Набор реагентов для определения общей активности лактатдегидрогеназы

Скачать 98.81 Kb.

Название	Набор реагентов для определения общей активности лактатдегидрогеназы
Тип	Документы

rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Документы

ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА ДиаС LDH DiaS DGKC

Creatinine FS^*

Набор реагентов для определения общей активности лактатдегидрогеназы

кинетическим методом в сыворотке крови

Информация для заказа

Кат. №	Фасовка
SB 10 420 021	R1 5x20 мл + R2 1x25 мл
SB 10 420 022	R1 5x80 мл + R2 1x100 мл

Справка [1, 2]

Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) – это фермент, состоящий из пяти различных изоферментов, катализирующих превращение L-лактата в пируват и наоборот. ЛДГ присутствует в цитоплазме всех тканей человека, в высоких концентрациях в печени, сердечной и скелетных мышцах, в меньших концентрациях в эритроцитах, поджелудочной железе, почках и желудке. Увеличение активности ЛДГ обнаруживается при различных патологических состояниях, таких как инфаркт миокарда, рак, болезни печени, крови или мышц. Однако, для дифференциальной диагностики, из-за отсутствия органоспецифичности ЛДГ, необходимо определение её изоферментов, либо других ферментов, таких как щелочная фосфатаза или АЛТ/АСТ.

Метод

Оптимизированный УФ тест в соответствии с рекомендациями DGKC (Германское Общество Клинической Химии).

Принцип определения

Пируват + НAДH + H⁺

Лактат + НAД⁺

Реагенты

Компоненты и их концентрации в реакционной смеси

R1:	Фосфатный буфер, ммоль/л (pH 7.5)	50
	Пируват, ммоль/л	0,60
R2:	Good’s буфер (pH 9.6)
	НAДH, ммоль/л	0,18

Стабильность и хранение

Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2–8°С. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты! Реагент 2 хранить в темноте.

Меры предосторожности

1. В качестве консерванта реагенты содержат азид натрия (0,95 г/л). Не глотать! Избегать контакта реактивов с кожей и слизистыми.

2. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами.

Обезвреживание отходов

В соответствии с местными правилами.

Подготовка реагента

Запуск реакции субстратом

Реагенты готовы к использованию.

Запуск реакции образцом

Смешать 4 части реагента 1 с одной частью реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) = монореагент.

Стабильность монореагента:

5 дней	при 2–8°C
8 часов	при 15–25°C

Монореагент хранить в темноте!

Необходимые материалы, не включенные в набор

• 0,9% раствор NaCl.

• Общее лабораторное оборудование.

Исследуемые образцы

• Сыворотка

• Гепаринизированная или ЭДТА - плазма.

Стабильность [5]:

4 дня	при 20–25°C
6 недель	при 2–8°C

Загрязненные образцы хранению не подлежат.

Процедура определения

Адаптации к автоматизированным системам запрашивайте дополнительно

Длина волны, нм	340, Hg 365, Hg 334
Длина опт. пути, см	1
Температура, °C	25/30/37
Измерение	относительно воздуха

Запуск реакции субстратом

Температура, °С Образец/калибр., мкл	25/30 20	37 10
Реагент 1, мкл	1000	1000
Перемешать, инкубировать примерно 1–5 мин, затем добавить:
Реагент 2, мкл	250	250
Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность и включить секундомер. Измерить оптическую плотность через 1, 2 и 3 мин.

Запуск реакции образцом

Температура, °С Образец/калибр., мкл	25/30 20	37 10
Монореагент, мкл	1000	1000
Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность и включить секундомер. Измерить оптическую плотность через 1, 2 и 3 мин.

Расчет

По фактору

Из значений оптической плотности вычислить ΔA/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы:

ΔA/мин х фактор = активность ЛДГ [Е/л].

Запуск реакции субстратом

	25/30°C	37°C
340нм	10080	20000
334нм	10275	20390
365 нм	18675	37060

Запуск реакции образцом

	25/30°C	37°C
340нм	8095	16030
334нм	8250	16345
365 нм	15000	29705

По калибратору

ЛДГ [Е/л] =

х Конц. кал. [Е/л]

Калибраторы и контроли

Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется калибратор TruCal U фирмы DiaSys. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
Кат. No Фасовка

TruCal U 5 9100 60 10 060 1х3 мл

TruLab N 5 9000 60 10 060 1х5 мл

TruLab P 5 9050 60 10 060 1х5 мл

Рабочие характеристики

Диапазон измерений

При использовании автоматических анализаторов тест позволяет определять активности ЛДГ в диапазоне измерений до 1200 Е/л. В ручном режиме измерений тест применяется для определения активности ЛДГ, соответствующей изменению оптической плотности не более ΔA/мин = 0,15 при 340 и 334 нм, или 0,08 при 365 нм. Если активность превосходит это значение, образец должен быть разведен 1 + 10 изотоническим раствором NaCl (9 г/л) и полученный результат должен быть умножен на 11.

Специфичность/Помехоустойчивость

аскорбиновая к-та до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл и липемия до 2000 мг/дл триглицеридов не влияют на точность анализа. Гемолиз мешает определению, так как ЛДГ высвобождается эритроцитами.

Чувствительность/Пределы определения

Нижний предел определения 5,0 Е/л.

Воспроизводимость

(t = 25°C, число измерений n = 20)

Образец	Среднеарифметическое значение, мг/дл	SD, мг/дл	CV, %
Внутрисерийная
Образец 1	142	5,50	3,86
Образец 2	245	4,95	2,01
Образец 3	497	8,39	1,69
Межсерийная
Образец 1	144	3,09	2,13
Образец 2	248	4,53	1,82
Образец 3	492	6,23	1,26

Нормальные величины [4]

	25°C	30°C	37°C
Взрослые, Е/л	<240	<346	<480

Литература

1. Thomas L. Clinical laboratory diagnostics. 1^st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft;1998.p.89-94.

2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3^rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company;1999.617-721.

3. Deutsche Gesellschaft fűr klinische Chemie. Empfehlungen der deutschen Gesellschaft für Klinische Chemie (DGKC). Standardisierung von Methoden zur Bestimmung von Enzymaktivitäten in biologischen Flűssigkeiten.(Recommendation of the German Society of Clinical Chemistry. Standardization of methods for measurement of enzymatic activities in biological fluids.) Z Klin Chem Klin Biochem 1972; 10:182-192.

4. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent reference limits of several enzymes in plasma at different measuring temperatures. Klin Lab 1992; 38:555-561.

5. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples. 1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 36-7.
Разрешено к обращению на территории Российской Федерации РУ № ФСР 2011/11588

Система менеджмента качества сертифицирована на соответствие требованиям: ISO 9001:2008, EN ISO 13485:2012, ГОСТ ISO 9001-2011, ГОСТ ISO 13485-2011

Допущено к обращению на территории Европейского Союза

Авторизованный представитель ЗАО «ДИАКОН-ДС» в ЕС

CE-partner4U

ESDOORNLAAN 13, 3951DB MAARN, THE NETHERLANDS
Изготовитель

ЗАО «ДИАКОН-ДС»

142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а.
По лицензии

«DiaSys Diagnostic Systems GmbH», Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany. Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany.

http://www.diakonlab.ru

E-mail: sale@diakonlab.ru

Тел.: (495) 980-63-39

Тел./факс: (495) 980-66-79

Похожие:

	Набор реагентов для определения общей активности лактатдегидрогеназы Набор предназначен для количественного определения активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови человека кинетическим методом...		ДиаВетТест Набор ветеринарных диагностических реагентов для определения активности панкреатичес Набор ветеринарных диагностических реагентов для определения активности панкреатической амилазы в крови животных
	Г амма-глутамилтрансфераза диаВетТест Набор ветеринарных диагностических... Набор ветеринарных диагностических реагентов для определения активности гамма глутамилтрансферазы в крови животных		Инструкция по применению набора реагентов для определения активности... Набор реагентов «щф-uts» предназначен для определения активности щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыворотке или плазме крови человека в...
	Набор реагентов для определения активности щелочной фосфатазы в сыворотке... Набор предназначен для количественного определения активности щелочной фосфатазы в сыворотке или плазме крови человека кинетическим...		Набор реагентов для определения общей активности креатинкиназы кинетическим В сыворотке кфк существует в форме димеров кфк-мм, кфк-мб, кфк-бб и макроферментов. Повышенные значения кфк наблюдаются при повреждениях...
	Инструкция по применению набора реагентов для количественного определения... Немецким обществом Клинической Химии (dgkc) в клинико-диагностических и биохимических лабораториях для целей диагностики заболеваний...		Для определения активности аспартатаминотрансферазы Набор предназначен для количественного определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических...
	Для определения активности аланинаминотрансферазы Набор предназначен для количественного определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических...		Для определения активности аспартатаминотрансферазы Набор предназначен для количественного определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических...
	По применению набора реагентов для количественного определения общей... Набор «ожсс uts» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ		Для определения активности гамма-глутамилтрансферазы Набор предназначен для количественного определения активности гамма-глутамилтрансферазы в сыворотке крови человека кинетическим методом...
	Для определения активности гамма-глутамилтрансферазы Набор предназначен для количественного определения активности гамма-глутамилтрансферазы в сыворотке крови человека кинетическим методом...		Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения тироксина Набор реагентов «Тироидифа-тироксин-01» предназначен для количественного определения концентрации тироксина в сыворотке крови человека...
	Набор реагентов для количественного определения содержания мочевины Набор предназначен для количественного определения мочевины в сыворотке крови и моче человека уреазным методом по салицилат-гипохлоритной...		Инструкция по применению набора реагентов для иммуноферментного определения свободного тироксина Набор реагентов Тироидифа-свободныйТ4 предназначен для количественного определения содержания свободного тироксина (Т4) в сыворотке...

Руководство, инструкция по применению