Методические указания мук 2661-10

Скачать 0.78 Mb.

Название	Методические указания мук 2661-10
страница	5/8
Тип	Методические указания

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Методические указания

1 2 3 4 5 6 7 8

В лаборатории стекла микроскопируют. Ведут учет количества и состояния найденных личинок.
14.3. Исследование травы и сена на наличие личинок

стронгилят. Метод Котельникова (1991)
Отбор проб. Траву для исследования собирают на пастбище (объединенная проба 0,5-1,0 кг). Для исследования используют нижнюю часть растений, так как наибольшее количество личинок стронгилят обнаруживают в прикорневой части травы, в 3-5 см от почвы. Перед исследованием траву разрезают на части ножницами, выбирая для исследования нижнюю часть растений. Отбор проб сена из стогов проводят аналогично.

Ход исследования. Для выявления личинок нематод применяют аппарат Бермана. Подготовленные нижние участки растений закладывают в аппарат Бермана, заливают теплой водой. Оставляют на 1-2 ч. Затем пробирки с осадком центрифугируют 1-2 мин. при 800 об./мин., надосадочную жидкость сливают, а осадок микроскопируют на предметном стекле.
14.4. Исследование травы и сена на наличие личинок

стронгилят. Метод Акулина
Отбор проб. Метод позволяет исследовать пробы трав большой массы (более 1 кг), что увеличивает вероятность выявления личинок стронгилят.

Оборудование.

Сита диаметром 31 см, высотой боковой стенки 12 см (сетка из нержавеющей проволоки, размер ячеек 1 мм, укрепляется на уровне 2 см от нижнего края сита).

Тазы диаметром 36 см (по верхнему краю), высотой 15 см, книзу таз имеет постепенное сужение.

Стеклянные воронки диаметром 18-20 см (по верхнему краю) с резиновыми трубками и пробирками на концах, установленные в штатив для воронок.

Ход исследования. Сито должно быть установлено в таз таким образом, чтобы нижний край сита упирался в сужение таза, тогда между сеткой сита и дном таза создается пространство высотой 5 см. Установив сито в тазу, его заполняют водой комнатной температуры. Уровень воды не должен доходить до верхнего края таза на 1,0-1,5 см. Образовавшиеся под сеткой пузырьки воздуха удаляют резким движением сита вверх-вниз. В каждое сито с водой вносят 100-120 г травы и оставляют на сутки, в течение которых личинки должны осесть на дно таза. Через сутки сита с травой осторожно удаляют из таза. Через 15-20 мин. после удаления сита надосадочную жидкость сливают, оставляя на дне таза около 1,0-1,5 л. Жидкость перемешивают и вместе с осадком переливают в воронки с пробирками на концах. Отстаивание личинок в воронках продолжается 1-2 ч. Надосадочную жидкость удаляют из пробирок, осадок микроскопируют. При обилии личинок в осадке и трудности просмотра и подсчета их применяют способ разведений. Личинки подсчитывают при малом увеличении микроскопа. В каплю воды с личинками для их обездвиживания вносят 1 каплю раствора Люголя.
14.5. Исследование моллюсков на зараженность шистосоматидами
Отбор проб. Роль промежуточных хозяев шистосоматид (T. ocellata) в средней полосе России в основном выполняют моллюски рода Lymnaea: L. auricularia, L. ovata, L. psilia psilia, L. balthica; в меньшей степени: L. stagnate, L. fragilis, L. palustris; относительно редко: L. intermedia, L. monnardi, L. fontinalis, L. atra. Основное значение (с учетом распространенности, плотности популяций, общей численности в водоемах разных типов, инвазированности возбудителями шистосоматид) имеют первые 4 вида.

Для установления экстенсивности инвазии моллюсков шистосоматидами в конкретных водоемах репрезентативная исследуемая выборка моллюсков должна составлять не менее 50 экз. (желательно - 100 экз.) каждого вида, встречающегося в водоеме. Моллюсков собирают в прибрежной полосе шириной до 5 м, с грунта или водных растений, вручную или прочным бентосным сачком, в поверхностном слое воды или на глубине до 30-40 см.

Учитывая особенности биологии легочных моллюсков (сроки жизни не превышают 2 лет, период размножения приходится на начало лета, массовая гибель взрослых ("прошлогодних") особей наблюдается в середине лета), моллюсков на зараженность шистосоматидами исследуют в первой трети летнего сезона. Моллюсков новой генерации ("сеголеток") исследуют в последней трети летнего и начале осеннего периода.

Чаще всего моллюски встречаются в мелководных, хорошо прогреваемых участках пойменных озер, прудов, речных заливов, стариц, отстойников, обильно заросших водной растительностью. Распределение и плотность популяций моллюсков в разных зонах водоема могут быть весьма неравномерными - от единичных до 200-300 экз./кв. м. Особенно многочисленными могут быть популяции сравнительно мелких видов моллюсков: L. ovata, L. palustris, L. balthica. Наиболее высокой численности моллюски достигают в прибрежной полосе шириной от 1 до 10 метров (в среднем - 5 м). Именно эти мелководные участки водоемов представляют наибольшую опасность в отношении риска заражения человека церкариозами.

Ход исследования. При исследовании живых моллюсков применяют метод прижизненной диагностики, основанный на положительном фототаксисе церкарий. Он дает наиболее достоверные результаты лишь тогда, когда партеногенетический цикл паразитов в моллюсках завершился формированием церкарий. Моллюсков поштучно рассаживают в бюксы с водой, выставляют под яркий (солнечный или искусственный) свет на 30-40 мин. Затем бюксы поочередно просматривают под стереоскопическим бинокуляром при увеличении х20-30. В микроаквариумах, где находятся инвазированные моллюски, хорошо заметны активно двигающиеся церкарии.

Для более детального исследования церкарий применяют метод компрессии гепатопанкреаса моллюсков. Тела исследуемых моллюсков (поштучно) извлекают пинцетом из раковин, раздавливают между двумя предметными стеклами и просматривают при малом увеличении (х40-60) светового микроскопа. Церкарии шистосоматид относятся к группе "вилкохвостых" (или фуркоцеркарий), так как их хвост на конце раздвоен в виде вилки. Похожее строение хвоста имеют и церкарии трематод некоторых других семейств, которые не нападают на человека и не вызывают дерматиты. Учитывать этот факт необходимо для избежания неверной экспертной оценки и ошибочного завышения степени риска заражения человека церкариями в конкретных обследуемых водоемах.
Таблица 4
Морфология церкарий Т. ocellata

Общий размер	Довольно крупные: общая длина (тело церкарий + стебель хвоста + фурки) достигает 1,0-1,3 мм
1	2
Основные размеры (в микронах)	Длина тела вместе с головным органом - 215-360, ширина - 50-90, длина стебля хвоста - 300-375, ширина стебля хвоста - 34-45, длина вилок (фурок) хвоста - 200-275, диаметр переднего (головного) органа - 60-85, диаметр брюшной присоски - 35
Цвет	Тело церкарии прозрачное, слегка желтоватого цвета
Железы проникновения	Пять пар, колбовидной формы, хорошо видны выводные протоки
Головной орган	На дорзальной поверхности имеется два пигментированных глазка, расположенных немного впереди брюшной присоски
Хвостовой орган	Стебель хвоста длиннее фурок. Утолщение в передней части стебля хвоста отсутствует
Брюшная присоска	Мощная, хорошо заметна (особенно при боковом положении церкарий), может выпячиваться в виде "трубки"
Характер движения	Движения живых, вышедших из моллюсков в воду, церкарий энергичные, как бы "ввинчивающиеся в воду хвостом вперед". Двигаются в направлении "к свету" и почти мгновенно реагируют на изменения освещенности. Механические колебания воды и растительного субстрата, имитирующие движение лапок утки, стимулируют движения церкарий
Жизнеспособность	В течение двух суток при температуре воды 17-20 град. С и не менее трех суток при 5-10 град. С
Инвазионость	В жизнеспособном состоянии постоянна

14.6. Разработка экспертного заключения об опасности

природного объекта (водоема, пастбища) в отношении

риска заражения людей паразитозами
Обследование природного объекта (водоема, серии водоемов, отдельных их зон, пастбища, урочищ и пр.) должно завершаться экспертным заключением: "Об опасности природного объекта в отношении риска заражения людей".

Рассмотрим последовательность подготовки экспертного заключения на примере водоема - места обитания водоплавающих птиц. Выбор объекта зависит от его эпидемиологической значимости. Прежде всего, это необходимо в отношении водоемов, имеющих рекреационное значение, т.е. расположенных в зонах отдыха людей и разрешенных для купания.

Для составления экспертного заключения необходима первичная информация, получаемая при комплексном обследовании водоема. Обследования проводят в середине дня при солнечной погоде (при условиях максимальной активности промежуточных хозяев и церкарий шистосоматид). Информацию по нижеприведенным показателям заносят в лабораторный журнал или компьютерную базу данных. Учитывают следующие показатели:

1. Географическое положение водоема и его название.

2. Дата проведения обследования и метеоусловия.

3. Тип водоема (одиночное озеро, одиночный пруд, система сообщающихся прудов или озер, участок реки, участок канала, система водоемов, образованных в результате зарегулирования русла реки, участок водохранилища, отстойник и др.).

4. Площадь обследуемой акватории.

5. Число обследованных станций (число обследованных в водоеме прибрежных участков длиной 5 м, шириной 1-2 м).

6. Видовой состав легочных моллюсков, обнаруженных в водоеме и собранных для лабораторных исследований с целью определения пораженности церкариями шистосоматид.

7. Плотность популяций моллюсков (рассчитывается по среднему числу особей на 1 кв. м).

8. Число моллюсков, взятых для лабораторных исследований (указывать отдельно для каждого вида моллюсков).

9. Экстенсивность инвазии моллюсков шистосоматидами (число инвазированных от числа исследованных в процентах для каждого вида моллюсков).

10. Степень зарастания водоема (растительности нет; зарастание слабое (менее 10 стеблей на 1 кв. м); зарастание умеренное и сильное (более 10 стеблей на 1 кв. м); наличие плавающей растительности).

11. Характер фоновой растительности (учитываются: элодея, рдесты, осоки, роголистник, нимфеи, частуха, стрелолист, плавающая растительность (прежде всего, ряска), крупные макрофиты (тростник, камыш, рогоз, аир).

12. Наличие в водоеме утиных птиц (прежде всего, кряквы). Указывают численность птиц на момент обследования.

13. Степень загрязненности водоема (остатки пищи, остатки предметов быта, промышленные отходы, строительный мусор и др.). Водоем (его участок) загрязнен слабо: менее 3 указанных выше предметов загрязнения на 10 м прибрежной акватории шириной 3 м; водоем (его участок) загрязнен умеренно или сильно: более 3 предметов загрязнения в той же акватории.

14. Использование водоема в рекреационных целях ("ДА", "НЕТ"; отдельно указывают: используется ли водоем или отдельный его участок, как официально разрешенное место для купания людей).

15. Благоустроенность водоема: водоем полностью бетонирован, полностью или частично бетонирована береговая линия, производится или нет регулярная очистка от мусора и растительности, имеются или нет оснащенные пляжные территории и огороженные от остальных мест акватории для купания с песчаным грунтом без растительности, имеются или нет (на остальных береговых участках или в целом на несанкционированных для купания водоемах) знаки, запрещающие купание, подкормку птиц, свалку мусора.

На основании проведенных полевых и лабораторных исследований, составляют экспертное заключение об эпидемической опасности водоема (серии водоемов, отдельных их участков) в отношении риска заражения людей церкариозом. При этом делают вывод о том, что:

1) риск заражения отсутствует (либо: нет экологических условий, благоприятных для обитания промежуточных хозяев возбудителей и нет легочных моллюсков, либо: нет источника заражения, либо: отсутствуют оба эти фактора);

2) имеется потенциальный риск заражения (на исследуемой территории, в принципе, имеется источник инвазии (водоплавающие, прежде всего утиные, птицы) и имеются популяции промежуточных хозяев возбудителя (одного или нескольких видов легочных моллюсков). Однако на период обследования водоема в исследованной выборке моллюсков не выявлены особи, зараженные церкариями шистосоматид);

3) риск заражения присутствует (имеются популяции легочных моллюсков и в исследованной выборке обнаружены особи, зараженные шистосоматидами).

Во избежание ошибочного суждения о степени риска и, учитывая, что этот показатель изменчив в зависимости от целого ряда условий, определением "риск заражения присутствует", как правило, целесообразно ограничиться.

Когда ряд факторов со всей очевидностью указывает на высокий риск заражения в конкретных водоемах или их отдельных участках (обнаружена высокая численность популяций промежуточных хозяев, выявлена высокая пораженность моллюсков церкариями шистосоматид, имеется обильное зарастание водоема при одновременно его слабо выраженной загрязненности, водоем фактически используется для купания, особенно детьми, даже в тех случаях, когда он официально не признан рекреационной зоной), в экспертном заключении этот факт следует особо подчеркивать.
15. Методы определения жизнеспособности яиц

и личинок гельминтов
Жизнеспособность яиц гельминтов определяют по внешнему виду, путем окрашивания витальными красками, культивированием в оптимальных условиях и постановкой биологической пробы.
15.1. Определение жизнеспособности яиц или личинок

гельминтов по внешнему виду
Яйца гельминтов микроскопируют вначале при малом, затем при большом увеличении. У деформированных и мертвых яиц гельминтов оболочка разорвана или прогнута внутрь, содержимое мутное, разрыхленное. У нежизнеспособных яиц, содержащих шары дробления (бластомеры) разного размера, неправильной формы, часто сдвинуты к одному полюсу. Иногда встречаются аномальные яйца, которые, имея внешние уродства, развиваются нормально. У живых личинок аскарид мелкая зернистость имеется только в средней части тела, по мере их гибели она распространяется по всему телу, появляются крупные блестящие гиалиновые вакуоли, так называемые, "нити жемчуга".

Для определения жизнеспособности зрелых яиц аскарид, власоглавов, остриц следует нагреть препарат до температуры не выше 37 град. С, чтобы вызвать активные движения личинок.

Жизнеспособность личинок аскарид и власоглавов удобнее оценивать после их высвобождения из скорлупы яйца, которое достигается надавливанием на покровное стекло препарата препаровальной иглой или пинцетом.

У инвазионных личинок аскарид часто замечается чехлик, отслоившийся на головном конце, а у закончивших развитие в яйце личинок власоглавов на этом месте при большом увеличении обнаруживается стилет. У погибших личинок гельминтов независимо от их места нахождения (в яйце или вне его) можно заметить распад тела. При этом внутренняя структура личинки становится глыбчатой или зернистой, а тело мутным и непрозрачным. В теле обнаруживаются вакуоли, а на кутикуле - разрывы.

Жизнеспособность онкосфер тениид (бычьего, свиного цепней и др.) определяют по движению зародышей при воздействии на них пищеварительных ферментов. Яйца помещают на часовое стекло с желудочным соком собаки или искусственным дуоденальным соком. Состав последнего: панкреатина - 0,5 г, натрия бикарбоната - 0,09 г, дистиллированной воды - 5 мл. Часовые стекла с яйцами ставят в термостат при 36-38 град. С на 4 часа. При этом живые зародыши освобождаются от оболочек. Оболочки живых онкосфер также растворяются в подкисленном пепсине и в щелочном растворе трипсина через 6-8 часов в термостате при 38 град. С.

1 2 3 4 5 6 7 8

	Методические указания мук 2661-10 Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия...		Методические указания мук 3007-12 Методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический...
	Методические указания мук 2429 08 Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия...		Методические указания мук 2429 08 Методические указания предназначены для органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия...
	Методические указания методические указания разработаны: Федеральной... Му 3011-12. Дезинфектология. "Неспецифическая профилактика клещевого вирусного энцефалита и иксодовых клещевых боррелиозов". Методические...		Методические указания по курсовому проектированию по дисциплине «Проектирование... Электронный ресурс]: методические указания / О. Ф. Абрамова// Сборник «Методические указания» Выпуск. Электрон текстовые дан.(1файл:...
	Методические указания му 1891-04 Организация работы прививочного... Методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений государственной санитарно-эпидемиологической службы и лечебно-профилактических...		Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Методические указания предназначены для студентов факультета заочного социально-экономического образования специальности 040101....
	Методические указания doc Методические указания по выполнению лабораторно... Данные методические указания для студентов являются частью учебно-методического комплекта по пм 01. «Техническое обслуживание и ремонт...		Методические указания му 2… Лабораторная диагностика, лечение и профилактика особо опасных микозов. Методические указания. 2009. 66 с
	Методические указания для обучающихся Методические указания рассмотрены и утверждены на заседании кафедры от 23. 03. 2015 протокол №11		Методические указания по изучению учебной дисциплины Методические указания предназначены для преподавателей русского языка и литературы профессиональных образовательных организаций
	Методические указания по выполнению практических работ адресованы... Методические указания для выполнения практических работ являются частью основной профессиональной образовательной программы огбоу...		Методические указания по проведению практических занятий Методические указания рассмотрены и одобрены на заседании пцк по укрупненной группе 140000 Электроснабжение (нпо и спо)
	Методические указания к лабораторной работе Барнаул 2008 ...		Методические указания му 1252-03 Методические указания предназначены для специалистов санитарно-эпидемиологической службы и лечебно-профилактических организаций,...

Методические указания мук 2661-10

Похожие: