Методические указания мук 2661-10
|
Скачать 0.78 Mb.
|
Жизнеспособность цист определяют при помощи методов витального окрашивания и люминесцентной микроскопии. Для того, чтобы установить предельные сроки выживаемости и интенсивность гибели цист кишечных простейших на поверхности опытных образцов, изготовленных из стекла, на изучаемую взвесь цист наносят через определенные промежутки времени каплю 0,1-го водного раствора эозина или 1 каплю 0,1-0,2% водного раствора акридинового оранжевого, тщательно растирают в ней исследуемую взвесь, покрывают покровным стеклом и просматривают приготовленные препараты соответственно при помощи светового или люминесцентного микроскопа. При изучении выживаемости цист кишечных простейших на опытных образцах, изготовленных из светонепроницаемых материалов (металлы, дерево, полимеры, картон и др.) исследуемую взвесь цист вначале тщательно смешивают на поверхности опытного образца с водным раствором соответствующего красителя, затем каплю этой взвеси переносят на предметное стекло, покрывают ее покровным стеклом, и анализируют под световым или люминесцентным микроскопом. В препаратах, окрашенных раствором эозина, жизнеспособные цисты кишечных простейших остаются неокрашенными, а мертвые приобретают розовую окраску. Характер окраски живых и погибших цист при применении акридинового оранжевого под световым и люминесцентным микроскопом такой же, как и при определении их жизнеспособности в почве. 17. Методы испытания и отбора препаратов для дезинвазии 17.1. Изучение овицидной активности различных средств Основными условиями экспериментальной работы по определению овицидной активности химических препаратов должны быть: тщательное планирование, последовательность проведения опытов и их серий, выбор оптимальной концентрации химических веществ и экспозиции, оптимальная среда для испытуемого средства, правильное определение жизнеспособности яиц. Лабораторные опыты проводят в двух сериях. В первой - определяют степень воздействия изучаемых химических веществ на яйца гельминтов на стадии дробления и стадии инвазионной личинки. Во второй серии опытов испытывают только те препараты, которые проявили сильное или выраженное овицидное действие в первой серии. На стадии подготовки эксперимента устанавливают концентрацию испытуемых препаратов, планируемую экспозицию и стадию развития яиц. Взвесь яиц гельминтов помещают в чашки Петри (по 600-800 в каждой) или бюксы. Начинают испытание препарата при 3% разведении и экспозиции 30 мин. После этого яйца гельминтов отмывают водой вручную не менее 5, а с помощью центрифуги - не менее 2 раз. В контроле яйца гельминтов находятся в воде. Затем взвесь яиц гельминтов центрифугируют и выдерживают в термостате, меняя воду через каждые 2-3 суток. Жизнеспособность яиц (не менее 300) определяют через 15-20 суток общепринятыми методами. При выявлении эффективных овицидов исследования с ними повторяют, но уже в меньших концентрациях и, соответственно, экспозициях. Во второй серии опытов испытывают выявленные эффективные препараты на яйца гельминтов в фекалиях. На дощечку (дерево, цемент) размером 10x15 см наносят 0,5 г фекалий, обсемененных яйцами гельминтов (5 яиц на 1 куб. см). Рабочие растворы или эмульсии испытуемых веществ наносят на дощечки с помощью пульверизатора из расчета 1 л/кв. м. Контрольные дощечки поливают водой. Исследования наиболее часто проводят при экспозиции от 30 до 180 мин. Затем фекалии собирают, промывают водой, выделяют яйца гельминтов и культивируют их в термостате. После определения их жизнеспособности устанавливают эффективность испытуемого средства. Перед тем, как перейти к дальнейшей апробации выявленных овицидов определяют их токсичность и коррозионную активность. Степень овицидного действия испытуемых соединений оценивают по результатам 1 серии опытов: все химические вещества делят на 3 группы (обладающие сильными, выраженными и слабыми овицидными свойствами, то есть высокой, средней и слабой эффективностью). К овицидам с высокой эффективностью относят соединения, которые в наиболее приемлемых концентрациях вызывают гибель всех яиц гельминтов; ко вторым - соединения, убивающие свыше 50% яиц; к третьим - соединения, вызывающие гибель менее 50% яиц гельминтов. Критерий экспозиции предусматривается в пределах 30 мин. Во 2-й серии опытов экспозиция увеличивается до 60 мин. В производственных условиях оценку препаратов проводят по результатам дезинвазии помещений. Производственные опыты осуществляют в микроочагах гельминтозов. Составляют план-схему, в которой предусматривают место и количество обрабатываемой площади, концентрацию и норму расхода рабочего раствора препарата, экспозицию, количество проб почвы, которое необходимо взять до и после обработки объекта. Дезинвазию оценивают высокоэффективной в том случае, если овицидный эффект (ОЭ) достигает 90-100%; удовлетворительной, если ОЭ равен 60-90%; неудовлетворительной, если ОЭ менее 60%. В данной оценке за основные критерии принимают допустимые концентрации препарата и экспозицию в пределах 3 ч. Лабораторные опыты по определению эффективности обработки почвы овицидами проводят в нескольких сериях. В первой серии используют деревянные ящики шириной 20 см, длиной 45-60 см, глубиной 20-30 см. Дно и стенки ящиков имеют отверстия, а внутри они разделены на секции, предназначенные для разных экспозиций испытуемых препаратов. В контроле используют отдельный ящик. Почву разных видов помещают в ящики послойно (15, 10, 5, 1 см), закладывают пробы яиц на стадии дробления и отдельно на стадии инвазионной личинки (в каждой пробе не менее 1000 яиц). Взвесь яиц гельминтов вносят на полоски фильтровальной бумаги и вокруг нее в почву, огражденную проволочным каркасом. Через 1-3 суток на опытные участки вносят рабочий раствор препарата, а на контрольные - воду. Первоначально испытывают 3% раствор препарата при норме расхода 4 л/кв. м и экспозиции 1, 3, 5 суток. Затем эти пробы извлекают, отмывают от препарата (не менее 5 раз). Выделенные из проб яйца гельминтов культивируют в термостате (24-26 град. С). Жизнеспособность их определяют через 15-20 суток общепринятыми методами. По результатам этих исследований оценивают овицидную эффективность препарата. Опыт повторяют, используя раствор другой концентрации и экспозиции. Следующую серию опытов осуществляют с активными овицидами по такой же методике, но в почву при этом закладывают пробы фекалий, обсемененные яйцами гельминтов (извлеченные из концевых отделов маток гельминтов или полученные из фекалий зараженных животных). У наиболее перспективных овицидов определяют токсические и коррозионные свойства. Полевые и полупроизводственные опыты проводят в условиях, исключающих доступ животных и людей. Составляют схему опытов. В первой серии исследования проводят на рыхлой почве, во второй - на твердой, в третьей - на рыхлой и твердой, но после внесения препарата. Поверхность объекта покрывают пленкой. Во всех сериях опытов участок делят на секции в зависимости от экспозиции. Последующую работу проводят так же, как в лабораторных условиях. Оценку степени эффективности овицидных средств в почве проводят так же, как и препаратов, испытываемых на твердых поверхностях. Различия обусловлены особенностями объекта обеззараживания и свойствами испытуемого средства. Препарат оценивается по его способности вызывать гибель зародышей гельминтов в различных слоях почвы. С этим же связано и увеличение экспозиции опыта. 17.2. Определение овицидной и ларвицидной эффективности различных средств Эффективность воздействия химических и других средств на яйца и личинки гельминтов рассчитывается по результатам экспериментов по формуле Симонова А.П.: ОЭ = 100 - (а1 x c1/a2 x с2) x 100 - (Р1 - Р2)/n, где: ОЭ - овицидная эффективность препарата (в %); a1 - количество живых яиц гельминтов в опыте; a2 - количество живых яиц гельминтов в контроле; c1 - количество яиц, взятых для определения их жизнеспособности, в опыте; c2 - количество яиц, взятых для определения их жизнеспособности, в контроле; P1 - процент погибших яиц в опыте; Р2 - процент живых яиц в опыте; n - количество яиц во взвеси, взятой для испытания в опыте. 17.3. Изучение протистоцидной активности различных соединений Необходимые для исследования концентрации водных растворов испытуемых веществ готовят по методу серийных разведений в серологических пробирках. К 1 мл каждого разведения добавляют по 0,1 мл обогащенной взвеси цист соответствующего вида кишечных простейших. О минимальной протистоцидной дозе испытуемого вещества судят по концентрации водного раствора, вызывающей гибель 100% цист в течение 1-2 ч. Наблюдение за сроками выживаемости цист кишечных простейших в водных растворах испытуемых веществ осуществляют в течение 30 суток. В первые сутки осадок микроскопируют ежечасно, а затем 1 раз в сутки. Жизнеспособность цист простейших после приготовления из них препаратов определяют через различные промежутки времени при помощи люминесцентной микроскопии. В качестве люминофора применяют водный раствор акридинового оранжевого в разведении 1:500-1:1000. В препаратах, подвергшихся воздействию химических веществ, окрашенных водным раствором акридинового оранжевого, у жизнеспособных цист кишечных простейших оболочка слегка окрашивается в оранжевый цвет, цитоплазма остается неокрашенной и имеет темноватый оттенок. У погибших цист цитоплазма и оболочка имеют красный цвет. У дегенерирующих цист цитоплазма темно-салатного цвета, ядра ярко-салатные, четко выделяющиеся на фоне цитоплазмы. Результаты изучения протистоцидной активности химических и других соединений используют при определении эпидемической значимости того или иного фактора передачи и разработке способов обезвреживания от цист патогенных кишечных простейших различных объектов окружающей среды. Заключение Широкое распространение паразитарных болезней среди людей и животных способствует интенсивному обсеменению окружающей среды их возбудителями (яйцами аскарид, власоглавов, токсокар, онкосферами тениид, цистами амеб, лямблий, балантидиев, ооцистами криптоспоридий и др.). Возбудителей инвазий обнаруживают в почве, воде, предметах обихода, овощах, столовой зелени (абиотическая среда), в организмах окончательных, промежуточных и дополнительных хозяев (биотическая среда). Выявление возбудителей паразитозов (яиц и личинок гельминтов, цист кишечных патогенных простейших) - наиболее точный показатель санитарно-эпидемиологического неблагополучия (фекального загрязнения) объектов окружающей среды, представляющий значительный интерес для эпидемиологов и санитарных врачей. Поэтому наряду с бактериологическими, химическими, вирусологическими обязательны и санитарно-паразитологические исследования объектов окружающей среды. Санитарно-паразитологический контроль за состоянием среды обитания человека является важной составной частью профилактической работы органов и учреждений здравоохранения. Санитарно-оздоровительные и профилактические мероприятия с обеззараживанием источников инвазии и строгим лабораторным контролем за работой сооружений по подготовке питьевой воды, очистке сточных вод и животноводческих стоков, обезвреживанием нечистот, осадков сточных вод перед сбросом в поверхностные водоемы или на поля для удобрения и орошения сельскохозяйственных культур в современных условиях являются ведущими в обеспечении санитарно-эпидемиологической безопасности среды обитания человека. Лабораторный санитарно-паразитологический контроль является основным и часто единственным способом установить степень риска заражения населения возбудителями гельминтозов и кишечных протозоозов. На основе анализа показателей степени загрузки объектов окружающей среды инвазионным материалом, динамики инвазированности и заболеваемости населения, пораженности эпидемически значимых групп животных прогнозируются направленность и условия изменения риска заражения населения как по отдельным инвазиям, так и по группам паразитозов. Результаты лабораторных санитарно-паразитологических исследований позволяют оценивать обсемененность окружающей среды возбудителями паразитозов, риск новых заражений, прогнозировать заболеваемость населения и, на основе этого, планировать санитарные, противоэпидемические и лечебно-профилактические мероприятия, а также контролировать их эффективность. Список литературы 1. Василькова З.Г. Методы гельминтологических исследований. - М.: Медгиз, 1955. - 228 с. 2. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования окружающей среды. - М.: Росагропромиздат, 1991. - 145 с. 3. Романенко Н.А. Санитарная гельминтология. - М.: Медицина, 1982. - 120 с. 4. Романенко Н.А., Гафурова З.М. Осадок сточных вод. Паразитологическая характеристика. Методы обеззараживания и использования в сельском хозяйстве//Матер, конф. "Почва, отходы производства и потребления: проблемы охраны и контроля". - Пенза, 1996. - С. 7-10. 5. Романенко Н.А., Падченко И.К., Чебышев Н.В. Санитарная паразитология. - М.: Медицина, 2000. - 320 с. 6. Гузеева Т.М., Моськина О.В., Ключников С.И., Державина Т.Ю.//Матер. конф. "Актуальные аспекты паразитарных заболеваний в современный период". - г. Тюмень, 2008. - С. 64-65; С. 70-72. |
Похожие:
 |
Методические указания мук 2661-10 Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия... |
|
Методические указания мук 3007-12 Методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический... |
|
Методические указания мук 2429 08 Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия... |
 |
Методические указания мук 2429 08 Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия... |
|
Методические указания методические указания разработаны: Федеральной... Му 3011-12. Дезинфектология. "Неспецифическая профилактика клещевого вирусного энцефалита и иксодовых клещевых боррелиозов". Методические... |
|
Методические указания по курсовому проектированию по дисциплине «Проектирование... Электронный ресурс]: методические указания / О. Ф. Абрамова// Сборник «Методические указания» Выпуск. Электрон текстовые дан.(1файл:... |
|
Методические указания му 1891-04 Организация работы прививочного... Методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений государственной санитарно-эпидемиологической службы и лечебно-профилактических... |
|
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Методические указания предназначены для студентов факультета заочного социально-экономического образования специальности 040101.... |
|
Методические указания doc Методические указания по выполнению лабораторно... Данные методические указания для студентов являются частью учебно-методического комплекта по пм 01. «Техническое обслуживание и ремонт... |
|
Методические указания му 2… Лабораторная диагностика, лечение и профилактика особо опасных микозов. Методические указания. 2009. 66 с |
|
Методические указания для обучающихся Методические указания рассмотрены и утверждены на заседании кафедры от 23. 03. 2015 протокол №11 |
|
Методические указания по изучению учебной дисциплины Методические указания предназначены для преподавателей русского языка и литературы профессиональных образовательных организаций |
|
Методические указания по выполнению практических работ адресованы... Методические указания для выполнения практических работ являются частью основной профессиональной образовательной программы огбоу... |
|
Методические указания по проведению практических занятий Методические указания рассмотрены и одобрены на заседании пцк по укрупненной группе 140000 Электроснабжение (нпо и спо) |
|
Методические указания к лабораторной работе Барнаул 2008 ... |
|
Методические указания му 1252-03 Методические указания предназначены для специалистов санитарно-эпидемиологической службы и лечебно-профилактических организаций,... |