КРЕАТИНКИНАЗА ДиаС CK-NAC DiaS 
Creatinine FS *
Набор реагентов для определения общей активности креатинкиназы кинетическим
методом в сыворотке крови
 
 Информация для заказа
Кат. №
|
Фасовка
|
SB 10 160 021
|
R1 2x68 мл + R2 2x17 мл
|
SB 10 160 022
|
R1 6x68 мл + R2 6x17 мл
|
Справка [1, 2]
Креатинкиназа (КФК) – это фермент, в основном состоящий из изоферментов мышц (CK-M) и мозга (CK-B). В сыворотке КФК существует в форме димеров КФК-ММ, КФК-МБ, КФК-ББ и макроферментов. Повышенные значения КФК наблюдаются при повреждениях сердечной мышцы и болезнях скелетных мышц. Измерение КФК, особенно в сочетании с КФК-МБ, используется для диагностики и мониторинга инфарктов миокарда.
Метод
Оптимизированный УФ тест в соответствии с рекомендациями DGKC (Германское Общество Клинической Химии) и IFCC (Международная Федерация Клинической Химии и Лабораторной Медицины).
Принцип определения
Креатинфосфат + AДФ Креатин + ATФ
Глюкоза + ATФ Глюкоза-6-фосфат + AДФ
Глюкоза-6-фосфат + НAДФ+ 
Глюконат-6-фосфат + НAДФH + H+
Реагенты
Компоненты и их концентрации в реакционной смеси
R1:
|
Имидазол, ммоль/л (pH 6.7)
|
60
|
|
Глюкоза, ммоль/л
|
27
|
|
N-Ацетил цистеин, ммоль/л
|
27
|
Ацетат магния, ммоль/л
|
14
|
EDTA-Na2, ммоль/л
|
2
|
НAДФ, ммоль/л
|
2,7
|
Гексокиназа (ГK), кЕ/л
|
≥5,0
|
R2:
|
Имидазол, ммоль/л
|
160
|
|
Креатинфосфат, ммоль/л
|
160
|
|
AДФ, ммоль/л
|
11
|
|
Пентафосфат диаденозина, мкмоль/л
|
55
|
Глюкоза-6-фосфат дегидрогеназа (Г6Ф-ДГ), кЕ/л
|
≥14
|
AMФ, ммоль/л
|
28
|
EDTA-Na2, ммоль/л
|
2
|
Стабилизаторы и консерванты
|
|
Стабильность и хранение
Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2–8°С в защищенном от света месте. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты!
Меры предосторожности
1. В качестве консерванта реагенты содержат азид натрия (0,95 г/л). Не глотать! Избегать контакта реактивов с кожей и слизистыми.
2. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами.
Обезвреживание отходов
В соответствии с местными правилами.
Подготовка реагента
Запуск реакции субстратом
Реагенты готовы к использованию.
Запуск реакции образцом
Смешайте 4 части реагента 1 с одной частью реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) = монореагент
Стабильность монореагента:
-
-
3 недели
|
при 2–8°C
|
2 дня
|
при 15–25°C
|
Монореагент хранить в темноте!
Необходимые материалы, не включенные в набор
• 0,9% раствор NaCl.
• Общее лабораторное оборудование.
Исследуемые образцы
• Сыворотка
• Гепаринизированная или ЭДТА плазма.
Стабильность [7]:
-
-
7 дней
|
при 4–8°C
|
2 дня
|
при 20–25°C
|
4 недели (в темноте)
|
при -20°C
|
Загрязненные образцы хранению не подлежат.
Процедура определения
Адаптации к автоматизированным системам запрашивайте дополнительно
Длина волны, нм
|
340, Hg 334, Hg 365
|
Длина опт. пути, см
|
1
|
Температура, °C
|
37
|
Измерение
|
относительно холостой пробы
|
Запуск реакции субстратом
|
Холостая
проба
|
Образец/
калибр.
|
Образец/калибр., мкл
Дист. вода, мкл
|
–
50
|
50
–
|
Реагент 1, мкл
|
1000
|
1000
|
Перемешать, инкубировать примерно 3 мин, затем добавить:
|
Реагент 2, мкл
|
250
|
250
|
Перемешать. Через 2 мин измерить оптическую плотность и включить секундомер. Измерить оптическую плотность через 1, 2 и 3 мин.
|
ΔА/мин = ΔА/минобразца/калибратора
Запуск реакции образцом
|
Холостая
проба
|
Образец/
калибр.
|
Образец/калибр., мкл
Дист. вода, мкл
|
–
40
|
40
–
|
Монореактив, мкл
|
1000
|
1000
|
Перемешать. Через 3 мин измерить оптическую плотность и включить секундомер. Измерить оптическую плотность через 1, 2 и 3 мин.
|
ΔА/мин = ΔА/минобразца/калибратора
Расчет
По фактору
Из значений оптической плотности вычислить ΔA/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы:
ΔA/мин х фактор = активность КФК [Е/л].
-
334 нм
|
4207
|
340 нм
|
4127
|
365 нм
|
7429
|
По калибратору
КФК [Е/л] =  х Конц. кал. [Е/л]
Калибраторы и контроли
Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется калибратор TruCal U фирмы DiaSys. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
Кат. No Фасовка
TruCal U 5 9100 60 10 060 1х3 мл
TruLab N 5 9000 60 10 060 1х5 мл
TruLab P 5 9050 60 10 060 1х5 мл
Рабочие характеристики
Диапазон измерений
При использовании автоматических анализаторов тест позволяет определять активности КФК в диапазоне измерений до 1100 Е/л.
В ручном режиме измерений тест применяется для определения активности КФК, соответствующей изменению оптической плотности не более ΔA/мин = 0,25 при 340 и 334 нм, или 0,14 при 365 нм. Если значение превосходит верхнюю границу диапазона, образец должен быть разведен 1 + 10 изотоническим раствором NaCl (9 г/л) и полученный результат должен быть умножен на 11.
Специфичность/Помехоустойчивость
аскорбиновая к-та до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл, гемоглобин до 200 мг/дл и липемия до 2000 мг/дл триглицеридов не влияют на точ ность анализа.
Чувствительность/Пределы определения
Нижний предел определения 1 Е/л.
Воспроизводимость
(t = 37°C, число измерений n = 20)
Образец
|
Среднеарифметическое значение, мг/дл
|
SD, мг/дл
|
CV, %
|
Внутрисерийная
|
Образец 1
|
159
|
3,18
|
2,00
|
Образец 2
|
220
|
1,54
|
0,70
|
Образец 3
|
508
|
3,69
|
0,73
|
Межсерийная
|
Образец 1
|
49,5
|
1,05
|
2,12
|
Образец 2
|
157
|
1,63
|
1,04
|
Образец 3
|
228
|
2,31
|
1,01
|
Нормальные величины
• Взрослые [3], Е/л
|
Женщины
|
<145
|
Мужчины
|
<171
|
Этот диапазон нормальных величин обеспечивает высокую диагностическую чувствительность. Однако диагностическая специфичность при этом низкая, но она может быть повышена за счет дополнительного измерения КФК-МБ.
|
Инфаркт миокарда: риск инфаркта миокарда высок при наличии трех условий [5] :
1.
|
КФК (мужчины)
|
>190 Е/л (3.12 мкат/л)
|
|
КФК (женщины)
|
>167 Е/л (2.78 мкат/л)
|
2.
|
КФК-МБ
|
>24 Е/л (0.40 мкат/л)
|
3. Активность КФК-МБ составляет от 6 до 25% от общей активности КФК.
Рассчитывается с использованием температурного фактора конверсии 2.38 (25°С→37°С).
Если есть подозрение на инфаркт миокарда, а все три условия не выполняются, то это может означать недавний инфаркт. В этом случае измерения следует повторить через 4 часа со свежими образцами.
У здоровых людей значения могут быть разными в зависимости от расы и возраста [5, 6]. Каждая лаборатория должна проверять соответствуют ли нормальные величины конкретной популяции пациентов и определять собственные нормальные значения при необходимости. Для клинической цели значения КФК должны всегда определяться в комплексе с анамнезом и результатами клинических обследований и другими данными.
• Дети [1], Е/л
Кровь из пуповины
|
175–402
|
Новорожденные
|
468–1200
|
≤5 дней
|
195–700
|
<6 месяцев
|
41–330
|
>6 месяцев
|
24–229
|
При необходимости, каждая лаборатория должна проверить, применим ли контрольный диапазон величин к местному населению, и определить свой собственный диапазон нормальных величин. Для диагностических целей значения СЖК всегда должны рассматриваться в сочетании с анамнезом, клиническим обследованием и другими данными.
|
Литература
1. Stein W. Creatine kinase (total activity), creatine kinase isoenzymes and variants. In: Thomas L, ed. Clinical laboratory diagnostics. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 71-80.
2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company; 1999. p. 617-721.
3. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, Férard G et al. IFCC primary reference procedure for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37°C. Part 5: Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of creatine kinase. Clin Chem Lab Med 2002; 40: 635-642.
4. Recommendations of the German Society for Clinical Chemistry. Standardization of methods for the estimation of enzyme activities in biological fluids: Standard method for the determination of creatine kinase activity. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1977; 15: 255-260.
5. Stein W. Strategic der klinisch-chemischen Diagnostik des frischen Myokardinfarkts. Med Welt 1985: 36: 572–7.
6. Myocardial infarction redefined – a consensus document of the Joint European society of Cardiology/America College of Cardiology Committee fort he redefinition of myocardial Infarction. Eur Heart J. 2000; 21: 1502–1513.
7. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples. 1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 24-5.
Разрешено к обращению на территории Российской Федерации РУ № ФСР 2011/11620
Система менеджмента качества сертифицирована на соответствие требованиям: ISO 9001:2008, EN ISO 13485:2012, ГОСТ ISO 9001-2011, ГОСТ ISO 13485-2011
Допущено к обращению на территории Европейского Союза
Авторизованный представитель ЗАО «ДИАКОН-ДС» в ЕС
CE-partner4U
ESDOORNLAAN 13, 3951DB MAARN, THE NETHERLANDS
Изготовитель
ЗАО «ДИАКОН-ДС»
142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а.
По лицензии
«DiaSys Diagnostic Systems GmbH», Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany. Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany.
http://www.diakonlab.ru
E-mail: sale@diakonlab.ru
Тел.: (495) 980-63-39
Тел./факс: (495) 980-66-79
</6></145>
|
