α-АМИЛАЗА ФС
Creatinine FS *
Набор реагентов для определения общей активности α-амилазы
кинетическим методом в сыворотке крови и моче
   ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ЗАКАЗА
Кат. №
|
Состав, мл
|
Объём,
мл
|
|
Реагент 1
|
Реагент 2
|
10 114
|
2×20
|
1×10
|
50
|
10 115
|
5×20
|
1×25
|
125
|
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для определения суммарной активности α-амилазы (поджелудочный и слюнной изоферменты) в сыворотке, плазме крови и моче человека кинетическим методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор реагентов (α-АМИЛАЗА ФС) должен использоваться квалифицированным персоналом в области клинической лабораторной диагностики.
Набор выпускается в фасовках, рассчитанных на проведение 50 и 125 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ.
МЕТОД
Ферментативный фотометрический тест (субстрат EPS-G7).
ПРИНЦИП МЕТОДА
α-Амилаза катализирует реакцию гидролиза субстрата 4,6-этилиден-глюкоза7-п-нитрофенил-глюкоза1-α-D-мальтогептазида (ЭПС-Г7) с образованием п-нитрофенилолигомальтозидов, которые с участием α-глюкозидазы расщепляются до глюкозы и п-нитрофенола. Скорость образования п-нитрофенола прямо пропорциональна активности α-амилазы в пробе и измеряется фотометрически при длине волны 405 нм.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1:
|
буферно-ферментный раствор, содержащий
|
|
натрий хлористый
|
50 ммоль/л
|
магний хлористый
|
10 ммоль/л
|
α-глюкозидазу
|
1,5 кЕ/л
|
Реагент 2:
|
субстратно-буферный раствор, содержащий
|
ЭПС-Г7
|
2 ммоль/л
|
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейность в диапазоне от 5 до 2000 Е/л.
Отклонение от линейности не превышает 5%.
Чувствительность – не более 5 Е/л.
Коэффициент вариации – не более 5%.
В ручном режиме измерений тест применяется для определения активности амилазы, соответствующей изменению оптической плотности ΔA/мин не более 0,35. Если значение превосходит верхнюю границу диапазона, образец следует развести в 10 раз физиологическим раствором, повторить анализ и полученный результат умножить на 10.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для калибровки фотометрических систем и уточнения фактора пересчета для полуавтоматических биохимических анализаторов рекомендуем использовать мультикалибратор TruCal U, DiaSys, Германия.
Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P (EPS-G7), DiaSys, Германия; контрольной мочи TruLab Urine Level 1 и 2, DiaSys, Германия.
|
Кат. №
|
Фасовка
|
TruCal U
|
5 9100 60 10 060
|
1×3 мл
|
TruLab N
|
5 9000 60 10 060
|
1×5 мл
|
TruLab P
|
5 9050 60 10 060
|
1×5 мл
|
TruLab Urine Level 1
|
5 917 099 10 061
|
1×5 мл
|
TruLab Urine Level 2
|
5 918 099 10 061
|
1×5 мл
|
Возможно использование других контрольных сывороток, другой контрольной мочи, аттестованных данным методом и не уступающих по своим свойствам рекомендуемым.
НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ [1, 3]
В сыворотке крови человека: 23-100 Е/л;
В моче у женщин: 10-447 Е/л;
В моче у мужчин: 10-491 Е/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.
ОБРАЗЦЫ [2, 3]
Негемолизированная сыворотка крови. Сыворотку крови следует отделить от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови. Гепаринизированная или ЭДТА-плазма. Моча.
Стабильность в сыворотке или плазме:
|
7 дней
|
при +20 -25оС;
|
|
7 дней
|
при +4 – 8оС;
|
|
1 год
|
при –20оС.
|
Стабильность в моче:
|
2 дня
|
при +20 – 25оС;
|
|
10 дней
|
при +4 – 8оС;
|
|
3 недели
|
при –20оС.
|
Загрязненные образцы хранению не подлежат.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения набора – класс 2а (Приказ Минздрава РФ от 06.06.2012 № 4н).
Слюна и кожа содержат α-амилазу, поэтому не следует пипетировать реагенты ртом и необходимо избегать контакта реагента с кожей.
Меры предосторожности – соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения” (Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Биреагентная схема — запуск реакции субстратом.
Реагенты 1 и 2 готовы к использованию.
Монореагентная схема — запуск реакции образцом.
Для приготовления Рабочего реагента: смешать 4 объема Реагента 1 и один объем Реагента 2. Тщательно закрыть флаконы с Реагентами 1 и 2 после отбора аликвот. Оставить свежеприготовленный рабочий реагент на 20-30 мин при комнатной температуре (+18-25оС) для уравновешивания компонентов смеси.
Лиофилизированный мультикалибратор TruCal U (DiaSys) готовят согласно аттестационному листу, прилагаемому к каждой серии контрольных сывороток.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
Биреагентная схема — запуск реакции субстратом.
Перед проведением анализа рабочий реагент следует нагреть до температуры +37 ± 1,0С в течение 5 мин.
Таблица 1
Отмерить, мкл*
|
Контрольная
(холостая) проба
|
Калибровочная проба
|
Сыворотка
|
Моча
|
Образец/
Мультикалибратор
|
–
|
30
|
30
|
15
|
Реагент 1
|
1000
|
1000
|
1000
|
1000
|
Перемешать, инкубировать 1 мин, затем добавить:
|
Реагент 2
|
250
|
250
|
250
|
250
|
Перемешать. Через 2 мин измерить оптическую плотность (А1) и
включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1, 2
и 3 мин при длине волны 405 нм, при 37С, относительно холостой
пробы, в кюветах с длиной оптического пути 1 см.
|
Монореагентная схема — запуск реакции образцом.
Таблица 2
Отмерить, мкл*
|
Контрольная
(холостая) проба
|
Калибровочная проба
|
Сыворотка
|
Моча
|
Образец/
Мультикалибратор
|
|
30
|
30
|
15
|
Рабочий реагент
|
1030
|
1000
|
1000
|
1000
|
Пробу и рабочий реагент перемешать. Через 2 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1, 2 и 3 мин при длине волны 405 нм, при 37С, относительно холостой пробы, в кюветах с длиной оптического пути 1 см.
|
Вычислить среднее значение ΔА/мин образца/мультикалибратора
*Примечание. При использовании автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторов количество реагентов и анализируемых образцов в зависимости от объема используемой кюветы может быть пропорционально изменено (соотношение сыворотки крови/плазмы и мочи к рабочему реагенту составляет 1:33 и 1:67, соответственно).
РАСЧЕТЫ
По фактору
Для определения активности α-амилазы по фактору калибратор не требуется.
Из значений оптической плотности вычислить ΔА/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы:
Активность α-амилазы (Е/л) = ΔА/мин × фактор
Сыворотка /плазма:
|
Запуск субстратом
|
5670
|
|
Запуск образцом
|
4554
|
Моча:
|
Запуск субстратом
|
11250
|
|
Запуск образцом
|
9018
|
Значение фактора рекомендуется уточнять по мультикалибратору TruCal U, а контроль качества проводить по сывороткам TruLab N и TruLab P производства компании DiaSys.
По калибратору:
Активность
α-амилазы (Е/л) =  × активность α-амилазы
в мультикалибраторе (Е/л)
ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Транспортирование и хранение наборов должно производиться при температуре +2–8оС в упаковке предприятия-изготовителя в течение всего срока годности. Допускается транспортирование и хранение наборов при температуре до +25оС не более 5 суток. Замораживание компонентов набора не допускается.
Срок годности набора – 18 месяцев.
Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов можно хранить при температуре + 2–8оС в течение всего срока годности набора при условии достаточной герметичности флаконов и отсутствии загрязнения.
Рабочий реагент можно хранить в темном месте при температуре +2 – 8°С не более 6 месяцев или при комнатной температуре (+18–25ºС) не более месяца при условии достаточной герметичности флаконов и отсутствии загрязнения.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
АО «ДИАКОН-ДС» гарантирует качество, эффективность и безопасность медицинского изделия, отсутствие недопустимого риска причинения вреда жизни, здоровью человека и окружающей среде при использовании набора реагентов по назначению в условиях, предусмотренных данной инструкцией по применению.
Гарантийные обязательства АО «ДИАКОН-ДС» распространяются с даты изготовления и на период срока годности медицинского изделия, при условии надлежащего транспортирования, хранения и эксплуатации.
УТИЛИЗАЦИЯ И УНИЧТОЖЕНИЕ
Набор реагентов α-АМИЛАЗА ФС предназначен для применения в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике. При работе с набором следует соблюдать требования ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности».
Утилизацию, уничтожение и дезинфекцию наборов реагентов следует проводить в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
ЛИТЕРАТУРА
Долгов В., Морозова В., Марцишевская Р. и др. Клинико-диагностическое значение лабораторных показателей. – М.: Лабинформ, Центр, 1995.
Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. - М. Изд. «МЕДпресс-информ», 2004.
Thomas L ed. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft, 1998.
Разрешено к обращению на территории Российской Федерации РУ № ФСР 2007/00267
Система менеджмента качества сертифицирована на соответствие требованиям: ISO 9001:2008, EN ISO 13485:2012, ГОСТ ISO 9001-2011, ГОСТ ISO 13485-2011
Допущено к обращению на территории Европейского Союза
Авторизованный представитель АО «ДИАКОН-ДС» в ЕС
CE-partner4U
ESDOORNLAAN 13, 3951DB MAARN, THE NETHERLANDS
Изготовитель
АО «ДИАКОН-ДС»
142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а.
http://www.diakon-ds.ru
E-mail: sale@diakonlab.ru
dds@diakonlab.ru
Тел.: (495) 980-63-39
Тел./факс: (495) 980-66-79
|
