Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции




НазваниеАдаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции
страница2/7
ТипАвтореферат
rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Автореферат
1   2   3   4   5   6   7

Публикации

По теме диссертации опубликована 31 работа; среди них монография и 11 статей в журналах, рекомендованных для опубликования основных результатов диссертаций на соискание ученой степени доктора наук.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 4-х глав, заключения, выводов, практических рекомендаций. Общий объём работы составляет 243 страницы. Текст иллюстрирован 40 таблицами и 37 рисунками. Список литературы включает 280 работ отечественных и зарубежных авторов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал исследования. В качестве биологического материала для определения функциональной активности комплемента были использованы пробы сыворотки крови.

Экспериментальные исследования проведены на 42-х белых беспородных крысах, массой 250-330 грамм. Для изучения реакции системы комплемента крысам внутрибрюшинно вводили адреналин (в дозе 1 мг/кг веса), - (тропафен в дозе 10 мг/кг веса) и - (индерал в дозе 10 мг/кг веса) адреноблокаторы. Введение препарата проводили однократное. Кровь брали из хвоста: до начала воздействия, через 5 и 20 минут, через 2 и 24 часа; на 3, 7, 10, 20 и 30 сутки.

В исследованиях по изучению концентрации компонентов комплемента при моделировании гипоксической гипоксии, при многократном воздействии высокой температуры внешней среды (50°С) и при физической нагрузке приняли участие 97 практически здоровых мужчин в возрасте от 22 до 42 лет, допущенных к освидетельствованиям по состоянию здоровья, в соответствии с заключением врачебно-летной комиссии1. Кровь брали из пальца до начала воздействия и в соответствии с целью каждого исследования: через 20 минут, 3 часа, 1-7 сутки после воздействия.

Определение концентрации комплемента у 30 пациентов (11 мужчин и 19 женщин, средний возраст 532 года) с гипертонической болезнью I-II стадий проводили до начала терапии и после курса лечения (через 2 месяца). Для коррекции артериального давления применяли фармакологические препараты, относящиеся к блокаторам медленных кальциевых каналов группы 1,4-дигидропиродинов (сискор и нитрендипин). Контрольная группа состояла из больных с гипертонической болезнью, терапия которых не включала прием блокаторов кальциевых каналов.

Метод исследования системы комплемента. Определение функциональной активности белков системы комплемента (С1-С5) в сыворотке крови проводили в микропанелях с помощью комплекта реагентов (НИИ гематологии и переливания крови г. Киров), в соответствии с инструкцией. Комплект реагентов предназначен для определения функциональной активности С1-С5 компонентов комплемента в сыворотке и плазме крови человека методом гемолитического титрования. Для постановки реакции использовали 40 мкл реагента в соответствующем разведении, указанном на этикетке флакона (рабочие разведения). Анализ проводили следующим образом:

1. Для приготовления изотонического веронал- мединалового буфера (VBS)2+: растворяли 2,8 г веронала, 1,5 г мединала, 42,5 г натрия хлорида доводят до 1 л дистиллированной водой, добавляли 2,5 мл 1М раствора магния хлорида и 0,75 мл 1М раствора кальция хлорида (рН 7,4). Перед употреблением буфер разводили 1:4 дистиллированной водой.

2. Для приготовления сенсибилизированных эритроцитов барана (ЕА) использовали кровь барана стерильно заготавленную в равном объеме раствора Олсвера, отмывали до прозрачного супернатанта и стандартизировали: 0,2 мл суспензии с 2,8 мл Н2О должны обладать поглощением 0,7 ОЕ541, что составляет 1109 клеток в мл. Для стандартизации пользовались формулой Vк=Vо Д541/0,7, где Vк – конечный объем суспензии, Vо – начальный объем с концентрацией, определяемой на спектрофотометре при длине волны 541 нм. К 10 мл взвеси эритроцитов 1109 клеток в мл прибавляли 10 мл гемолитической сыворотки, разбавленной буфером согласно наставлению по применению гемолитической сыворотки, тщательно перемешивали и выдерживали 30 минут при 37С, периодически перемешивая. Взвесь ЕА доводили до концентрации 1,5108 клеток в мл, добавляли 46,7 мл буфера; 0,2 мл ЕА с 2,8 мл Н2О должны иметь поглощение 1 при длине волны 412 нм.

Растворение сухих реагентов производили добавлением дистиллированной воды при легком встряхивании: 0,5 мл – для R2-R5 и 1 мл для R1. Непосредственно перед титрованием готовили рабочее разведение реагентов буфером (VBS)2+ как указано на этикетке флакона. При работе руководствовались указанными рабочими разведениями.

3. Постановка реакции: в 5 рядов микропанели вносили по 25 мкл веронал- мединалового буфера, в первую лунку каждого ряда добавляли 25 мкл исследуемой сыворотки. В каждом ряду готовили разведения в геометрической прогрессии. В каждую лунку вносили по 5 мкл соответствующего реагента, 20 мкл ЕА с концентрацией 1,5108 клеток в мл. В 6 ряду смотрели общую гемолитическую активность сыворотки без добавления реагентов. Микропанели выдерживали 60 минут при температуре 37С.. Результаты учитывали визуально по последней лунке с полным гемолизом (Вавилова Л.М., Кузнецова Н.Н., Голосова Т.В., 1991).

Концентрацию сывороточных иммуноглобулинов трех классов М, А и G определяли спектрофотометрическим методом (Чиркин В.В., Венгеров Ю.Ю., Кожевникова Г.Н. и др., 1990).

Доступность, простота, высокая эффективность, точность методов, отечественные наборы реактивов позволяют применять используемые нами методы в любых лечебно-профилактических учреждениях.

Моделирование неблагоприятных факторов внешней среды. Острую гипоксическую гипоксию моделировали путем проведения ступенчатого подъема испытателей в барокамере на высоту до 9 км с 5-ти минутными площадками на высоте 5 км и более. Скорость подъема 15- 20 м/сек. Количественная оценка высотной устойчивости включала определение «высотного потолка» и «резервного времени» нахождения испытателей на высотах от 5 км и выше Высотный потолок определялся индивидуальной чувствительностью. Для оценки состояния испытуемых им предлагали простейшие арифметические задачи. Во время пребывания на «площадках» испытатели выполняли в течение 1 мин тест «письменный счет» (последовательное вычитание из трехзначного числа цифры 17), заполняли бланки теста дифференцированной самооценки личности, а также устно решали предъявляемые примеры из таблицы умножения. Неправильные ответы, замедление решения простых примеров или полная неспособность испытателя их решать считались достоверными признаками нарушения долговременной памяти и служили сигналом для подачи кислорода и прекращения гипоксического воздействия. Для оценки реакций сердечно­-сосудистой системы на высотную гипоксию проводили регистрацию ЭКГ, а также определение систолического и диастолического артериального давления; среднего АД методом тетрополярной реографии с последующим расчетом систолического объема, общего периферического сопротивления, минутного объема кровотока. К медицинским показаниям к прекращению исследований при любом виде экстремального воздействия являлись: отказ испытателя от продолжения исследования по субъективной непереносимости воздействия; признаки заболеваний, угрожающих состоянию здоровья и жизни испытателя.

Для выявления более четкой реакции организма на прием углеводов и жиров использовали физическую нагрузку у нетренированных лиц (велоэргометрия 600 кгм/мин в течение 10 минут).

Для тренировки к высокой температуре была использована термокамера, в которой моделировались следующие условия: +50ºC, влажность 30-35%, скорость ветра 2 м/сек, экспозиция ежедневная по 2 часа, в течение 5 дней. Затем два дня испытуемые отдыхали, после чего проводилось заключительное исследование (7-е сутки).

Характеристика используемых в работе фармакологических препаратов:

Тропафен относится к группе α-адреноблокаторов. Вызывает уменьшение или пол­ное снятие α-адренергических эффектов, вызываемых адреналином, норадреналином и адреномиметическими веществами, а также раздражением симпа­тических нервов. Сильно расширяет периферические сосуды и вызывает пони­жение артериального давления.

Анаприлин (Обзидан, Индерал) является специфическим -адреноблокатором уменьшает или снимает аффекты, связанные с возбуждением -адренорецепторов. Ослабляя влияние симпатической импульсации на -адренорецепторы сердца, препарат уменьшает частоту сердечных сокращений, блокирует эффект адреналина, норадреналина.

Амтизола сукцинат (0,1г) - циклическое производное первого отечественного атигипоксанта гутимина. Изучение действия амтизола при массивных кровопотерях и неотложных состояниях, сопровождающихся гипоксией различного генеза, показало, что этот препарат является новым перспективным фармакологическим средством с антигипоксическим действием.

Гидазепам (0,1 г) 7-Бром-1-(Гидразинокарбонил)метил-5-фенил-1,2-дигидро-ЗН-1,4- бензодиазепин-2 он обладает анксиолитическим, противосудорожным, миорелаксирующим действием.

Ноотропил (пирацетам) (1,6 г) - 2-оксо-1-пирролидин ацетамид препарат из класса ноотропов, который относится к числу препаратов метаболического типа действия.

Пробукол (1г), препарат являющийся структурным аналогом синтетичес­кого фенольного антиоксиданта ионола, широко используется в клинической практике.

Яктон (0,3 г) - сукцинат моно/(2-диметиламино) этилового эфира янтарной кислоты. Выявлено защитное действие препарата, как в отношении функциональной активности ЦНС, так и раз­вития основных патофизиологических проявлений стресс – синдрома.

Комбинация препаратов представляет собой сочетанное применение пробукола, амтизола сукцината и яктона в той же дозе, что и каждый препарат в отдельности.

Эйконол – 1 желатиновая капсула содержит жирные полиненасыщенные кислоты семейства оме­га-3 (эйкозапентаеновая и докозагексаеновая и др. кислоты) до 28%, насыщенные жирные кислоты 30%, мононенасыщенные жирные кислоты 42%, витамины A, D и Е.

Ацефен (0,3 г) – стимулятор ЦНС и «регулятор обмена» в центральных, периферических и вегетативных нейронах. Активирует нервно-психическую деятельность, регулирует обмен в нервной клетке, оказывая влияние на обмен углеводов и клеточное дыхание.

Аскорбиновая кислота (0,25 г) восполняет дефицит витамина С, оказывает метаболическое, регулирующее окислитель­но-восстановительные процессы и антиоксидантное действие.

Реакцию комплемента на плацебо дополнительно контролировали исследованием воздействия того же неблагоприятного фактора без коррекции фармакологическими препаратами.

Общее количество выполненных работ составляет 328350 анализа. Статистическая обработка результатов проведена по общепри­нятым методикам параметрической и вариационной статистики. Рас­чет достоверности различий данных по критерию Стьюдента, дисперсионный анализ повторных измерений и корреляционная связь между показателями рассчитывались с помощью пакета компьютерной программы «BIOSTAT». Различия между двумя средними величинами считались достоверными при Р0,05.


РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В основе стимулирующего эффекта стресса на иммунную систему лежит активация симпатической системы и действие физиологических концентраций катехоламинов, вазопрессина и глюкокортикоидов. Процессы, происходящие при остром стрессе первые 48 часов, демонстрируют запас прочности врожденной резистентности в конкретный момент времени. Для уточнения ответной реакции белков системы комплемента проведено экспериментальное исследование на модели стресса у животных (таблица 1).

Через 5 минут после введения адреналина in vivo животным мы обнаружили параллельное снижение как концентрации С2 белка до 5,846 ± 1,091 титрационных единиц (P < 0,001), так и С4 белка до 3,692 ± 0,7284 (P < 0,001), а через 20 минут – повышение концентрации С2 белка до 12,0 ± 1,109 (P = 0,038) и С4 белка до 11,69 ± 1,237 (P = 0,008), в сравнении с фоновыми данными (9,077 ± 1,293 и 7,846 ± 1,25 соответственно).

Динамические изменения С2 и С4 компонентов комплемента отражают функцию этих белков в организме. Растрата С2 компонента комплемента в качестве фермента, необходимого для расщепления аргинина в цепочке адаптационных процессов «С2 → аргинин → NO», ведет к снижению его концентрации.

Таблица 1

Изменения концентрации компонентов комплемента в ответ на введение адреналина животным in vivo

Компоненты комплемента

Показатели концентрации белков в титрационных единицах

До введения адреналина

Через 5 минут после введения адреналина

Через 20 минут после введения адреналина

Через 2 часа после введения адреналина

Через 1 сутки после введения адреналина

С1

16,31±2.33

15,69±2,73

15,54±4,36

15,69±2,41

23,23±5,6

С2

9,077±1,29

5,846±1,09***

12,0±1,10*

7,0 ±1,261

9,231±1,38

С3

14,0±1,60

12,0±1,78

14,4±2,561

11,6±2,491

11,2±1,436

С4

7,84±1,25

3,692±0,72***

11,69±1,23**

7,92±2,26

9,538±1,60

С5

16,5±3,64

14,6±3,99

19,4±4,40

16,8±3,467

21,2±4,133

СНобщ

41,56±16,2

34,25±12,23

38.81±8,52

39,25±15,1

39,5±7,571
1   2   3   4   5   6   7

Похожие:

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconИонные реакции
«ионые реакции», «ионы», «молекулярно-ионные уравнения», «реакции нейтрализации», «признак химической реакции»

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconКоррекции состояний не установленной этиологии поражающих организм человека
Универсальная Комбинированная Методика (укм) предназначена, для коррекции тяжёлых стадий патологических состояний организма человека,...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconV это скорость, с которой уменьшается конценттрация субстрата или...
Ферменты специфические белки, обладающие каталитической активностью, состоящие из одной или нескольких одинаковых или различных субъединиц....

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconТема: «Неблагоприятные (нежелательные) побочные реакции. Фармаконадзор.»
Терминологию в области безопасности лс: нежелательные (неблагоприятные) побочные (лекарственные) реакции, побочные эффекты, нежелательные...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconНовосибирск
В монографии приведены результаты теоретических и практических исследований в области контрактивной биоэлектрокинетики, позволяющие...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconФедеральное медико-биологическое агентство
Стручков П. В. – д м н., зав кафедрой клинической физиологии и функциональной диагностики ипк, заведующий отделением функциональной...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconОрганизма и здоровье
Очищению полевой формы жизни, толстого кишечника, жидкостных сред организма и печени

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconУнифицированный клинический протокол оказания медицинской помощи при функциональной диспепсии
...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconПобочные реакции и осложнения на прививки
Вакцины – это не святая вода. Это иммунобиологический активный препарат, вызывающий определенные изменения в организме желательные,...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconАдаптационные игры с детьми раздел 1
Цель: установление тактильных контактов с ребёнком, снятие эмоционального напряжения

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconОбщество с ограниченной ответственностью «Газпром связь» (ооо «Газпром связь»)

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconМетодические рекомендации к практическому занятию для студентов по...
Неотложная помощь в приступном периоде. Острые аллергические реакции у детей генерализованные (анафилактический шок и токсико-аллергические...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconИнструкция по сборке и эксплуатации велоэргометра
Вы уже сделали! Занятия на велотренажере это один из самых действенных способов в кротчайший период добиться желаемых результатов...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconРекомендации по применению препаратов стабильного йода населением...
ЩЖ) и организма от радиоактивных изотопов йода (Утверждено Зам министра здравоохранения РФ 31 марта 1993г

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconЗащита организма без побочных эффектов
Н 92 Натуральные антибиотики. Защита организма без побочных эффектов. / Пер с нем. Ю. Ю. Зленко — М.: Ооо тд «Издательство Мир книги»,...

Адаптационные реакции организма: связь с функциональной активностью комплемента, возможности коррекции iconТиповая форма котировочная документация по запросу котировок Поставка...
Поставка исполнительных механизмов и функциональной аппаратуры для капитального ремонта пк-1


Руководство, инструкция по применению






При копировании материала укажите ссылку © 2018
контакты
rykovodstvo.ru
Поиск