. Контрольную группу составили 259 мужчин (средний возраст 38,5+7,2 лет) этнические русские, не родственные между собой, не имеющие диагностических признаков наркологической патологии. Контрольная группа состояла из двух когорт: когорта 1- доноры крови (90 чел.) и когорта 2- военнослужащие, проходившие ежегодную диспансеризацию в амбулаторно-поликлиническом отделении госпиталя одного из силовых ведомств РФ (169 чел.). Когорта 2 была сформирована на условиях анонимности, маркировка образцов проводилась с помощью номеров. Контроль этнической гомогенности участников контрольной группы проводили: в когорте 1- по результатам анализа фамилий, имен и отчеств участников, в когорте 2- путем фильтрованного отбора исключительно лиц, принадлежащих к этническим русским. Был проведен сравнительный анализ частот аллелей и генотипов всех изученных генов, показавший отсутствие различий между когортами контрольной группы, на основании которого подгруппы были объединены в общую контрольную группу. Все пациенты были проинформированы о характере проводимого научного исследования. Исследование проводилось с разрешения и под контролем локального этического комитета ННЦ наркологии. Набор участников диагностических когорт и контрольной группы производился в период 2000-2010гг. Источники данных. На каждого пациента, принимавшего участие в исследовании, лечащий врач пациента заполнял специально разработанную анкету (Кибитов А.О. 2004), включающую данные о семейной отягощенности по наркологическим и психическим заболеваниям, данные анамнеза, данные о начале, развитии и течении заболевания, о количестве амбулаторных обращений и госпитализаций, длительности терапевтических ремиссий и уровне первичной эйфории при начале приема ПАВ. Результаты обработки анкет послужили первичными данными для формирования групп сравнения и построения клинических фенотипов. Дизайн исследования. На первом этапе проводилось генотипирование образцов ДНК всех участников исследования по полиморфным локусам шести генов ДА системы: DRD2, DRD4, TH, DAT, DBH и COMT. Данные генотипирования далее использовались для проведения следующих этапов анализа. На втором этапе был проведен сравнительный анализ частот встречаемости аллелей, генотипов и гаплотипов для всех локусов полиморфизма изучаемых генов между каждой диагностической когортой и контрольной группой, а также между диагностическими когортами. На третьем этапе был проведен анализ степени семейной отягощенности по наркологическим заболеваниям каждого участника диагностических когорт, после чего диагностические когорты были разделены на группы в зависимости от степени семейной отягощенности и проведен сравнительный анализ частот встречаемости локусов полиморфизма в этих группах по сравнению с контролем и между собой. Дополнительно, был проведен перекрестный анализ диагностических когорт: сравнивались частоты встречаемости локусов полиморфизма в группах из разных диагностических когорт, но с одинаковой степенью семейной отягощенности. На четвертом этапе в каждой из диагностических когорт были выявлены клинические параметры развития зависимости от ПАВ и диапазоны значений этих параметров, связанные с семейной отягощенностью больных и ее степенью. Выявленные диапазоны значений клинических параметров (элементы клинического фенотипа) использовались для группировки пациентов в соответствующие группы. Затем был проведен сравнительный анализ частот встречаемости локусов полиморфизма в этих группах по сравнению с контролем и между собой. На пятом, финальном этапе, проводился анализ сохранения/исчезновения или появления новых различий частот локусов полиморфизма в группах сравнения предыдущих этапов для выявления специфических сдвигов частот, связанных со степенью семейной отягощенности и ее клиническими проявлениями в виде элементов клинического фенотипа. Оценка степени отягощенности и схема анализа групп с разной степенью отягощенности. Оценка семейной отягощенности по наркологическим заболеваниям участников контрольной группы не была возможной. Согласно данным Johnson et al., (2001), проанализировавших выборку объемом более 32 000 человек, для здоровых в отношении наркологических заболеваний субъектов уровень семейной отягощенности по алкоголизму составил 7%, что дает основание считать группу контроля условно свободной от отягощенности и проводить корректные сравнения с этой группой. Первично, каждая диагностическая когорта пациентов была разделена на подгруппы: FH0 (без семейной отягощенности) и FH (наличие семейной отягощенности). В целях выявления эффектов "накопления" наркологической патологии в семье больного для каждого отягощенного больного (FH группа) был произведен расчет "степени отягощенности", которую определяли как количество выявленных кровных родственников с наркологической патологией в семье пациента без учета степени родства. Больных с одним кровным родственником с наркологической патологией оказалось в нашей выборке достаточно много, что и обусловило выделение отдельной группы таких больных (FH1, "средняя" степень отягощенности). Остальные больные, для которых степень отягощенности превышала значение 2 (два и более больных родственника) составили группу FH2 ("высокая" степень отягощенности). Клинические параметры и траектория развития зависимости. В целях выявления и сопоставления клинических фенотипов зависимости от ПАВ нами была разработана система формализованных клинических параметров, характеризующих динамику развития зависимости. В результате стало возможным получение клинических «динамических фенотипов» зависимости как специфических вариантов взаимосвязи параметров и выявление валидных элементов этих фенотипов - параметров и диапазонов их значений, зависимых от степени семейной отягощенности. Период развития зависимости рассматривался как простой динамический процесс, характеризующийся поступательным движением с критическими точками, по достижении которых течение заболевания изменяет свою «скорость» и происходят качественные изменения характера заболевания. В качестве финальной точки (формирование зависимости завершено), мы использовали момент появления сформированного абстинентного синдрома (АС). Ряд клинических аспектов остались за рамками нашего рассмотрения в силу их скорее "метаболического" либо "токсикологического" происхождения, вряд ли имеющего отношение к генетике этиопатогенеза зависимости: первичная и измененная в процессе развития зависимости толерантность, тип потребления алкоголя, характер и периодичность запоев и тяжесть синдрома отмены. Были сформулированы и выполнены основные требования к клиническим параметрам: максимальная объективность (не зависят от индивидуальной врачебной оценки); возможность численного выражения или простого подразделения на категории; максимальная простота при расчете и оценке значений параметров. Совокупность клинических параметров и диапазонов их значений должна давать возможность описания максимально полного клинического континуума процесса развития зависимости от ПАВ. Согласно характеру отражаемых процессов, клинические параметры были сгруппированы в три группы: Возрастные параметры - возраст больного при достижении критических точек развития зависимости: знакомство с ПАВ, начало систематического злоупотребления ПАВ, появление сформированного синдрома отмены (АС). Динамические параметры – длительность критических периодов в развитии зависимости: период от знакомства с ПАВ до начала систематического злоупотребления, период от начала систематического злоупотребления до появления сформированного АС, период от знакомства с ПАВ до появления сформированного АС. Качественные параметры Длительность ремиссии – средняя длительность терапевтической ремиссии. Расчет производился в отдельной выборке больных, для которых текущая госпитализация на момент исследования не была первой и/или которые получали специализированную наркологическую помощь амбулаторно. Спонтанные ремиссии не принимались в расчет в силу ненадежности данных либо их возникновения по независящим от больного причинам (лишение свободы, тяжелые операционные вмешательства и проч.) Резистентность (нормированная терапевтическая резистентность) – условная оценка (в баллах) устойчивости больного к стандартной комплексной терапии, получаемой в наркологическом стационаре либо амбулаторно. Может считаться косвенной характеристикой тяжести течения и эффективности терапии. Рассчитывалась как сумма количества госпитализаций (включая текущую) пациента и половины от количества амбулаторных обращений (для снижения удельного веса амбулаторной терапии), нормированная к возрасту больного на момент исследования. Процедура нормирования позволяет провести оценку резистентности независимо от динамики развития зависимости. Эйфория (уровень первичной эйфории при приеме ПАВ)- условная оценка эйфорического эффекта ПАВ при первых приемах (оценка давалась самим больным при опросе врачом). Косвенная характеристика уровня первичного влечения к ПАВ. С учетом того, что оценка основывается только на словах самого больного и принимая во внимание значительный срок, прошедший с момента первого знакомства с ПАВ, возможны как неточности или наслоение позднейших эмоциональных оценок, так и наоборот, удается разделить больных по уровню эмоционального следа в памяти. По нашим данным, больные с разными оценками первичной эйфории значительно различаются клинически, что поднимает качество такой оценки. Оценка факта семейной отягощенности и ее степени. Ранговый параметр, принимающий следующие значения: для оценки факта отягощенности- есть (FH) и нет (FH0), для оценки степени отягощенности- три значения- нет (FH0), средняя степень (FH1), высокая степень- FH2. Итоговый балл отягощенности (количественный параметр) - интегративная оценка степени семейной отягощенности. Рассчитывается как простая сумма случаев наркологических заболеваний в семье пациента (кровные родственники). Степень родства не принимается во внимание для максимально полной характеристики степени отягощенности. Ряд параметров различался между диагностическими когортами больных в силу клинических особенностей развития и течения клиники героиновой наркомании. Диапазоны значений клинических параметров. Для каждого параметра (за исключением параметров эйфория и отягощенность, которые исходно являются категориальными) мы рассматривали три численных диапазона значений: минимальное, среднее и максимальное, основываясь на положениях генетики количественных признаков об измененной норме реакции и методологии отбора «крайних» или полярных случаев проявления признака. Для установления этих диапазонов мы проанализировали распределение каждого из параметров в общем массиве пациентов и с помощью метода квартилей выявили диапазон клинических значений каждого параметра, соответствующий: минимальной выраженности признака (нижний квартиль-25%), максимальной выраженности (верхний квартиль-75%) и промежуточной выраженности (остальные значения). Меньшие значения квантилей мы не применяли из-за допущения возможных неточностей при сборе информации. При формировании диапазонов, значения самих квартилей включались в средний (промежуточный) диапазон для дополнительной страховки от неточностей в сборе первичных данных. Характеристика клинических параметров развития зависимости от алкоголя приведена в Таб.1, диапазоны их значений отражены в Таб.2 Таблица 1. Характеристика распределения значений клинических параметров по методу квартилей в общем массиве больных алкоголизмом (N=548)
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 |
Выбор метода молекулярно-биологического типирования генов системы... |
 |
Сравнительный эколого-генетический анализ микроспоридий и их хозяина... Сравнительный эколого-генетический анализ микроспоридий и их хозяина – байкальской амфиподы gmelinoides fasciatus |
|
Руководство пользователя программа «Профиль» Программа «Профиль» предназначена для автоматического вычерчивания продольных профилей наружных подземных инженерных сетей |
|
Дипломной практики «Методы и средства проектирования прикладных интеллектуальных систем» Фгос во с учетом рекомендаций и Прооп во по направлению 02. 04. 02 «Фундаментальная информатика и информационные технологии».... |
|
Инструкция по использованию индивидуального цветового профиля при... Перед запуском Photoshop необходимо установить цветовой профиль на компьютер. Для этого необходимо лишь дважды кликнуть по выбранному... |
|
Исследование системы межбанковских расчетов ОАО «Лето-Банк» Профиль: Программное обеспечение средств вычислительной техники и автоматизированных систем |
|
Молекулярно-генетическое исследование гена лейцинбогатой киназы 2... Молекулярно-генетическое исследование гена лейцинбогатой киназы 2 (lrrk2) у лиц с болезнью паркинсона |
|
Вход в «Профиль дилера» Вход раздел «Профиль дилера» осуществляется через высланную Вам ссылку по электронной почте |
|
Документация об открытом аукционе в электронной форме на поставку... Федеральное государственное бюджетное учреждение «Селекционно – генетический центр «Смена» |
|
Решение зс амр от 25. 03. 2010г. №159 «Об утверждении целевой комплексной... Использование бюджетных средств, выделенных из бюджета Александровского муниципального района на реализацию цкп «Профилактика наркомании,... |
|
Учебно-методический комплекс дисциплины: «Международные стандарты... Профиль подготовки: «Международная практика и системы регулирования бухгалтерского (финансового) учета и аудита» |
|
Цкп «Генетический полиморфизм» обн ран Разработка тест-систем для определения пола и идентификации особей амурских тигров по любому биологическому материалу методом пцр... |
|
Методические указания му 2634-10 Ая и молекулярно-генетическая оценкА воздействия наноматериалов на представителей микробиоценоза |
|
Ип торговцев В. А коммерческое предложение по обслуживанию систем видеонаблюдения При необходимости, специалист вносит предложения по модернизации системы. В этом случае, при Вашем согласии, будет проведен детальный... |
|
Сведения об учебно-методической и иной документации, разработанной... |
|
Техническое задание Разработка компонент молекулярно диагностических... Разработка компонент молекулярно диагностических систем для выявления клинически значимых маркеров генетических, онкологических и... |