Скачать 0.86 Mb.
|
Лабораторная диагностика и обнаружение возбудителя сибирской язвы Исследование на сибирскую язву включает микроскопию мазков из исходного материала, высевы на питательные среды, постановку основных и дополнительных тестов идентификации, использование МФА для обнаружения антигенов и антител к ним, постановку ПЦР, биопробы и реакции преципитации. У человека и свиней, в случае невозможности установить диагноз вышеперечисленными методами, обязательна постановка клинической кожно-аллергической пробы с сибиреязвенным аллергеном. Все работы по забору, транспортированию и подготовке проб клинического и секционного материала от людей и животных, из объектов окружающей среды осуществляют в строгом соответствии с требованиями СП 1.3.1285-03 "Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)", СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности", МУ 1.3.1794-03 "Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности". Материал для исследования: - от больных или подозрительных на заболевание людей, в зависимости от формы заболевания - содержимое везикул, отделяемое карбункула или язвы, струпья, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость, моча, испражнения, экссудаты; - трупный материал - кровь, экссудаты, кусочки органов (селезенки, печени, лимфоузлов и др.); - материал от животных; - продовольственное сырье и продукты животного происхождения; - объекты окружающей среды - почва, трава, фураж, подстилка, вода и т. д. Забор всех видов материала осуществляется в стерильную стеклянную или пластиковую посуду, соответствующую объему проб. Иммунофлуоресцентным, серологическим и бактериологическим методами исследуется соответствующий материал из общей пробы.[5,8] Направление материала на исследование Транспортирование и хранение биологического материала для исследования методом ПЦР должны осуществляться с соблюдением "холодовой цепи" «табл.6» Таблица 6
Патологический материал для исследования помещают в стерильную посуду (пробирки, банки или другую лабораторную посуду). Высушенные на воздухе мазки кладут в стерильные чашки Петри, которые обертывают плотной бумагой с надписью "мазок не фиксирован". В направлении к материалу от больного человека или трупа указывают фамилию, имя, отчество больного (умершего), место и время взятия материала, его наименование и предположительный диагноз. Пробы почвы, кормов и других сыпучих объектов помещают в сухую стеклянную банку и закрывают стерильной крышкой, пробкой или пергаментом, можно использовать полиэтиленовые мешочки (кроме проб почвы), которые завязывают шпагатом. Пробы воды наливают в стерильные стеклянные бутылки и закрывают стерильными резиновыми пробками. Допускается использование одноразовых стерильных или многоразовых автоклавируемых пластиковых флаконов. Все пробы нумеруют, емкости заворачивают в лигнин или гигроскопическую вату в количестве, достаточном для сорбции всей жидкости в случае повреждения упаковки. Пробы упаковывают во влагонепроницаемую тару, которую обвязывают, пломбируют или опечатывают, делают надпись "верх, осторожно". Пробы материала и сопроводительные документы доставляются нарочным на спецтранспорте. В сопроводительной к пробам указывают причину проведения исследования, какой материал и в каком количестве направляют, место и дату отбора материала. Для проб шерсти и кормов дополнительно указывают происхождение, объем партии, вид упаковки и количество упаковочных единиц. К сопроводительной прилагают опись с указанием места отбора каждой пробы. [2,3] Иммунно-серологические и аллергологические методы исследования Реакция позволяет в короткие сроки обнаружить сибиреязвенный антиген в экстрактах из струпьев язв больных, органов умерших от сибирской язвы людей, шкур и органов павших животных. Исследованию в реакции Асколи подвергают в том числе и загнивший биоматериал. Для постановки реакции необходимы: преципитирующая сибиреязвенная сыворотка, экстракт из исследуемого материала и сибиреязвенный бактерийный антиген для контроля. Перед постановкой реакции свежий биоматериал выдерживают в термостате в течение 18-20 ч. Экстрагирование проводят горячим и холодным способами. При этом следует учитывать, что в экстрактах, полученных горячим способом, меньше преципитиногенов. Для получения экстракта из патологического материала и струпьев горячим способом материал измельчают, заливают 0,9%-м раствором натрия хлорида с 0,3%-м раствором карболовой кислоты в соотношении 1:10 и кипятят в течение 30-40 мин, при холодном способе - оставляют для экстрагирования на 16-18 ч при комнатной температуре. Полученные экстракты фильтруют до полной прозрачности через фильтровальную бумагу или вату, предварительно смоченные 0,9%-м раствором хлорида натрия. В узкие пробирки наливают 0,2-0,3 мл прозрачной сибиреязвенной преципитирующей сыворотки, а затем пастеровской пипеткой осторожно наслаивают на нее такое же количество полученного экстракта. Если реакция положительная, то на границе соприкосновения жидкостей не позднее 15 мин должно появиться мутно-белое кольцо (Рис.8). Реакция оценивается знаком (+). При сомнительной реакции появление кольца наблюдается позднее 15 мин (±). Если кольцо отсутствует, то реакция оценивается как отрицательная (-). Рис.8 Реакция преципитации по Асколи Одновременно необходимо ставить три контрольных пробы: - преципитирующая сыворотка плюс коммерческий стандартный сибиреязвенный антиген; - преципитирующая сыворотка плюс экстрагирующая жидкость; - нормальная лошадиная сыворотка плюс коммерческий стандартный сибиреязвенный антиген. Все контроли, кроме первого, должны быть отрицательными. Реакцию Асколи используют как экспресс-метод для обнаружения специфических сибиреязвенных антигенов у исследуемых культур. Для этого в 0,25-0,5 мл 0,9%-го раствора натрия хлорида ресуспендируют петлю суточной агаровой культуры. Экстрагирование проводят горячим методом, а постановку реакции выше описанным способом. Учет результатов реакции проводят в течение 3 мин. Кожно-аллергическая проба с сибиреязвенным аллергеном антраксином Организм больного, переболевшего сибирской язвой и иммунизированного против этой инфекции, обладает свойством отвечать аллергической реакцией в виде гиперемии и инфильтрации кожи на месте введения сибиреязвенного аллергена - антраксина. Эта реакция может появляться уже с первых дней и наблюдается у подавляющего числа больных с конца первой недели заболевания. Аллергическая перестройка организма у переболевших сибирской язвой может сохраняться длительное время, что позволяет использовать антраксин не только для диагноза текущего заболевания, но и для ретроспективной диагностики. Антраксин вводят с соблюдением всех правил асептики строго внутрикожно в количестве 0,1 мл в нижней трети левого предплечья на внутренней стороне. На месте инъекции должна образовываться беловатая, хорошо ограниченная папула около 0,8 см в диаметре, имеющая вдавление на месте волосяных мешочков. В месте введения антраксина через 8-24 ч учитывается наличие гиперемии и инфильтрата. В зависимости от размеров этих элементов производят оценку пробы, руководствуясь приведенной ниже шкалой «табл.7». Таблица 7 Оценка результатов пробы с антраксином
Дезинфекция в очаге ООИ Режим обеззараживания различных объектов, зараженных патогенными микробами (чума,холера и пр.) Таблица 8
Продолжение таблицы 8
Режимы дезинфекции различных объектов растворами, приготовленных из таблеток средства «Санивап-Р», при контаминации спорами сибирской язвы.[6] Таблица 9
Продолжение таблицы 9
|
Роль медицинского персонала в организации инфекционной безопасности Понятие инфекционной безопасности и виды внутрибольничных инфекций |
Электронагревательными приборами и газовым оборудованием меры безопасности Обеспечение личной безопасности и сохранение здоровья – одна из важнейших сторон практических интересов человечества с древнейших... |
||
Инструкция Лица, в установленном порядке назначенные ответственными за обеспечение пожарной безопасности Общества, несут ответственность за |
О мерах по организации защиты информационных систем персональных данных ООО «нпо «скат» Целью настоящего Положения является обеспечение безопасности испдн Общества от всех видов угроз, внешних и внутренних, умышленных... |
||
Годовой отчет открытого акционерного общества «Открытие Холдинг» по итогам работы за 2013 год Отчет Совета директоров Общества о результатах развития Общества по приоритетным направлениям его деятельности и перспективы развития... |
Решением внеочередного Организационно-правовое обеспечение образовательной деятельности закрытого акционерного общества «тур» |
||
Годовым собранием акционеров общества Отчет Совета директоров Общества о результатах развития Общества по приоритетным направлениям его деятельности |
Инструкция по работе ответственного за обеспечение безопасности персональных... Настоящая инструкция определяет задачи, функции, обязанности, права и ответственность лица, назначенного ответственным за обеспечение... |
||
О ревизионной комиссии открытого акционерного общества «краснодаркрайгаз» ... |
Стандарт компании Заместитель руководителя общества (управляющего/ главного инженера) по безопасности движения (промышленной безопасности, охране труда... |
||
Инструкция лица, ответственного за обеспечение безопасности персональных данных общие положения Настоящая Инструкция определяет обязанности должностного лица, ответственным за обеспечение безопасности обработки персональных данных... |
Информационной безопасности Целью настоящей Политики является обеспечение безопасности объектов защиты Министерства от всех видов угроз, внешних и внутренних,... |
||
Методические рекомендации по организации противоэпидемических и санитарно-гигиенических... Методические рекомендации предназначены для работников лечебно-профилактических учреждений, кабинетов, оказывающих стоматологическую... |
Годовой отчет Открытого акционерного общества «Северо-западные магистральные нефтепроводы» Отчет Совета директоров Общества о результатах развития Общества по приоритетным направлениям его деятельности |
||
Методические рекомендации по выполнению домашней контрольной работы... Мдк. 01. 02. Эксплуатация подвижного состава и обеспечение безопасности движения поездов |
Положение. Обеспечение безопасности производственного оборудования пот ро-14000-002-98 Соглашением Департамента экономики машиностроения Министерства экономики Российской Федерации с тоо "Инженерный Центр обеспечения... |
Поиск |