3 альтернативные вопросы для текущего контроля, проводимого на каждом занятии путем фронтального опроса

Скачать 2.59 Mb.

Название	3 альтернативные вопросы для текущего контроля, проводимого на каждом занятии путем фронтального опроса
страница	5/30
Тип	Документы

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Документы

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 30

1.3. Количественное определение белка биуретовым методом. Построение калибровочных кривых

Определение концентрации белка проводят в научных учреждениях при изучении, выделении и очистке белков; в промышленности в процессе получения ферментов, пищевых белков, белковых лекарственных препаратов; в медицинских биохимических лабораториях для оценки состояния печени и почек.

Существует много разных методов количественного определения белков. Среди них широкое распространение получили колориметрические методы, основанные на способности белков давать окрашенные комплексы с рядом реактивов (цветные реакции). Среди этих методов наиболее распространены биуретовый метод и его модификация (метод Лоури^¹).
Цель работы

Освоить работу фотоэлектроколориметра (ФЭК). Научиться строить стандартные калибровочные кривые. Определить содержание белка в пробе с неизвестной концентрацией.
Принцип метода

Биуретовый метод основан на образовании окрашенного в фиолетовый цвет комплекса пептидных связей белка с ионами двухвалентной меди в щелочной среде (биуретовая реакция). Интенсивность развивающейся окраски раствора прямо пропорциональна концентрации белка и определяется фотометрически. Для количественного определения белка измеряют интенсивность окраски стандартных растворов белка с известной концентрацией (величину оптической плотности Dст). По полученным данным строят график зависимости оптической плотности окрашенных растворов от концентрации в них белка (стандартную калибровочную кривую). На оси ординат всегда откладывают величину D как функцию от задаваемых значений (см. рисунок).

Измеряют оптическую плотность Dх окрашенного раствора с неизвестной концентрацией белка и по стандартной кривой определяют в нем концентрацию белка. В качестве стандартного белка обычно используют раствор сывороточного альбумина.
Выполнение работы

Реактивы, мл	Контроль	Стандартный белок 10 мг/мл	Стандартный белок 20 мг/мл	Стандартный белок 30 мг/мл	Неизвестный белок Х мг/мл
Раствор сывороточного альбумина, мл	—	0,2	0,2	0,2	0,2
Н₂О, мл	0,2	—	—	—	—
Биуретовый реактив*, мл	5	5	5	5	5
Перемешивают и инкубируют 30 минут при комнатной температуре
Фотометрируют против Н₂О ( = 545 нм, толщина кюветы 1 см). D₅₄₅
Dст – Dк; Dх – Dк

*Биуретовый реактив: исходный концентрат (медь сернокислая – 120 ммоль/л, калий иодистый – 300 ммоль/л, калий-натрий виннокислый – 320 ммоль/л, гидроксид натрия –3 моль/л) разводят перед работой 1:19

Оформление работы

В рабочей тетради записать и заполнить таблицу; построить стандартную кривую и определить по ней концентрацию белка в неизвестном растворе.

Выводы

Тестовые задания по теме: «Аминокислоты и простые белки»
1) Ответить на каждый вопрос однозначно: «да» или «нет»

Имидазольное кольцо гистидина содержит 1 атом азота.
N-концевая аминокислота в дипептиде гистидиллизин - гистидин.
С-концевая аминокислота в трипептиде серилпролилглицин - глицин.
Альбумины сыворотки крови выполняют транспортную функцию.
Пролин содержит имино-группу.
Аспарагиновая кислота является производным янтарной кислоты.
Все ли пептиды дают положительную биуретовую реакцию?
Зависит ли интенсивность окраски вещества в растворе от его концентрации?
Можно ли разделить белки методом высаливания, используя сернокислую медь (сульфат меди)?
Встречаются ли в организме человека аминокислоты, которые не входят в состав белков?
Участвует ли ε-NH₂-группа лизина в образовании пептидной связи в белках?
Обладают ли радикалы серина и валина гидрофильными свойствами?

2) Выбрать один правильный ответ

Аминокислота с незаряженным радикалом:

треонин

лизин

аргинин

гистидин

глутаминовая кислота

Для определения оптической плотности синего раствора используют светофильтр:

голубой

желтый

красный

зеленый

синий

3) Найти соответствие

АМК	Химическая группа в составе радикалов
метионин серин аргинин цистеин аспарагин	А. гидроксильная Б. амидная В. тиометильная Г. гуанидиловая Д. сульфгидрильная

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 30

Похожие:

	Техническое задание Предметов настоящего тендера является выполнение технического обслуживания (ТО), текущего ремонта (ТР) вилочных погрузчиков и фронтального...		Техническое задание на поставку фронтального погрузчика hitachi zw220... П-14 «На право заключения договора купли-продажи фронтального погрузчика для целей лизинга для нужд ао «ниаэп»»
	Инструкция по охране труда для машиниста фронтального погрузчика... После чего делаются соответствующие записи в Ведомость регистрации по охране труда		Контрольные вопросы по теме: Для успешной работы на практическом занятии Гоу впо «Уральская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
	Рабочая программа дисциплины в. Од. 6 «Основы судебной компьютерно-технической экспертизы» Оценочные средства для текущего контроля успеваемости, промежуточной аттестации по итогам освоения дисциплины и контроля самостоятельной...		Методическая разработка занятия по дисциплине «Автомобильные эксплуатационные материалы» На занятии предусмотрен просмотр фильма. Закрепление нового материала проводится устным опросом и тестом для проверки изученного...
	Кгбпоу «татт» комплект контрольно-оценочных средств для проведения... Контрольно-оценочные средства (кос) предназначены для контроля и оценки образовательных достижений обучающихся, освоивших программу...		Кгбпоу «татт» комплект контрольно-оценочных средств для проведения... Контрольно-оценочные средства (кос) предназначены для контроля и оценки образовательных достижений обучающихся, освоивших программу...
	6 «Сензитивные» вопросы 7 Выбор формата для ответов Дж. Гэллапом в 1935 году Американским институтом общественного мнения и другими исследовательскими фирмами. Для типичного «гэллаповского»...		Контрольные вопросы по теме: Для успешной работы на практическом занятии Цель занятия: Ознакомиться с устройством светового микроскопа, с правилами работы с ним и методами изготовления микропрепаратов
	Рабочая программа включает десять разделов : Пояснительную записку... Огэ для 7-9 классов на каждом уроке, основные виды деятельности ученика (на уровне учебных действий) по всем темам курса физики,...		Приложение 1 Инструкция по проведению опроса (анкетированию) и предоставлению... «Анкеты спс». В названии архивированной папки рекомендуется указать краткое наименование образовательного учреждения
	Инструкция по применению набора реагентов для количественного определения... Немецким обществом Клинической Химии (dgkc) в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний...		Программа производственного контроля разрабатывается в медицинской... ...
	Федеральное агентство связи Фонды оценочных средств для проведения текущего контроля и промежуточной аттестации (прилагаются)		Пояснительная записка Предлагаемые тесты направлены на выработку... ОП. 03. «Техническое оснащение и организация рабочего места». Комплект контрольно-измерительных материалов содержит контрольные задания...

Руководство, инструкция по применению