ФОСФОР ДиаВетТест
Набор ветеринарных диагностических реагентов для определения концентрации
фосфора в крови моче животных.
Фосфор – основной внутриклеточный анион, необходимый для нормального функционирования центральной нервной системы. Фосфор входит в состав костной ткани и фосфолипидов мембранных структур клеток животных. Соединения фосфора принимают участие в обмене энергии. Аденозинтрифосфорная кислота и креатинфосфат являются аккумуляторами энергии, обеспечивающими энергозависимые процессы в клетках различных тканей, прежде всего нервной и мышечной. Фосфор входит в состав нуклеиновых кислот, которые принимают участие в процессах роста, деления клеток, хранения и использования генетической информации. В плазме (сыворотке) крови и в костях животных фосфор присутствует преимущественно в виде фосфатов. Концентрация фосфора в крови зависит от реабсорбции фосфатов в канальцах почек, соотношения процессов синтеза и резорбции в костях (где находится около 85% от общего количества фосфора организма), в меньшей степени - от выхода фосфатов из клеток других тканей и процессов всасывания и выделения в желудочно-кишечном тракте. Основными регуляторами баланса фосфора в организме являются паратгормон, кальцитонин и витамин Д. Для клинической диагностики важно соотношение в крови кальция и неорганического фосфора и определение концентрации этого элемента в моче. Концентрация неорганических фосфатов в плазме крови животных определяется функцией паращитовидных желез, активностью витамина Д, процессом всасывания в ЖКТ, функцией почек, костным метаболизмом и питанием. Оценивать показатель необходимо в комплексе с кальцием и щелочной фосфатазой.
Показания к исследованию
Заболевания костей.
Заболевания почек.
Заболевания паращитовидных желез.
Информация для заказа
№ набора
|
Фасовка
|
DV 791 007
|
R1 2х60 мл + R2 2х15 мл + 1х3 калибратор
|
DV 791 008
|
R1 4х60 мл + R2 4х15 мл + 2х3 калибратор
|
Метод
Неорганический фосфор в кислой среде взаимодействует с молибдатом аммония с образованием фосфомолибдатного комплекса, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации фосфора в пробе.
Стабильность и хранение
Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при соблюдении температурного режима - 2–8°С, в защищенном от света месте. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты! Допускается хранение наборов при температуре до + 250 С не более 5 суток. Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов могут храниться при температуре +2 - 8º С в темном месте в течение всего срока годности наборов при условии достаточной герметичности флаконов. Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при температуре + 2–8оС не более 3 месяцев при условии достаточной герметичности флакона. Рабочий реагент можно хранить в темном месте при температуре + 2 – 25оС не более четырех месяцев.
Меры предосторожности
Калибратор содержит токсичный компонент - азид натрия. При работе с ним следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые.
Обычные меры предосторожности, принятые при работе с лабораторными реактивами.
Обезвреживание отходов
В соответствии с местными правилами.
Подготовка животного к исследованию
Натощак. Между последним приёмом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 часов (желательно - не менее 12 часов). Можно пить воду.
Необходимые материалы, не включенные в набор
• 0,9% раствор NaCl.
• Общее лабораторное оборудование.
Исследуемые образцы
• Сыворотка, моча. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови немедленно после забора крови, чтобы избежать освобождения фосфора из эритроцитов крови. К суточной моче необходимо добавить 10 мл 10% соляной кислоты, чтобы исключить оседание фосфатов. Мочу перед определением следует развести деионизованной водой в 20 раз.
Подготовка реагентов
Реагенты 1 и 2 готовы к использованию при запуске реакции субстратом. Приготовление рабочего реагента: смешать нужные объемы реагентов 1 и 2 в соотношении 4:1. Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования. Рабочий реагент можно хранить в темном месте при температуре + 2 - 25°С не более четырех месяцев. Калибратор готов к использованию.
Проведение анализа
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблицах.
Запуск реакции субстратом
|
Запуск реакции образцом
|
Отмерить, мкл
|
Опытная проба
|
Калибровочная проба
|
Контрольная
(холостая) проба
|
Отмерить, мкл
|
Опытная проба
|
Калибровочная проба
|
Контрольная (холостая) проба
|
Сыворотка
крови или моча
|
10
|
-
|
-
|
Вода деионизованная
|
-
|
-
|
10
|
Сывороточный калибратор
|
-
|
10
|
-
|
Рабочий реагент
|
1000
|
1000
|
1000
|
Пробы тщательно перемешать и выдержать при температуре +37°С или при комнатной температуре (+18–25оС) в течение 5 минут. Измерить оптическую плотность опытной пробы и калибровочной пробы против контрольной (холостой) пробы в кювете с длиной оптического пути 10 мм при длине волны 340 нм. Окраска растворов стабильна в течение 60 минут при комнатной температуре.
|
Реагент 1
|
1000
|
1000
|
1000
|
|
Вода
деионизованная
|
-
|
-
|
10
|
|
Калибратор
|
-
|
10
|
-
|
|
Сыворотка крови или моча
|
10
|
-
|
-
|
|
Пробы перемешать, через 1 минуту измерить оптическую плотность А1 опытной и калибровочной пробы против контрольной (холостой) пробы при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм при температуре + 37оС или при комнатной температуре (+18–25оС), затем добавить:
|
|
Реагент 2
|
250
|
250
|
250
|
|
Пробы перемешать, через 5 минут измерить оптическую плотность А2 опытной и калибровочной пробы против контрольной (холостой) пробы при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм при температуре + 37оС или при комнатной температуре (+18–25оС). Окраска растворов стабильна в течение 60 минут.
|
|
Примечание. При использовании автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторов количество реагентов и анализируемых образцов в зависимости от объема используемой кюветы может быть пропорционально изменено (соотношение сыворотки крови или мочи к реагенту 1 составляет 1:100).
Адаптации для Вашего анализатора запрашивайте дополнительно.
Интерпретация результатов исследования
Единицы измерения в лаборатории: ммоль/л.
Референсные значения: собака -1,1-3,0 ммоль/л, кошка -1,1-2,3 ммоль/л, лошадь - 1,3 - 1,8 ммоль/л, крупный рогатый скот - 1,4 -1,9 ммоль/л, свинья – 1,4 -1,9 ммоль/л.
Повышение уровня фосфора (гиперфосфатемия):
гипопаратиреоз; лечение противоопухолевыми цитостатиками (цитолиз клеток и высвобождение фосфатов в кровь);
острая и хроническая почечная недостаточность; распад костной ткани при злокачественных опухолях (особенно при метастазировании), лейкозах; остеопороз; гипопаратиреоз, псевдогипопаратиреоз; ацидоз (кетоацидоз при сахарном диабете, лактоацидоз, респираторный ацидоз); гипервитаминоз D; акромегалия; портальный цирроз; заживление переломов костей.
Понижение уровня фосфора (гипофосфатемия):
остеомаляция; рахит у молодых животных (возможна ранняя и доклиническая диагностика); семейный гипофосфатемический рахит; синдром мальабсорбции; выраженная диарея, рвота; гиперпаратиреоз первичный и эктопический синтез гормона злокачественными опухолями; семейная гипокальциурическая гиперкальциемия; выраженная гиперкальциемия различной этиологии; острая подагра; гиперинсулинемия (при лечении сахарного диабета); беременность (физиологический дефицит фосфора); дефицит соматотропного гормона (гормона роста).
Контроли и калибраторы
При работе на биохимических анализаторах рекомендуется использовать калибратор TruCal U фирмы DiaSys. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
Диапазон измерений
Набор позволяет определять активность фосфора в диапазоне измерений от 0,25 до 4,8 ммоль/л. При содержании фосфора в сыворотке крови или разведенной моче выше 4,8 ммоль/л анализируемую пробу следует развести физиологическим раствором, повторить анализ и полученный результат умножить на разведение.
Литература
1. Boyd J.W. The interpretation of serum biochemistry test results in domestic animals, in Veterinary Clinical Pathology, Veterinary Practice Publishing Co., Vol. XIII, # II, 1984.
2. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики. – М.: 2004.
3. Медведева М.А. Клиническая ветеринарная лабораторная диагностика. – М.: «Аквариум Принт», 2013 – 416 с.
4. Холод В.М. Справочник по ветеринарной биохимии. – В.: 2005.
5. Guder W.G., Zawta B. et al. The Quality of Diagnostic Samples. 1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001.
6. Д. Мейер, Дж. Харви. Ветеринарная лабораторная медицина. Интерпретация и диагностика. Пер. с англ. – М. : Софион. 2007, 456 с.
Изготовитель: АО «ДИАКОН-ДС», 142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а.
|