Осеменение и оплодотворение икры
Наш опыт свидетельствует, что наилучшие результаты получают при осеменении икры тихоокеанских лососей так называемым «полусухим» способом. Суть этого способа заключается в следующем: в эмалированный таз с икрой добавляют сперму, после этого икру перемешивают со спермой. Затем в таз наливают воду и снова перемешивают половые продукты.
Исходя из этого, практически сбор необходимо осуществлять в следующей последовательности. В один таз отобрать икру от 10 самок горбуши или 5 самок кеты. При этом икра должна плавно скатываться на дно по наклонному бортику таза. Попадающая в таз жидкость из полости тела самок имеет важное значение для активизации сперматозоидов. При попадании в икру слизи, сгустков крови и т. п., их необходимо удалить.
С точки зрения количества спермы, достаточно от 0,5 до 10 см³ на 1 кг икры. Однако следует учитывать, что у икринок при осеменении появляется избирательная способность в отношении сперматозоидов. Оплодотворение икры осемененной смесью спермы от нескольких самцов, дает лучший эффект нежели при осеменении ее спермой от одного самца. Стадо рыб, полученное из икры, осемененной смесью спермы от нескольких самцов, обладает повышенной жизнестойкостью за счет сохранения генетического разнообразия потомства [54; 3; 124].
Мы выяснили в ходе проведенных исследований, что при использовании 3-5 самцов на 6-8 самок, как практикуют приморские рыбоводы [93], не обеспечивается оплодотворение икры выше 94-96%. Использование при осеменении полов 1:1 дает возможность половым клеткам, при избирательной активности, оплодотворить большее количество яиц – до 97,0-98,8%.
Таким образом, для осеменения икры 10 самок требуется сперма не менее 10 самцов. После этого икру и сперму надо перемешать рукой, делая аккуратные круговые движения. Затем в таз по бортику налить воду, не прекращая круговых движений рукой (Рисунок 13 Приложения Б). При этом вода активизирует сперматозоиды, которые способны к поступательным движениям в течение 1–2 минут. В это время происходит оплодотворение яйцеклеток, поэтому следует оставить таз с икрой, перемешанной со спермой на 2 минуты. На этом осеменение икры заканчивается. После осеменения необходимо сразу же приступить к подготовке оплодотворенной икры к инкубации: отмыть икру от остатков спермы, полостной жидкости, слизи, клейкого вещества и оставить ее в воде для набухания оболочек.
Промывка икры и подготовка ее к инкубации
Промывка икры должна быть произведена в первые 10 минут после осеменения. С этого момента начинает резко возрастать чувствительность икры к механическим воздействиям, и икра приобретает слабую клейкость. Если икру своевременно хорошо не промыть, то сгустки крови, слизи, спермы и другие частицы будут приклеиваться к икринкам и станут благоприятной средой для развития сапролегнии. Кроме того, разлагающаяся органика требует для своего окисления кислород, необходимый для дыхания эмбриона.
Промывку следует осуществлять следующим образом: оплодотворенную икру переливают в сетчатый таз промывочной емкости (Рисунок 14 Приложения Б). Сразу же икру следует аккуратно взрыхлить рукой (перемешать в воде), во избежание свертывания спермы, и согнать с поверхности пену. Далее её оставляют в емкости до полной промывки, пока не будет вытекать чистая вода. Напор воды подбирается такой, чтобы не было вращения икры в потоке. Весь процесс осеменения и промывки должен длиться не более 10 минут. Промытую икру необходимо осторожно перелить в емкость для набухания, опуская таз в толщу воды (Рисунок 15 Приложения Б). Для удобства раскладки икры в ящики, емкость для набухания нужно предварительно выстелить мелкоячейной безузелковой делью.
Набухание икры
Вода в емкость для набухания следует подавать через шланги из общей водоподающей сети (Рисунок 16 Приложения Б). Расход воды в емкостях необходимо устанавливать минимальный, только для обеспечения проточности.
После соединения гамет начинается активация яйца. Под активацией яйцеклетки в широком смысле понимают переход из состояния покоя к развитию. Активация заметна по выделению содержимого кортикальных альвеол (гранул) и образованием перивителлинового пространства. Цитоплазма стягивается на анимальный полюс и образует бугорок – бластодиск. На протяжении этапа завершается второе деление мейоза, сближения мужского и женского пронуклеусов и вскоре появляется веретено первого деления дробления. На протяжении этапа происходит затвердевание икринки, т. е. увеличение прочности оболочки. Набухшая икра готова к перевозке и размещению ее в инкубационные аппараты. После окончания процесса набухания, который продолжается 1,5–2 часа, икру следует загрузить в транспортировочные контейнеры вместимостью 25 кг или произвести её упаковку в изотермических контейнерах вместимостью 50 кг (при проведении процесса набухания икры в них). К этому времени икра переходит в стадию пониженной чувствительности к механическим воздействиям (Рисунок 17 Приложения Б). При оплодотворении икры, её промывке и набухании следует использовать воду, наиболее близкую по температуре и химическим свойствам к той воде, в которой будет происходить её дальнейшее развитие в естественной обстановке и инкубация на заводе.
С пунктов сбора икру необходимо перевозить в инкубаторы сразу после набухания и перехода в стадию пониженной чувствительности к механическим воздействиям. Согласно А.И. Смирнову [125], продолжительность этапа обводнения осемененных икринок и образования зародышевого диска составляет около 10 ч при температуре 10°С, первая борозда дробления появляется через 11–12 ч после оплодотворения. До начала дробления чувствительность к внешним воздействиям оплодотворенной икры слабая, но к моменту прохождения первой борозды дробления икра должна быть перевезена и помещена в инкубационные аппараты.
Для перевозки икры в инкубационный цех в транспортировочный контейнер на 1/3 объема следует налить воду и с помощью сачка наполнить икрой. После полной загрузки остатки воды сливают. В таком виде контейнер оставляют на 10–15 минут до полного слива воды. Икру, готовую к перевозке, необходимо укрыть свободным краем упаковочной простыни, поверх которой уложить влажный поролон. Контейнер закрывается крышкой настолько плотно, чтобы упакованная икра не могла перемещаться внутри инкубационной камеры в период перевозки.
Наши исследования показывают, что с пункта сбора живую икру следует транспортировать на автомобилях. В пути следует предохранять её от перегрева и переохлаждения, а также от толчков и ударов. Для улучшения амортизации под ящики обязательно уложить амортизирующий материал – сухой речной песок или поролоновые матрасы (Рисунок 18 Приложения Б).
Продолжительность перевозки икры не должна превышать времени до начала дробления зародышевого диска. Перевозить живую икру нужно, тщательно соблюдая осторожность при передвижении транспортного средства, двигаясь с минимальной скоростью. Трасса, по которой совершают перевозку живой икры, должна быть отгрейдирована, во избежание толчков автомобиля на неровностях. Вносить ящики с живой икрой и выносить их из машины необходимо очень аккуратно и осторожно, избегая резких движений, ударов и тряски транспортировочного ящика (Рисунок 19 Приложения Б).
Во время транспортировки живую икру предохраняют от перегрева и переохлаждения, а также от толчков и ударов. Важно перевезти ее до наступления нового этапа развития, до начала дробления зародышевого диска [125]. Данные по исследованию выживаемости икры при транспортировке показали, что при перевозке с соблюдением перечисленных рекомендаций, по выровненной дороге, на расстояние не более 2 км, со скоростью не более 5 км/ч, гибель, как правило, не превышает 2–3 %; несоблюдение правил перевозки икры приводит к большой гибели при транспортировке (Таблица 5).
Таблица 5 – Гибель икры горбуши и кеты в зависимости от расстояния от пункта сбора икры до инкубационного цеха и качества дорожного покрытия, %
Расстояние, км
% гибели икры
|
Расстояние, км
|
более 15
|
5–10
|
0–2
|
1*
|
2**
|
1
|
2
|
1
|
2
|
Вместимостью 25 кг
|
8
|
10
|
5
|
8
|
Менее 1
|
2–3
|
Вместимостью 50 кг
|
10
|
13
|
8
|
10
|
1
|
5
|
* – удовлетворительное состояние дорожного покрытия, скорость передвижения не более 5 км/час; ** – неудовлетворительное состояние дорожного покрытия, скорость передвижения более 5 км/час.
|
|
