Лекционный курс по частной вирусологии часть третья

Скачать 1.67 Mb.

Название	Лекционный курс по частной вирусологии часть третья
страница	1/17
Тип	Учебное пособие

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Учебное пособие

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 17

ЛЕКЦИОННЫЙ КУРС

ПО ЧАСТНОЙ ВИРУСОЛОГИИ

Часть третья

ЛЕКЦИОННЫЙ КУРС ПО ЧАСТНОЙ ВИРУСОЛОГИИ

ВИРУСЫ ВЫЗЫВАЮЩИЕ БОЛЕЗНИ СВИНЕЙ

ДЛЯ СТУДЕНТОВ ФАКУЛЬТЕТА ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ

Подготовлен:

ВАСИЛЬЕВЫМ Д.А ЛУГОВЦЕВЫМ В. Ю

УЛЬЯНОВСК 2004

УДК: 619:616.9

Курс лекций по частной вирусологии.

Часть третья – « Вирусы вызывающие болезни свиней»

Учебное пособие по курсу ВСЭ для студентов факультета ветеринарной медицины (Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия:.

Кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии, ветеринарно-санитарной экспертизы).
Данное учебное пособие подготовлено: д б н,академиком РАЕН, профессором Васильевым Д.А. (Ульяновская государственная с-х академия) и DVM, PhD Луговцевым В.Ю (Food and Drug Administration, Center for Biologics Evaluation and Research, Laboratory of Pediatric Respiratory Viral Diseases. Bethesda, MD 20892, USA)
Предлагаемое учебное пособие издается кафедрой микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы согласно ее плану, целью которого является оперативный выпуск отдельных учебных изданий. Это позволяет дать студенту либо новую научную или инструктивную информацию, либо более подробно разъяснить ключевые положения разделов учебных дисциплин, преподаваемых на кафедре. Предлагается общий список литературы использованный при написании данного лекционного материала. Подбор вирусных инфекционных агентов для предлагаемого курса проводился на основе программы лекционного курса вирусологии и ВСЭ читаемого на кафедре.

ВВЕДЕНИЕ.
Вирусы открыты в конце прошлого столетия Бейеринком и Д.И.Ивановским (1892 г. - вирус табачной мозаики), Лефлером и Фрошем (1897 г. - вирус ящура) и Ридом и Кэрролом (1898 г. - вирус желтой лихорадки) на основе измерения их единственной физико-химической характеристики - способности проходить через стерилизующие керамические фильтры, т.е. фильтруемости. Именно это свойство первоначально использовалось для их классификации в качестве отдельной, особой группы патогенных микроорганизмов. Слово вирус (virus), которым были названы новые агенты, в исходном смысле означало заразный яд и исторически в научном контексте впервые было применено врачом эпохи Возрождения Петрусом Форестусом (1522-1597). Окончательное определение вирусов как организмов и генетически обособленных индивидуумов дано А.Львовым (1957, 1962 гг.). Вирусы составляют условное «третье царство» Vira, наряду с царствами про- и эукариотов.

В предлагаемом учебном пособии представленны наиболее характерные вирусы из основных вирусных семейств.
Семейство: Flaviviridae.

Таксономическая структура семейства представленна в 1 части лекционного курса.

КЛАССИЧЕСКАЯ ЧУМА СВИНЕЙ

Hog Holera, Classikal swine Fever, Svine Fiver (англ.); Schweinepest (нем.);

Pestes Porcine (франц.); Peste Porcina (исп.

Чума свиней (классическая чума свиней, КЧС) - высоконтагиозная инфекционная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, поражением кровеносной и кроветворной систем, крупозным воспалением легких и крупозно-дифтерическим воспалением толстого кишечника. Первые описания КЧС, согласно Hanson, относятся к 1810 г. в штате Теннеси (США). Позже в 1830 г вспышка зарегистрирована в штате Охио. Во Франции подобное заболевание отмечалось в 1822 г., в Германии - в 1833 г., но другие сообщения подтверждают, что эта болезнь впервые была открыта в Англии в 1862 г. и, соответственно, распространилась на Европейский континент. В Южной Америке и Южной Африке заболевание появилось в 1899 и 1890 гг. соответственно. В настоящее время встречается повсеместно, за исключением США, Канады, Австралии, Исландии, Ирландии, Новой Зеландии, Норвегии, Швеции. В результате плановых противоэпизоотических мероприятий и, в частности, широкого применения живой вакцины, масштабы её распространения резко сократились. Наблюдаются ограниченные энзоотические вспышки, наносящие, однако, значительный экономический ущерб.

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Вирусную природу КЧС установили в 1908 г Швейнитц и Дорсе.

Морфология и химический состав. Вирионы - оболочечные частицы диаметром 40-60 нм с нуклеокапсидом диаметром около 29 нм. В структуре ВКЧС обнаружено 3 гликопротеина с мол.м 44, 33 и 55 кД. Геном вируса - Г-нитевая РНК положительной полярности с размером в 12284 тыс. нуклеотидов. Единственная рамка считывания, вероятно, соответствует полипротеину с длиной 3898 аминокислотных остатков (12 kb), 4 структурным белкам (3 гликопротеида -VPI, VP2, VP3 и 1 капсидный белок -СР) и 3-7 неструктурным белкам (р125, р80, gp62, gp53, gp48, gp25 и gp20). Полагают, что VPI и VP2 представляют собой оболочечные белки. Плавучая плотность, в зависимости от градиента материала и клеток, обеспечивающих размножение вируса, составляет 1,12-1,17 г/см³. Коэффициент седиментации составляет 140-180S.. Геномная РНК вируса может быть использована в качестве исходного материала для получения кДНК и ее клонирования.

Устойчивость. ВКЧС считается сравнительно малоустойчивым к высоким температурам. Сыворотка крови больных КЧС при 37°С содержит активный вирус в течение 11 дн. Полная его инактивация при такой температуре наступает через 18-20 сут. При 56°С вирус инактивируется через 60 мин, при кипячении - моментально. В свинарниках (полы, стены) не теряет вирулентности в течение года; низкие температуры его консервируют. Вирус, содержащийся в сыворотке крови больных свиней, хранившейся при температуре 2-4°С, не теряет активности 4-6 мес.. В свиных тушах остается вирулентным после 2-б-мес. хранения в холодильнике при температуре -20-25°С. Хорошо сохраняется в лиофилизированном состоянии при рН между 5 и 10. Быстро инактивируется под действием эфира, хлороформа и дезоксихолата, чувствителен к трипсину и липазам, MgCl2 не оказывает на него стабилизирующего действия. Лучшими дезинфицирующими средствами являются 2%-ный р-р NaOH, хлорная известь 1:20 и 3-6%-ное крезоловое масло. ВКЧС сохраняет вирулентность и АГ-свойства в нативной и лиофилизированной крови при хранении в замороженном состоянии длительное время - 2456 дн (срок наблюдения). Инактивация вируса физическими средствами зависит от среды, содержащей вирус. В культуральной жидкости инфекционность теряется через 10 мин при 60°С, тогда как в дефибринированной крови вирус не инактивируется в течение 30 мин при б8°С. Вирус стабилен при рН 5-10, но при значениях выше и ниже указанных теряет инфекционность.

Антигенная структура, вариабельность и родство. По вирулентности различают А-, В- и С-варианты вируса. В группу А входят вирулентные эпизоотические штаммы, вызывающие у свиней всех возрастов остропротекающую болезнь, а также лапинизированные и "холодные" варианты культурального вируса. Вирусы подгруппы В вирулентны только для поросят и при циркуляции в стаде вызывают т.н. атипичную или хроническую чуму. К подгруппе С относится американский слабовирулентный шт. 331. Достоверных данных в отношение АГ-вариабельности вируса нет. ариабельность вируса проявляется не только различной вирулентностью для свиней, но и различными АГ взаимоотношениями с вирусом диареи КРС. Установлено одностороннее родство между ВКЧС и вирусом диареи КРС: AT к вирусу диареи КРС нейтрализуют ВКЧС, но AT к ВКЧС не нейтрализуют вируса диареи.

Локализация вируса. Вирус пантропен, накапливается во всех органах и тканях, но преимущественно в лимфоузлах, костном мозге, слизистой оболочке кишечника и эндотелии кровеносных сосудов. Он проникает в организм через кишечный и дыхательный тракты. В тонзиллярных лимфоузлах отмечается наибольшая его концентрация. Возбудитель размножается в лейкоцитах периферической крови. Через 6-10 ч после попадания в организм его можно обнаружить в крови. На 3-й день после подъема температуры тела накапливается там в максимальной концентрации. У поросят, зараженных экспериментально per os, через 7 ч вирус выделяли из миндалин, а через 16 ч - из крови. С 3-го по 7-й день титр вируса, выделяемого из миндалин, крови и селезенки, был наивысшим и составлял 10⁵ БОЕ/мл. В околоушной и поджелудочной железах, подчелюстных, заглоточных, мезентериальных и других лимфоузлах, респираторных путях и кишечном тракте вирус обнаруживали на 3-й день; в ЦНС, сердце, костном мозге, яичниках, матке - на 4-й день после заражения в титрах 10^3,2-10⁵ БОЕ/мл. Он выявлен также в эпителии миндалин, в слизистой оболочке глотки, почек, мочевого и желчного пузыря, в поджелудочной железе, слюнных железах, надпочечниках, щитовидной железе. В легких вирус локализовался в эндотелии кровеносных сосудов и адвентиции, а также в альвеолярных макрофагах. На 6-й день после заражения вирус из организма больных свиней выделяется с мочой, фекалиями, истечениями из носа и глаз. Вирусовыделение начинается в инкубационном периоде и усиливается по мере развития признаков болезни. Выделение вируса прекращается уже через 3 дн после исчезновения лихорадки, однако имеются данные о том, что у хронически больных животных вирусоносительство обнаруживают до 95-го дн после заражения.

Доказана трансплацентарная передача ВКЧС в различные периоды супоросности. Поросята после рождения длительное время остаются скрытыми вирусоносителями и служат источником заражения. Свиноматки-носители вируса рождают клинически здоровых, но инфицированных и иммунотолерантных поросят, которые выделяют вирус в больших количествах в течение 4-6 мес. Этот феномен и случаи хронической инфекции являются факторами персистенции вируса среди популяции свиней. Трансплацентарная передача вируса сопровождается тератогенным действием и высокой перинатальной смертностью. Уровень летальности среди новорожденных поросят находится в прямой зависимости от инфицированности плодов. Все поросята с виремией погибают.

Антигенная активность. В сыворотке крови свиней-реконвалесцентов не обнаруживают ВНА, ПА и КСА. Получены монАТ, специфичные к 3-м структурным вирусным протеинам: РТ2, Р150 и Р12. AT реагировали только с высоко очищенным вирусом. Выраженный иммунитет развивается у свиней, начиная с 6-8-нед возраста, ВНА появляются на 7-10-й день после инфицирования или иммунизации, достигают максимума через 3-4 нед и сохраняются более года. Пассивные AT у поросят могут сохраняться 2-3 мес.. AT молозива к ВКЧС, продуцированные свиньями, вакцинированными за 55 дн до опороса, характеризовались высокой активностью и коротким периодом полураспада, но подавляли первичную иммунную реакцию потомства на последующую вакцинацию. У свиноматок, вакцинированных не ранее, чем за 86 дн до опороса, они обладали значительной авидностью.

Экспериментальная инфекция. Легко воспроизводится на неиммунных подсвинках массой 40-50 кг при подкожном заражении.

Культивирование. Культивирование вируса в лабораторных условиях на не иммунных свиньях можно проводить практически бесконечно Этот метод дорог и небезопасен Вирус удается репродуцировать также в первичной культуре клеток легких, селезенки, почки и лейкоцитов без выраженного ЦПД Оптимальный возраст культуры свиных лейкоцитов колеблется от 1 до 5 сут. Максимального уровня титр вируса достигает через 4-8 дн. после заражения Уровень репродукции различных штаммов вируса в культурах макрофагов интактных и иммунизированных поросят одинаков Он так же размножается в культуре клеток тестикул поросят, вызывая ЦПД при использовании аргинин буферной среды, и в перевиваемой линии клеток почки поросенка (РК-15).

Точно определить инфекционную активность вируса можно методом флюоресцирующих бляшек, поскольку инфекционные титры воспроизводимы и могут быть определены уже через 24 ч после инфицирования культуры Разработан метод титрования вируса путем учета негативных колоний под агаровым покрытием Подобраны 3 линии клеток, формирующих негативные колонии при культивировании в монослое РК15, КРД10 и RPTY Предложен также метод титрования ВКЧС в культуре клеток с помощью феномена экзальтации. Вначале культуру инфицируют ВКЧС, а затем (через определенное время) - вирусом НБ (шт. Миадера). Клетки, в которых размножился ВКЧС, под влиянием вируса НБ разрушаются (ЦПД), тогда как клетки, зараженные одним ВКЧС, не изменяются. Вместо вируса НБ можно использовать вирус болезни Тешена Кроме того, предложен тест экзальтации гемагглютинации и ингибиции ЦПЭ с использованием клеток почки свиней и вируса НБ (шт. Саго) Здесь цитопатогенный вирус ингибируется в результате предварительной инокуляции ВКЧС, эта ингибиция сопровождается значительным увеличением образования ГА вируса НБ Вместо последнего успешно применяли один из штаммов вируса гриппа.

ГА- и гемадсорбирующие свойства ВКЧС - не установлены.

Тератогенные свойства. ВКЧС обладает тератогенными и др. патогенными свойствами в зависимости от стадии беременности, когда происходит встреча матери и плода с вирусом. При инфицировании супоросных маток на 65-й день происходила гибель плодов более чем в 30% случаев. У оставшихся в живых гистерэктомированных плодов обнаруживалась виремия и отсутствовали ВНА. При заражении свиноматок между 94 и 101 дн. супоросности гибели плодов не наблюдалось. Очевидно 65-й день беременности является последним сроком для установления персистентной виремии у плода.

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Источники и пути передачи инфекции. Источник инфекции - больные животные, выделяющие вирус во внешнюю среду с мочой, фекалиями и секретами слизистых оболочек глаз и носа, а также реконвалесценты. Здоровые свиньи, находясь в контакте с больными и пользуясь общим кормлением и водопоем, легко и быстро заражаются. Заражение происходит, главным образом, через пищеварительный тракт с инфицированными кормами и водой, а также через дыхательные пути и поврежденную кожу. Один из основных путей распространения инфекции - завоз продуктов убоя больных чумой свиней и скармливание их животным без надлежащего обезвреживания, а также ввоз в хозяйство свиней в инкубационном периоде болезни и вирусоносителей, занос вируса с грубыми и сочными кормами, зараженными дикими свиньями.

Из неблагополучных хозяйств ВКЧС свободно выносится за 2 нед. до появления болезни и после начала ее до установления диагноза, когда животных без ограничения вывозят на мясокомбинаты и в другие хозяйства. Реализация продуктов убоя таких свиней - главная причина распространения чумы в современных условиях. Описана передача ВКЧС комарами. Примерно из 100 комаров разных видов, отловленных в двух неблагополучных по КЧС фермах, готовили суспензии и заражали поросят, В 8 случаях поросята заболевали. Патогенной оказалась суспензия комаров из родов Aedes, Anopheles, Psorophora и Culex . Наиболее важным аспектом в циркуляции вируса КЧС в природе является трансплацентарная передача полевых и вакцинных штаммов, врожденная персистентная КЧС-инфекция у плодов и новорожденных поросят. Прослеживается тесная связь кругооборота вируса с кругооборотом репродуктивного цикла воспроизводства свиней. Циркуляция вируса в популяции "свиноматка - плод -потомство" является основным связующим звеном естественного кругооборота вируса.

Природная очаговость. Природная очаговость КЧС среди кабанов представляет опасность для промышленного свиноводства возможным вовлечением домашних свиней в цепь циркуляции возбудителя. Появление природной очаговости чумы в стране обусловлено рядом объективных факторов:

- прямыми и косвенными связями между дикими и домашними свиньями вследствие продолжающегося расселения кабанов. Зоологи отмечают, что северная граница ареала кабанов сдвинулась на север европейской части страны до линии Беломорск - Березняки -Няндома - Котлас - Мураши. Активное расселение кабана идет и в южных районах России при устойчивой общей численности поголовья;

- устойчивостью возбудителя КЧС, длительным вирусоносительством, разнообразием путей его передачи от больных кабанов здоровым при непосредственных контактах или через объекты внешней среды, инфицированные выделениями больных, длительным поддержанием вируса в популяциях благодаря конгенитальному заражению плодов;

- ангропогенным воздействием на среду обитания кабанов, приводящим к использованию ими кормов, пищевых отходов, подстилки на полях и фермах и взаимному обмену вирулентным вирусом при наличии больных среди диких и домашних свиней;

- связывающими факторами в распространении возбудителя КЧС между отдельными популяциями кабанов в результате миграции животных (суточный переход достигает 10-20 км). Не исключена в этом процессе роль кровососущих членистоногих. Дополнительным, нередко важным, связующим звеном с домашними свиньями могут быть пищевые отходы вследствие использования человеком мяса кабанов. Болезнь среди кабанов регистрировали с 1901г.

Спектр патогенности в естественных условиях. К ВКЧС восприимчивы домашние свиньи всех пород и возрастных групп, особенно чистопородные, а также дикие кабаны. В лабораторных условиях путем длительных серийных пассажей ВКЧС удается адаптировать к организму кроликов.

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Инкубационный период в зависимости от вирулентности вируса и чувствительности животных длится 3-9 да, реже - 12, иногда - до 20 дн. КЧС может протекать сверхостро, остро, подостро и хронически. Некоторые исследователи выделяют особую нервную форму, когда доминирующий симптом болезни - поражение ЦНС.

Сверхострое течение болезни наблюдается очень редко и у молодых животных. Оно характеризуется быстрым течением, высокой температурой (41-42°С), угнетенным состоянием, апатией, полным отсутствием аппетита и рвотой, учащенным сердцебиением и дыханием, ярко-красными пятнами на коже. Животные погибают через 1-2 дня.

Острое течение чаще регистрируется в начале эпизоотии. Температура тела повышается до 40,5-41°С, животные неохотно передвигаются, больше лежат. Наблюдают угнетение, слабость, отказ от корма. Развивается гнойный конъюнктивит, появляется рвота, запор, а затем понос (фекалии иногда с примесью крови). Мочеиспускание затруднено. У некоторых животных моча темно-коричневого цвета. Супоросные свиньи абортируют. Нередко возникает слизисто-гнойный ринит, а у отдельных животных - носовое кровотечение. На коже внутренних поверхностей бедер, живота, шеи и у основания ушных раковин появляются пустулы, заполненные желтоватым экссудатом, а несколько позже - точечные кровоизлияния, которые в дальнейшем сливаются и образуют темно-багровые пятна, не исчезающие при надавливании. Прогрессирующая слабость сопровождается учащенным и затрудненным дыханием, сердечной недостаточностью, в результате кожа пятачка, ушных раковин, живота и конечностей приобретает синюшную окраску. Развивается выраженная лейкопения и резкий сдвиг нейтрофильного ядра до миелоцитов. Перед гибелью температура снижается до 35-36°С. Обычно животные погибают на 7-10-й день.

Нервная форма относится к острому течению болезни и характеризуется судорожным подергиванием отдельных групп мышц, манежными движениями, параличами задних конечностей, нервным возбуждением и апатией, сонливостью. Температура - в пределах нормы или повышена до 40,5-41°С. Смерть наступает довольно быстро - через 24-48 ч.

Подострое течение наблюдается нередко после острого течения, болезнь затягивается до 3 нед. Температура тела при подостром течении несколько ниже, чем при остром. Выздоровление отмечается редко. При затяжном течении чумы наблюдается наслоение вторичных бактериальных инфекций; сальмонеллеза и пастереллеза. В случае осложнения чумы сальмонеллезом местом локализации вторичных поражений является ЖКТ (кишечная форма чумы). Запор, характерный для острого течения чумы, сменяется изнурительным поносом со зловонным запахом и примесью слизи, а иногда крови. Свиньи прогрессивно худеют и болезнь обычно заканчивается гибелью, реже приобретает хроническое течение.

При осложненении чумы пастереллезом поражения локализуются в органах дыхания (легочная форма). У животных наблюдают затрудненное дыхание, кашель, иногда удушье, признаки бронхопневмонии, слизисто-гнойные истечения из носа; температура тела выше 40°С. Болезнь чаще всего кончается гибелью животного, нередко наблюдают осложнение чумы сальмонеллезом и пастереллезом одновременно (смешанная форма). И в том и другом случае животные гибнут.

Хроническое течение характеризуется продолжительным течением болезни (несколько недель и даже месяцев), тяжелым крупозно-дифтероидным поражением ЖКТ, гнойно-фибринозным воспалением легких и плевритом. У больных животных наблюдают понижение или потерю аппетита, конъюнктивит, понос, иногда сменяющийся запором, анемию и прогрессирующее исхудание; свиньи превращаются в заморышей. Голова и хвост у них опущены книзу, спина изогнута, заостренный зад отвисает, задние конечности подогнуты под живот. Животные большей частью лежат, зарывшись в подстилку. Температура тела повышена, но нередко повышение темпера туры отсутствует. Часто отмечаются некрозы кончиков ушей и хвоста. При хроническом течении появляются благоприятные условия для развития вторичных инфекций: сальмонеллеза и пастереллеза. Однако часто стало появляться субклиническое и хроническое течение, характеризующееся нарушением функции воспроизводства (бесплодие, аборты, мертворождаемость). Одной из причин, способствующих появлению этих форм, является размножение вирулентных штаммов в недостаточно иммунном организме, в частности, у привитых инактивированными вакцинами. Мертворождаемость, отставание в росте свидетельствуют о заражении плодов через плаценту. Конгенитальная передача вируса может сопровождаться персистентной виремией в течение всей жизни животных или очень длительного периода. В первые недели жизни у поросят, родившихся с персистентной виремией, не находят никаких видимых признаков болезни, но такие животные передают вирус другим. В одном помете могут быть поросята инфицированные и неинфицированные. Клинически невозможно отличить поросят, имеющих вирус в крови, от здоровых животных. Только через некоторое время наблюдали хроническое течение болезни, отставание в росте и гибель в возрасте 3-8 нед. У поросят описан врожденный тремор мышц, связанный с хроническим течением КЧС .

Патологоанатомические изменения. Патологоанатомические изменения при КЧС очень вариабельны и зависят от течения болезни и наличия осложнений секундарной инфекцией (сальмонеллез, пастереллез и др.)

Общие признаки острой, хронической и латентной чумы свиней (Van Oirshot J.T. , 1994)

Показатели	Острая	Хроническая	Латентная
Вирулентностьвируса	Высокая	Умеренная	Низкая
Время заражения	Постнатальное	Постнатальное	До рождения
Течение	Короткий инкубационный период, тяжелая депрессия, высокая лихорадка,анорексия, конъюнктивит, запор, диарея, конвульсии, нарушение координации, геморрагии на коже	Короткий инкубационный период, три фазы заболевания: 1Депрессия, лихорадка, анорексия; 2.Клиническое улучшение; 3.Конечная фаза обострения заболевания	Латентное заболевание, особенно тяжелая депрессия и анорексия, нормальная или слегка изменяющаясятемпература тела, конъюнктивит, дерматиты, двигательные на рушения
Виремия	Высокого Уровня	Непостоянная	Высокого уровня
Лейкопе Ния	Развивается быстро	Развивается быстро, следует за лейкоцитозом	Развивается поздно в течение заболевания
Иммунный ответ КЧС	Отсутствует	Присутствует	Отсутствует
Наступление смерти	Через 10-20 дн	Через 1-Змес.	Через 2-11 мес.
Выраженность поражений	Множественные геморрагии,особенно в лимфоузлах и почках, инфаркты селезенки	Изъязвления толстого кишечника, "бутоны", инфаркты селезенки	Лимфоузлы увеличены, тимус атрофирован
Патогис-тология	Дегенерация эндотелиальных клеток, пролиферация ретикулярных клеток, энцефалит	Дегенерация эндотелиальных клеток, тяжелое лимфоцитарное истощение, гистиопитарная гиперплазия, громерулонефриты	Дегенерация эпителиальных клеток, тяжелое лимфоцитарное истощение, гистиопитарная гиперплазия

Наиболее типичные изменения встречаются у подсвинков и взрослых животных. Острая (септическая) форма чумы протекает обычно без осложнения вторичной инфекцией. На краях век и в углах глаз образуются коричневые корочки. Конъюнктива, слизистые оболочки носа и рта, цианотичны. Кожа ушей, шеи, живота, внутренней стороны бедер пятнисто или диффузно окрашены в багрово-красный цвет, видны точечно-пятнистые кровоизлияния. Обращает внимание выраженные явления геморрагического диатеза в различных органах. Наиболее характерные изменения в лимфоузлах, селезенке и почках. Лимфоузлы, преимущественно головы и шеи, набухшие, сочны, красного цвета снаружи и мраморного вида на разрезе. Селезенка обычных размеров или несколько уменьшена, часто (в 40-50% случаев) с инфарктами по краю органа. Почки обычно бледные, с многочисленными точечными кровоизлияниями в корковом слое. Геморрагии встречаются также в слизистой оболочке лоханки, мочеточников и мочевого пузыря. Надпочечники набухшие, полнокровны. В сердце и печени иногда регистрируют кровоизлияния. В желудке и кишечнике острое, катаральное, реже крупозно-геморрагическое воспаление слизистой оболочки с кровоизлияниями, гиперплазия лимфоидных (солитарных) фолликулов и пейеровых бляшек. Легкие полнокровны, иногда с очагами серозно-катаральной или крупозно-геморрагической пневмонии. Головной и спинной мозг и их оболочки отечны, полнокровны, мес.тами с точечными кровоизлияниями. При чуме, осложненной пастереллезом (грудная форма), основные изменения наблюдают в органах грудной полости: крупозно-геморрагическую пневмонию, множественные некрозы, серозно-геморрагический или фибринозный плеврит и перикардит, интенсивные кровоизлияния на серозных покровах грудной полости, а также на слизистой гортани и трахеи. Встречаются кровоизлияния в коже, в почках и в кишечнике, набухание и изъязвление фолликулов толстого кишечника.

При чуме, осложненной сальмонеллезом (кишечная форма), болезнь протекает преимущественно хронически и характеризуется язвенно-некротическими процессами в пищеварительном тракте (глотке, миндалинах, желудке и кишечнике) Наиболее часто поражаются слепая и ободочная кишки, где находят дифтерические "бутоны" и язвы, реже диффузное дифтерическое воспаление. Кроме того, отмечают экзему и некрозы кожи, очаги бронхопневмонии, фибринозный плеврит и перикардит, а также характерные для острой чумы изменения в лимфоидных органах и почках

Гистологические изменения при КЧС неспецифические Большая часть процессов, на которых может базироваться гистологическая диагностика, очень легко распознается на вскрытии (геморрагический лимфоденит, инфаркты селезенки и др. ) Определенную диагностическую ценность представляют лишь изменения кровеносных сосудов, преимущественно в легких, с которыми связано формирование ряда характерных для чумы патологических процессов в различных органах (лимфоузлах, селезенке, почках, ЦНС и др.) В лимфоузлах устанавливают полнокровие сосудов, гомогенизацию, фибриноидное набухание и некроз стенок сосудов, микронекрозы лимфоцитов, очаговые скопления плазмоцитов, чаще по ходу сосудов. В селезенке, в зоне инфаркта, отмечают некроз ткани, а вне зоны - кровоизлияния, очаги кариорексиса лимфоцитов и небольшие группы незрелых клеток лимфоидного ряда В почках зернистая дистрофия и некроз канальцевого эпителия, гломерулонефрит и кровоизлияния в виде петехий и экхимозов во всех слоях, а также в слизистую лоханки мочевого пузыря. В большинстве случаев (70-90%) в ЦНС обнаруживают негнойный лимфоцитарный энцефаломиелит, характеризующийся наличием периваскулярных лимфоцитарных инфильтратов, очаговой пролиферации клеток микроглии (глиальных узелков) и дистрофии ганглиозных клеток

Патогенез. При КЧС патогенез необходимо рассматривать в 2-х аспектах на клеточном уровне и на уровне целого организма. Как установлено, тип взаимодействия вируса с клетками - персистентный, проникновение вируса в клетку - рецептор-зависимое. Несмотря на продуктивную инфекцию и образование инфекционного вируса, возбудитель не оказывает ЦПД на зараженную клетку и, следовательно, не ясен патогенетический механизм in vitro. Система мононуклеарных фагоцитов (СМФ) обеспечивает диссиминацию вируса в организме свиней Вирусный патогенез на уровне целого организма представляется так инфект (ВКЧС) - ворота инфекции (миндалины и носоглотка) - первичная виремия (16-24 ч после заражения) - максимальное накопление ВКЧС в органах иммунной системы (лимфоузлы, селезенка, костный мозг, пейеровы бляшки) На 4-6-е сут. - вторичная инфекция С 4-х сут. после инфицирования - вирусовыделение с секретами и экскретами .

Патогенез КЧС можно рассматривать как вирусиндуцированное нарушение ферментных систем у больных животных. В организме вирус размножается в лимфоцитах лимфоузлов, селезенки, костного мозга и эндотелии кровеносных сосудов, вызывая дистрофические и некротические изменения. Под влиянием вируса развиваются некротические изменения и основного вещества стенок кровеносных сосудов микроциркулярного русла различных органов в виде мукоидного и фибриноидного набухания и некроза, накопления кислых мукополисахаридов В результате этого сильно повышается проницаемость стенок сосудов, что приводит к возникновению кровоизлияний, отеков, некродистрофических и воспалительных процессов в различных тканях и органах. Размножаясь в клетках иммунной системы и вызывая их разрушение, вирус сильно снижает иммунные свойства организма, что способствует активации вторичной инфекции (пастерелл, сальмонелл) и отягощению основного процесса.

В патогенезе болезни основными факторами ее развития являются химотрипсин и другие субстанции нормальной ткани поджелудочной железы Химотрипсин является одним из АГ, индуцированных вирусом, поэтому КЧС можно рассматривать как инфекцию, при которой происходит расстройство ферментных систем организма с повышенной продукцией химотрипсина. Известно, что макрофаги (МФ) являются не только эффекгорной клеткой иммунной системы, но и секреторной, обладающей значительным цитолитическим потенциалом (протеазы и свободные радикалы кислорода). Неспецифическая цитотоксичность МФ селезенки резко возрастает при персистенции вирусов в клетках. Ингибиция фагоцитарной функции и активация секреторной функции МФ под действием репродукции ВКЧС является характерным проявлением прямого ЦПД возбудителя как in vitro, так и in vivo. В то же время ВКЧС не оказывает прямого ЦПД на лимфоциты, так как все попытки показать in vitro тяжелые нарушения реактивности Т- и В-лимфоцитов имели отрицательный результат. Поэтому поражение клеток (некроз лимфоцитов) при КЧС является результатом непрямого действия вируса, и развивается в результате активации цитолитического потенциала зараженных клеток-мишеней (МФ) при непосредственным контакте с другими клетками (лимфоцитами, эпителиальными, эндотелиальными и др.). Кроме того, макроорганизм в отличие от культивируемых клеток имеет систему кровообращения. Следовательно, циркулярные нарушения кровообращения, вызванные непрямым вирусиндуцированным поражением стенок сосудов и воспалительной реакцией, играют важную роль в патогенезе КЧС, вызывая отек, геморрагии, инфаркты

Существуют 6 концепций патогенетического механизма при КЧС:

КЧС как иммунопатологический процесс циркулирования в крови комплексов АТ-АГ и их оседания на поверхности сосудов ;
КЧС как процесс нарушения коагуляционных механизмов крови ;
КЧС как сверхострый паралимфобластический лейкоз,
КЧС как процесс вирусиндуцированного расстройства ферментных систем организма с гиперпродукцией химотрипсина ;
КЧС как процесс вируспоражения надпочечников с гиперпродукцией глюкокортикостероидов из гиперплазированной корковой зоны;
КЧС как процесс вирусиндуцированной активации клеток СМФ и(или) нейтрофилов с гиперпродукцией циготоксинов-протеаз и свободных радикалов кислорода.

Клетки, зараженные ВКЧС, несут очень мало вирусного АГ на своей поверхности, поэтому инфицированные клетки могут избегать иммунной атаки клеток хозяина. Имеется ряд фактов, подтверждающих патогенетическое значение протеаз - выраженное болеют КЧС более упитанные животные, получающие богатый белками корм (опыты на крысах показали, что у них при таком режиме кормления усиливается образование протеаз). Установлены резкие возрастные колебания уровня химотрипсина в крови и соответствующие изменения уровня лимфоцитов. Одним из путей, приводящих к развитию поражений при КЧС, являются нарушения в системе свертывания крови, в частности развитие тромбоцитопении и изменение коагуляциоиных параметров. Вследствие максимальной активности коагуляционной системы развивается синдром диссиминированного внутрисосудистого свертывания крови, приводящий к появлению геморрагий. Одна из теорий состоит в том, что патологические процессы и летальный исход определяются разрушением В-лимфоцитов или В-лимфобластов в зародышевых центрах лимфоузлов.

ДИАГНОСТИКА

Диагноз ставят на основании эпизоотологических данных, симптомов болезни, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований. Эпизоотические, клинические и патологоанатомические данные зависят от восприимчивости свиней, вирулентности штамма и комплекса мероприятий по профилактике КЧС.

Если в очаге штамм вируса вирулентный, поголовье свиней не иммунное, то болезнь характеризуется высокой контагиозностью, большей смертностью, гипертермией, геморрагическими поражениями кожного покрова, признаками поражения органов ЖКТ и ЦНС. Обращают внимание выраженный геморрагический диатез в различных органах, мраморность лимфоузлов, инфаркты селезенки, кровоизлияния в почках на фоне их анемии, катарально-геморрагический гастроэнтерит, лимфоцитарный энцефаломиелит. Однако частая вакцинация свиней против чумы создает иммунный фон, влияющий на симптомы болезни и характер патоморфологических изменений. При хроническом течении характерными изменениями являются очаговый дифтеритический налет (бутоны), коричневая экзема, фибринозный плеврит и перикардит, некроз миндалин. Хроническая болезнь часто протекает на фоне других инфекций. Правильный диагноз может быть поставлен только лабораторньми методами.

Экспресс-методы обнаружения вируса КЧС. Для быстрого обнаружения ВКЧС в тканях с помощью ПЦР из образцов тканей животных фенольным методом выделяют препараты РНК, подвергают обратной транскрипции и амплифицируют в ПНР. Используемые "гнездовые" праймеры позволяют амплифицировать разные изоляты ВКЧС. ПЦР обладает высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет дифференцировать различные пестивирусы.

Выделение вируса. Взятие и подготовка материала. Для выделения вируса берут пробы крови, кусочки селезенки, миндалин, лимфоузлов, грудной кости, почек и легких от 2-3 животных в первые 2 ч после гибели или убоя больных в агональном состоянии. Материал отбирают в стерильные флаконы, закрывают резиновыми пробками, флаконы обрабатывают снаружи 5%-ным р-ром хлорамина или осветленным 20%-ным р-ром хлорной извести, обертывают марлей, смоченной дезинфицирующим р-ром, и помещают в полиэтиленовый пакет. Взятый патматериал помещают в термос со льдом, опечатывают и отправляют с нарочным в лабораторию с соответствующим сопроводительным документом. В лаборатории из каждой пробы готовят 20%-ную суспензию на 0,85%-ном р-ре NaCI, которую трижды замораживают и оттаивают, центрифугируют при 3-4 тыс. мин^-1 20-30 мин. Надосадочную жидкость обрабатывают антибиотиками 1ч при 37° С и используют для выделения вируса.