Инструкция по применению наборы реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием пцр в реальном времени на оборудовании Rotor-Gene с функцией hrm
|
Скачать 406.24 Kb.
|
|
ОКП
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ Наборы реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием ПЦР в реальном времени на оборудовании Rotor-Gene с функцией HRM Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» на 24 образца Соответствует требованиям национальных стандартов и технической документации изготовителя Компания QIAGEN является ведущим поставщиком инновационных технологий в области молекулярной диагностики. Компания QIAGEN устанавливает стандарты в следующих областях:
Наборы реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием ПЦР в реальном времени на оборудовании Rotor-Gene с функцией HRM предназначены для качественной оценки мутационного статуса в онкогенах EGFR, KRAS, BRAF из ДНК человека, выделенной из зафиксированных в формалине и залитых в парафин образцов опухолевой ткани. Наборы реагентов могут применяться в клинической лабораторной диагностике. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» предназначен для выявления 29 соматических мутаций в онкогене EGFR и обеспечивает качественную оценку мутационного статуса. Набор реагентов валидирован для приборов Rotor-Gene® Q 5plex HRM и Rotor-Gene® Q 6. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» должен применяться обученным персоналом в специально оборудованной лаборатории с пробами ДНК, извлеченными из фиксированной формалином и залитой парафином ткани немелкоклеточного рака легких. I. Состав 1. Состав наборов реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием ПЦР в реальном времени на оборудовании Rotor Gene с функцией HRM 1.1. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» на 24 образца. II. Общая информация 1. Хранение 2. Назначение 3. Ограничение использования 4. Контроль качества 5. Информация по технике безопасности III. Принципы работы с наборами реагентов 1. Принципы работы с наборами реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием ПЦР в реальном времени на оборудовании Rotor Gene с функцией HRM 1.1. Общие сведения 1.2. Принцип метода 1.3. Оборудование и реактивы, приобретаемые отдельно 1.4. Меры предосторожности 1.5. Формат набора 1.6. Определение исходного материала для анализа 1.7. Выделение ДНК 1.8. Внутренние контроли. Контроль суммарной ДНК в пробе 1.9. Внутренний контроль суммарной ДНК в пробе. 1.10. Анализ данных 1.11. Протоколы
1.12. Руководство по устранению неисправностей Приложение А: Анализ данных на приборе Rotor Gene Q
Приложение В: Дополнительная информация о мутациях I. Состав 1. Состав наборов реагентов для определения соматических мутаций в онкогенах для лабораторных исследований in vitro с использованием ПЦР в реальном времени на оборудовании Rotor Gene с функцией HRM 1.1. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» на 24 образца.
II. Общая информация 1. Хранение Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» доставляется на сухом льду и должен оставаться замороженным. Если набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» не заморожен, при транспортировке вскрывалась внешняя упаковка, посылка не содержит упаковочного листа, руководства или реактивов, пожалуйста, свяжитесь со специалистами компании «ИнтерЛабСервис» по телефону +7 (495) 664-28-84. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» хранят при температуре от –15°C до –25°. Для обеспечения оптимальной активности и производительности праймеров Scorpions® набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» должен быть защищен от света во избежание дезактивации флуоресцентной метки. При хранении в рекомендуемых условиях и в исходной упаковке набор стабилен до даты окончания срока хранения, указанной на этикетке. Следует избегать повторного оттаивания-замораживания. Мы рекомендуем максимум 7 циклов замораживания-оттаивания. 2. Назначение Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» предназначен для выявления 29 соматических мутаций в онкогене EGFR и обеспечивает качественную оценку мутационного статуса. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» должен использоваться обученным персоналом в специально оборудованной лаборатории с пробами ДНК, выделенными из фиксированной в формалине и залитой парафином ткани немелкоклеточного рака легких. 3. Ограничение использования Полученные результаты должны интерпретироваться только совместно с соответствующими клиническими и лабораторными исследованиями и не должны применяться для диагностики отдельно. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» должен использоваться только персоналом, специально проинструктированным и обученным диагностике in vitro с использованием прибора Rotor-Gene Q. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» валидирован для ДНК, выделенной с использованием набора реагентов для выделения ДНК QIAGEN (Кат. № 56404) из парафинизированных блоков образцов опухолевой ткани, предварительно зафиксированных в забуференном формалине. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» предназначен для применения только в амплификаторах для ПЦР в реальном времени Rotor-Gene Q серии 5plex HRM и Rotor-Gene® Q 6. Для получения оптимальных результатов необходимо четкое следование руководству по применению набора реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)». Реактивы должны готовиться согласно рекомендациям данной Инструкции. В противном случае, возможно, получить некорректные результаты. Важно, чтобы количество и качество ДНК в пробе определялось непосредственно перед проведением анализа данной пробы с использованием набора реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)». Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» имеет дополнительную контрольную смесь (Ctrl) для определения значения порогового цикла (CT), приемлемого для анализа. Следует обращать внимание на даты окончания срока годности и условия хранения, напечатанные на коробке и этикетках всех компонентов. Не используйте компоненты с истекшим сроком годности или неправильно хранившиеся. 4. Контроль качества Каждая партия набора реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» тестируется согласно утвержденным техническим условиям для обеспечения постоянного качества продукта в соответствии с сертифицированной по ISO Системой контроля качества QIAGEN. 5. Информация по технике безопасности Работать с реактивами необходимо в лабораторном халате, одноразовых перчатках и защитных очках. Весь химический и биологический материал считается потенциально опасным. Пробы являются потенциальным источником инфекции, и с ними следует обращаться соответствующим образом. III. Принципы работы с наборами реагентов
1.1. Общие сведения Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» представляет собой готовый к применению набор для определения 29 соматических мутаций в онкогене EGFR методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) на приборе Rotor-Gene Q. Используется сочетание двух технологий: праймеров Scorpions и аллель специфической ПЦР - ARMS®. Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» позволяет выявлять мутации в сравнении с контрольной геномной ДНК дикого типа: 19 делеций в экзоне 19 (выявляет, но не различает делеции); T790M; L858R; L861Q; G719X (выявляет G719S, G719A или G719C, но не различает); S768I; 3 инсерции в экзоне 20 (выявляет наличие любой из 3 инсерций, но не различает их). Используемые методы обладают высокой избирательностью и в зависимости от общего количества ДНК в образце, позволяют выявлять невысокий процент мутантной ДНК на фоне геномной ДНК дикого типа. Чувствительность и селективность набора реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» намного выше по сравнению с такими технологиями как секвенирование по Сенгеру.
Набор реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» использует две технологии для выявления мутаций с помощью ПЦР в реальном времени — аллель специфическую ПЦР (ARMS) и праймеры Scorpions. Аллель специфичная ПЦР (ARMS) Аллель специфическая или специфичная для данной мутации амплификация достигается с помощью ARMS (Amplification Refractory Mutation System, рефракторная мутационная система амплификации). Taq ДНК-полимераза (Taq) эффективна для определения соответствий и несоответствий на 3'-конце ПЦР-праймера. Специфические последовательности, несущие мутации, селективно амплифицируются даже в пробах, где большинство последовательностей не имеют данной мутации. В случае полного соответствия праймера амплификация проходит в полном объеме. В случае несоответствия 3'-конца последовательности геномной ДНК, происходит лишь незначительная фоновая амплификация. Праймеры Scorpions Регистрация продуктов амплификации происходит с использованием праймеров Scorpions. Праймеры Scorpions - это бифункциональные молекулы, содержащие ПЦР-праймеры ковалентно связанные с зондом. Флуорофор в этом зонде взаимодействует со снижающим флуоресценцию гасителем, также встроенным в зонд. В ходе ПЦР, когда зонд связывается с ампликоном, флуорофор и гаситель разделяются, что приводит к повышению флуоресценции в реакционной пробирке. Этапы работы Работа с набором реагентов для определения соматических мутаций в гене EGFR «Therascreen® EGFR RGQ PCR Kit (24)» проходит в два этапа. На первом этапе выполняется контрольное измерение для определения суммарной ДНК в пробе. На втором этапе определяется наличие или отсутствие мутантной ДНК. |
Похожие:
 |
Инструкция по применению Наборы реагентов для определения соматических... Набор лабораторных реагентов для определения соматических мутаций в гене braf «braf rgq pcr kit (24)» |
|
Методические рекомендации по применению наборов реагентов для выявления... Проведение амплификации, анализ и учет результатов при помощи приборов rotor-Gene 6000 (Corbett Research, Австралия) и Rotor-Gene... |
|
Прайс-лист наборы реагентов для пцр-диагностики Оборудование и расходные материалы Обращаем Ваше внимание на то, что наборы реагентов для диагностики урогенитальных инфекций в качественном frt/fep формате и папилломавирусной... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для бактериологических исследований «in vitro», а также для культивирования туляремийного микроба для научных работ |
|
Инструкция по применению набора реагентов для определения тромбинового времени Набор предназначен для определения тромбинового времени при диагностике нарушений конечного этапа свертывания крови |
|
Цкп «Генетический полиморфизм» обн ран Разработка тест-систем для определения пола и идентификации особей амурских тигров по любому биологическому материалу методом пцр... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для бактериологических исследований Питательная среда предназначена для определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам диско-диффузионным... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для бактериологических... Агар Клиглера-грм» предназначен для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью идентификации... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для бактериологических исследований Набор реагентов для бактериологических исследований «Питательный агар для культивирования и выделения возбудителя бруцеллёза сухой... |
 |
Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения тироксина Набор реагентов «Тироидифа-тироксин-01» предназначен для количественного определения концентрации тироксина в сыворотке крови человека... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения свободного тироксина Набор реагентов Тироидифа-свободныйТ4 предназначен для количественного определения содержания свободного тироксина (Т4) в сыворотке... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для выявления генов металло--лактамаз... Внутренний контрольный образец для наборов с гибридизационно-флуоресцентной детекцией |
|
Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения... Рекомендована Комиссией по наборам реагентов для иммуноферментного (неинфекционные), радиоиммунологического и других видов иммунохимического... |
|
Документация об открытом аукционе в электронной форме на поставку... ... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для бактериологических исследований «грм-агар» предназначен для культивирования различных микроорганизмов, таких как: энтеробактерии, синегнойная палочка, стафилококки,... |
|
Инструкция по применению набора реагентов для определения активности... Набор реагентов «щф-uts» предназначен для определения активности щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыворотке или плазме крови человека в... |