Отчет о научно-исследовательской работе разработка методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза

Скачать 4.96 Mb.

Название	Отчет о научно-исследовательской работе разработка методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза
страница	1/45
Тип	Отчет

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Отчет

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 45

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«КАБАРДИНО–БАЛКАРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

им. Х.М. БЕРБЕКОВА» (КБГУ)
УДК 618.14, 618.146

№ госрегистрации 012011789226

Инв. №
УТВЕРЖДАЮ
Проректор по НИР и МС,

д. ф.–м. н., профессор
Савинцев А.П.
« » 2013 г.
ОТЧЕТ

О НАУЧНО–ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЕ

Разработка методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза шейки матки
по теме: «Обобщение и оценка результатов исследований эффективности первичной и вторичной профилактики ВПЧ»
Этап № 4

(заключительный)
в рамках федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007–2013 годы
Государственный контракт от «21» октября 2011 г. № 11.519.11.2019

Шифр «2011-1.9-519-022-031»

Руководитель работы: заведующая кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии, д.м.н., профессор

_________________

З.Ф. Хараева

Нальчик 2013
список исполнителей

Руководитель работы: Заведующая кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии, д.м.н., профессор (КБГУ)	24.04.2013	Хараева З.Ф. (Реферат, введение, главы 1–11, заключение)
Исполнители работы:
Старший научный сотрудник, НОЦ Прикладная антропология КБГУ, д.б.н., профессор (КБГУ)	24.04.2013	Михальчик Е.В. (главы 1-11, реферат)
Профессор, кафедра Инфекционные болезни, д.м.н. (КБГУ)	24.04.2013	Иванова М. Р. (главы 1-11)
Доцент, кафедра Микробиологии, вирусологии и иммунологии, к.б.н. (КБГУ)	24.04.2013	Блиева Л. З. (главы 1-11)
Старший научный сотрудник, НОЦ Прикладная антропология КБГУ, к.х.н., (КБГУ)	24.04.2013	Левов А.Н. (главы 1-10)
Старший научный сотрудник, УНИИД, к.б.н., (КБГУ)	24.04.2013	Шевченко А. А (главы 2-9)
Аспирант кафедры Инфекционных болезней	24.04.2013	Жемухова Р. Х. (главы 2-8)
Аспирант кафедры Микробиологии вирусологии и иммунологии	24.04.2013	Кузьмицкая Е.Ф. (главы 2-9)
Аспирант кафедры акушерства и гинекологии	24.04.2013	Геляхова З. А. (главы 3-6)
Студент 4 курса медицинского факультета КБГУ.	24.04.2013	Абсалямов А. Р. (главы 3-6)
Студентка 4 курса медицинского факультета КБГУ.	24.04.2013	Хакуашева И. А. (главы 3-6)
Нормоконтролер	24.04.2013	Кольченко Е.А.

Реферат
Отчет 225 с., 6 табл., 7 схем, 3 рис., 44 источника, 9 прил.
АПОПТОЗ, КАНЦЕРОГЕНЕЗ ШЕЙКИ МАТКИ, ПАПИЛЛОМАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ, КОМПЛЕКС АНТИОКСИДАНТНЫХ АМИНОКИСЛОТ, ДИСПЛАЗИЯ.
Объектами исследований были следующие группы женщин:

Группа клинически здоровых женщин, но инфицированных вирусам папилломы человека высокого онкогенного риска.
Вторая группа пациенток с ВПЧ инфекцией и уже выявленными предраковыми заболеваниями шейки матки.
Третья группа – женщины с раковыми заболеваниями шейки матки.

Основная методология исследований на четвертом этапе касалась изучения эффективности подключения к стандартной терапии антиоксидантного комплекса по выявленным патогенетическим обоснованным направлениям, а обобщение и анализ полученных данных НИР.

Цель работы:

стимулирование развития международных интеграционных процессов в науке и содействие формированию устойчивых кооперационных связей российских и иностранных научно-исследовательских организаций и университетов, направленных на создание технологий в области живых систем, соответствующих мировому уровню либо превосходящих его, получение международных патентов и привлечение молодых ученых и специалистов к исследованиям в рамках международной кооперации с научно-исследовательскими организациями стран ОЭСР;
участие в исследовательских проектах стран ОЭСР (в том числе доступ к информационно-аналитическому потенциалу), направленных на интеграцию России в мировую экономическую систему, осуществление рыночных преобразований, достижение высокого и устойчивого экономического роста и повышение жизненного уровня граждан Российской Федерации;
выполнение международных обязательств Российской Федерации по развитию научно-технического сотрудничества со странами ОЭСР. Разработка методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза шейки матки.

В задачи российской стороны входит выявление путей вторичной профилактики рака шейки матки, с проведением исследований по оценке активности апоптоза и рандомизированного контролируемого испытания эффективности подключения препаратов-антиоксидантов в профилактике развития канцерогенеза у клинически здоровых женщин с риском развития рака шейки матки (диагностированная ВПЧ-инфекция) и женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки.

В ходе рандомизированного контролируемого испытания эффективности подключения препаратов-антиоксидантов в профилактике развития канцерогенеза у клинически здоровых женщин с риском развития рака шейки матки (диагностированная ВПЧ-инфекция) и женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки были исследованы основные показатели состояния тканей шейки матки.

Для достижения целей исследования было оценено влияние терапии на активность апоптоза (на уровне лигандов, экспрессии рецепторов и генов апоптоза), исследованы концентрации пероксинитрита (по концентрации нитрат-нитритов в тканях биоптатов).

Основные выводы по НИР, включая 4 этап следующие:

В эпидемиологических исследованиях ВПЧ обнаружен у 40 — 50% клинически здоровых женщин, в 50-60% у женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки (дисплазия I и II степени, лейкоплакия), более чем в 80% случаев у женщин с раком шейки матки. Спектр типов ВПЧ различен, но в исследуемых популяциях превалирует 16 тип независимо от географии зоны изучения.
Выявлено снижение уровня sFas в сыворотке крови и отделяемом цервикального канала у женщин с ВПЧ 16,18 типов, у пациенток с предраковыми и раковыми заболеваниями шейки матки по сравнению с соответствующими показателями пациенток с ВПЧ10,13 типов и сывороточной и цервикальной концентрациями sFas здоровых женщин, (p<0,05).
Обнаружено, что концентрация TRAIL уменьшается при тяжелом течении инфекционного процесса: сывороточный и цервикальный уровни TRAIL у женщин с ВПЧ 16,18 типов, у пациенток с предраковыми и раковыми заболеваниями шейки матки ниже по сравнению с соответствующими показателями пациенток с ВПЧ10,13 типов и здоровых женщин,(p<0,05).
При ВПЧ высокого и низкого онкогенного риска обнаружено, что концентрации ФНОα в сыворотке крови выше нормальных на 90 % и 94 %, соответственно. Достоверно повышены сывороточные концентрации у женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки (р<0,05), в группе женщин с раковыми заболеваниями шейки матки сывороточный уровень ФНОα ниже нормальных значений (р<0,05).
При исследовании концентраций ФНОα в цервикальном отделяемом отличий между значениями в группах женщин с ВПЧ 10,13 и 16,18 типов, пациенток с предраковыми и раковыми заболеваниями шейки матки не выявлено.
При папилломавирусной инфекции общий уровень CD95+клеток в цервикальной жидкости женщин независимо от типа ВПЧ-инфекции снижен, но достоверность различий обнаружена только при инфекции ВПЧ высокого онкогенного риска. В группах с предраковыми и раковыми заболеваниями ШМ уровень СD95+клеток достоверно ниже нормы и степень снижения коррелирует с тяжестью заболевания (k=0.79). Выявлена корреляция показателей от степени онкогенного риска инфекции.
При папилломавирусной инфекции общий уровень DR5+клеток в цервикальной жидкости женщин независимо от типа ВПЧ-инфекции не изменен. Таким образом, при ВПЧ-инфекции не выявлена корреляция показателей экспрессии DR5+клеток от степени онкогенного риска инфекции.
При исследовании особенностей экспрессии генов апоптоза в клетках крови и клеточных элементах цервикального канала женщин с ВПЧ-инфекциями обнаружены сходные результаты, но можно отметить следующие особенности:

8.1. Снижение экпрессии генов лигандов апоптоза sFas и TRAIL при ВПЧ-инфекции высокого онкогенного риска свидетельствуют о блокировании процессов самоочищения зараженных клеток и являются фактором риска последующей трансформации клеток.

8.2.Изменения экспрессии генов ФНОα, sFas и TRAIL,
ИЛ-2 в клетках биоптата у женщин с предраковыми и раковыми заболеваниями ШМ аналогичны генетическим изменениям в клетках крови (лейкоцитах), что свидетельствует о системном характере заболеваний, вызванных ВПЧ.

Так как все показатели экспрессии генов ФНОα, sFas и TRAIL,
ИЛ-2 снижены в группе больных с РШМ, следует проводить поиск методов терапии, затрагивающих активизацию этих путей защиты, – как для профилактики развития канцерогенеза у больных с ВПЧ и дальнейшей онкотрансформации у пациенток с предраковыми заболеваниями ШМ, так и для мониторинга эффективности проводимой терапии у больных с РШМ.

Обнаружено, что при инфицировании ВПЧ низкого онкогенного риска (10, 13 типы ВПЧ) не изменяется синтез NO, о чем свидетельствует нормальный уровень нитрат-нитритов в тканях биоптатов в данной группе женщин. Концентрация нитрат-нитритов у пациенток с 16, 18 типами и больных с предраковыми заболеваниями шейки матки достоверно выше нормы (p<0,05), но между группами различий нет (р>0,05). У женщин с раком шейки матки в тканях биоптата выявлены максимальные концентрации, достоверно (p<0,01) более высокие по сравнению с нормой и с показателями нитрат-нитритов других групп пациенток.
На фоне терапии препаратом Immugen через 3 и 6 месяцев достоверно снизились концентрации нитрат-нитритов во всех группах, принимавших «Immugen», (р<0,05).
На фоне комплексной терапии после эксцизии пораженного участка и дальнейшей терапии с применением антиоксидантного препарата Immugen через 6 месяцев обнаружено улучшение состояния ткани шейки матки, что выявлялось в постановке диагноза «вариант нормы» в 100 % случаев.
Достоверно значимое снижение вирусной нагрузки произошло только при подключении в комплексную терапию препарата Immugen доказывает возможность применения этого препарата при различных вирусных заболеваниях.
Дополнение комплексной терапии пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки на фоне папилломавирсуной инфекции препаратом Immugen привело к положительному влиянию на основные патогенетические звенья и может быть рекомендовано для применения в практическом здравоохранении.

Систематизация и совместное обсуждение результатов, полученных партнерами в рамках данного проекта, привела к созданию:

программы медицинской стандартизации по профилактике и терапии папилломавирус-ассоцированного канцерогенеза шейки матки, состоящей из последовательности действий профилактических и лечебных мероприятий в зависимости от возраста, инфицированности и индивидуальных молекулярно-генетических особенностей склонности к канцерогенезу;
технологии профилактики и терапии папилломавирус-ассоцированного канцерогенеза шейки матки, состоящая из совокупности технологических операций, зависящих от результатов оценки риска развития онкологии женщин разных возрастных групп;
разработке методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза шейки матки;
научно-технического задела, используемого для создания учебно-методической базы для студентов и аспирантов, обучающихся по медицинским, биологическим специальностям. Комплект документов включает в себя:

Рекомендации по выбору методов профилактики в зависимости от наличия ВПЧ инфекции, выявленных молекулярно-генетических нарушений и предрасположенности к онкогенезу.
Рекомендации по подбору препаратов для комплексной терапии при выявленных молекулярно-генетических нарушениях и предрасположенности к онкогенезу.
Методические указания по изучению активности апоптоза на разном уровне (системный, тканевой, клеточный) с описанием материалов и методов для исследования.
Схемы назначения препаратов антиоксидантов в зависимости от особенностей показателей свободно-радикального и молекулярно-генетического статуса пациента и стадии развития опухоли.

Основными областями применения результатов НИР являются гинекология, иммунология, молекулярная биология, инфекционные болезни. Полученные в ходе НИР результаты служат для уточнения патогенеза ВПЧ инфекции и для более эффективного подбора методов профилактики и терапии папилломавирус-ассоциированных заболеваний шейки матки. В результате реализации предложенной в рамках НИР программы медицинской стандартизации по профилактике и терапии папилломавирус-ассоцированного канцерогенеза шейки матки, медицинской технологии ожидается повышение эффективности профилактики и терапии пациенток исследуемых групп, что будет, несомненно, иметь социально и экономически значимые результаты.
Содержание

Введение 15

Глава 1 Создание научно-технического задела (инструкции, методические указания, схемы прогностических и диагностических критериев канцерогенеза) 23

1.1 Рекомендации по выбору методов профилактики в зависимости от наличия ВПЧ инфекции, выявленных молекулярно-генетических нарушений и предрасположенности к онкогенезу 23

1.2 Рекомендации по подбору препаратов для комплексной терапии при выявленных молекулярно-генетических нарушениях и предрасположенности к онкогенезу 31

1.4 Схемы назначения препаратов антиоксидантов в зависимости от особенностей показателей свободно-радикального и молекулярно-генетического статуса пациента и стадии развития опухоли 37

Глава 2 Создание алгоритма и методики оценки риска развития папилломавирус ассоциированного канцерогенеза 39

Глава 3 Создание диагностического алгоритма обследования пациенток с высоким риском развития онкологических заболеваний шейки матки 53

Глава 4 Создание алгоритма подбора препаратов (антиоксидантов и их комплексов), регулирующих активность свободно-радикальных механизмов защиты и активность апоптоза 57

Глава 6 Создание модели для контроля эффективности препаратов антиоксидантов в комплексной терапии женщин с риском развития опухолевых заболеваний, предопухолевыми заболеваниями шейки матки и преинвазивным раком шейки матки путем определения в тканях биоптата шейки матки пероксининитрита 77

Глава 7 Разработка проекта технического задания для проведения последующих ОТР на тему: «Комплекс антиоксидантах витаминов и аминокислот для профилактики и терапии опухолевых заболеваний шейки матки» 84

Глава 8 Подведение итогов рандомизированного контролируемого испытания эффективности комплексной терапии, включающей препараты – антиоксиданты в профилактике развития канцерогенеза у клинически здоровых женщин с риском развития рака шейки матки (диагностированная ВПЧ инфекция) и женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки (по данным количественного ПЦР анализа и гистологическим исследованиям) (через 6 месяцев) 85

Глава 9 Реализация мероприятий по достижению технико-экономических показателей (п. 8 технического задания). 94

Глава 10 Разработка программы медицинской стандартизации по профилактике и терапии папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза шейки матки, с последующим предложением на утверждение как в отдельные клинические учреждения РФ и Италии, так и в Министерство здравоохранения КБР 97

Глава 11 Разработка технологии профилактики и терапии папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза шейки матки, состоящей из совокупности технологических операций, зависящих от результатов оценки риска развития онкологии женщин разных возрастных групп 105

Глава 12 Технико-экономическая оценка результатов НИР с учетом ориентировочной оценки экономической эффективности внедрения методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус – ассоциированного канцерогенеза шейки матки 108

Глава 13 Оформление и регистрация двух заявок на патент 114

Глава 14 Разработка заключительного отчета о НИР 115

Заключение 118

Список литературы 125

ПРИЛОЖЕНИЕ А 129

Методы изучения активности апоптоза на системном, тканевом, клеточном, генетическом уровнях 130

ПРИЛОЖЕНИЕ Б 161

Анкета 161

скрининга рака шейки матки 161

ПРИЛОЖЕНИЕ В 163

Алгоритм оценки риска развития папилломавирус ассоциированного канцерогенеза 163

ПРИЛОЖЕНИЕ Г 173

Диагностический алгоритм обследования пациенток с высоким риском развития онкологических заболеваний шейки матки 173

ПРИЛОЖЕНИЕ Д 176

Алгоритм подбора препаратов (антиоксидантов и их комплексов), регулирующих активность свободно-радикальных механизмов защиты и активность апоптоза 176

ПРИЛОЖЕНИЕ Е 187

ПРИЛОЖЕНИЕ Ж 192

ПРИЛОЖЕНИЕ З 200

Медико-технические требования к методам идентификации генетических маркеров, имеющих прогностическую ценность в диагностике злокачественных новообразований, а также маркеров, позволяющих оценить эффективность профилактики и терапии с учетом индивидуальных генетических особенностей пациентов с целью рационального выбора стратегии лечения. 201

201

ПРИЛОЖЕНИЕ И 205

Основные первичные данные пациенток исследованных групп 205

Список сокращений
CD – clusterdifferentiation

CIN –cervicalintraepithelialneoplasia

NO – оксид азота

АФК – активные формы кислорода

ВПЧ – вирус папилломы человека

ИЛ-2 – интерлейкин-2

ИФА – иммуноферментный анализ

мРНК – матричная рибонуклеиновая кислота

ПЦР (PCR) – полимеразно-цепная реакция

РШМ – рак шейки матки

ФНОα – фактор некроза опухоли α

ФСБ – фосфатно-солевой буфер

ШМ – шейка матки

ЦИН – цервикальная интраэпителиальная дисплазия

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 45

	Отчет о научно-исследовательской работе «Разработка методов оценки... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Отчет о научно-исследовательской работе «Разработка научно-методических... Заключительный отчет по нир: «Разработка научно-методических основ формирования корпоративной культуры в системе мчс россии» (п....
	Отчет о научно-исследовательской работе, проведенной по заказу Министерства... ...		Отчет о научно-исследовательской работе Анализ существующего состояния... Разработка схемы теплоснабжения мо «Улу-Юльское сельское поселение» на период до 2028 года
	Отчет по научно-исследовательской деятельности мгту за 2009 год Кцп разработка компьютерных и информационных технологий в технических системах, экономике и науке		Отчет по научно-исследовательской деятельности мгту за 2008 год Кцп разработка компьютерных и информационных технологий в технических системах, экономике и науке
	Методическое руководство по оценке степени риска аварий на магистральных нефтепроводах Руководство предназначено для оценки риска аварий на линейной части магистральных нефтепроводов, в том числе для прогнозирования...		Отчет о научно-исследовательской работе «Разработка концепции государственно-частного... «Разработка концепции государственно-частного партнерства в Республике Саха (Якутия)»
	Методическое руководство по оценке степени риска аварий на магистральных нефтепроводах Руководство предназначено для оценки риска аварий на линейной части магистральных нефтепроводов, в том числе для прогнозирования...		Отчет о научно-исследовательской работе по теме «Разработка и обоснование... Тема: «Разработка и обоснование конструктивно-режимных параметров доильного аппарата с управляемым режимом доения»
	Отчет о научно-исследовательской работе gr в санкт-петербурге Имидж специалистов по взаимодействию с органами публичной власти и проблема институализации профессии 15		1 исследование видов и особенностей банковских рисков 6 Анализ методов оценки и регулирования кредитного риска коммерческими банками 15
	Отчет о научно-исследовательской работе Закрытое акционерное общество Лаборатория новых информационных технологий «ланит» (зао “ланит”)		Задачами научно-исследовательской работы являются ...
	Отчет о научно-исследовательской работе по теме: «Стратегия социально-экономического... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования		Отчет о проведении научно-исследовательской работы на тему: разработка... Эпидемиология, лабораторная диагностика, классификация и клиника вич инфекции у детей

Отчет о научно-исследовательской работе разработка методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза

Похожие: