Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых




Скачать 0.68 Mb.
Название Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых
страница 2/6
Тип Документы
rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Документы
1   2   3   4   5   6

Изучение устойчивости штаммов грибов к фунгицидам
Оценка устойчивости к фунгицидам проводится в чашках Петри на агаризованной (сусло-агар) среде с добавлением фунгицидов в концентрациях 0,1; 1; 10; 100 мкг/мл по действующему веществу и на среде без фунгицида (контроль). Исследуемый изолят высевают в центр чашки Петри. Когда диаметр контроля достигает 60-80% от диаметра чашки Петри, проводят замер двух взаимно перпендикулярных радиусов всех исследуемых колоний. После измерения проводят усреднение по 2-м радиусам. Эксперименты проводят в трёх повторностях, результаты которых также усредняют. Для каждого изолята с помощью математической обработки определяют показатели EC50 (концентрация фунгицида, необходимая для замедления скорости радиального прироста колонии в 2 раза относительно бесфунгицидного контроля) и EC90 (концентрация фунгицида, необходимая для замедления скорости радиального прироста колонии на 90% относительно бесфунгицидного контроля). В оценке концентраций действующих веществ часто используют показатель ppm (частей на миллион): 1ppm=1мкг/мл=1мг/л.
Методы молекулярной диагностики фитопатогенных грибов
Обнаружение и точная идентификация патогенов растений является одной из наиболее важных стратегий для борьбы с их болезнями. Особый интерес вызывает выявление возбудителей на раннем этапе в семенах, маточных растениях и в рассаде, что помогает избежать их дальнейшего распространения. По этой причине необходимо наличие быстрых, чувствительных и точных методов идентификации фитопатогенных грибов.

Развитие молекулярной биологии и создание обширных баз данных о структуре геномов фитопатогенов (Geiser, 2004) позволили разработать диагностические системы на основе молекулярного анализа возбудителей болезней картофеля. Методы молекулярной диагностики обладают значительной специфичностью и чувствительностью, что делает диагностические системы на их основе высокоэффективными для идентификации возбудителей заболеваний сельскохозяйственных культур.

Молекулярные методы также позволяют изучать генетическую изменчивость популяций патогена, обнаруживать и идентифицировать некультивируемые виды, и, ввиду их высокой степени специфичности, различать близкородственные организмы на разных таксономических уровнях.

Практическая значимость молекулярной идентификации фитопатогенных грибов также обусловлена необходимостью выявления латентной инфекции в тканях растения, что имеет большое значение для своевременного применения химических средств защиты (Kolombet et al., 2006). Методы молекулярной идентификации не противопоставляются анализу культурально-морфологических признаков, а дополняют друг друга. Совместное использование этих подходов позволяет преодолеть недостатки обоих методов.

Для практических целей более удобны методы идентификации на основе ПЦР с видоспецифичными праймерами, т. е. амплификация тех участков ДНК, которые коррелируют с видовым статусом гриба. В большинстве случаев идентификация с помощью ПЦР не требует выделения чистых культур.

Общее описание коллекции
Коллекция грибов – возбудителей болезней картофеля включает 174 штамма, из них:

Colletotrichum coccodes (Wallr.) S. Hughes – 52 штамма, выделенные из пораженных образцов, собранных в Костромской, Владимирской, Московской областях, Республике Марий Эл, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля. Все штаммы C. coccodes охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), генов глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназы, актина и глутамин-синтетазы, а также по морфолого-культуральным признакам. Изучена устойчивость штаммов к фунгицидам тиабендазол, пенцикурон, азоксистробин, дифеноконазол, флудиоксонил, модифицированное коллоидное серебро.

Thanatephorus cucumeris (A.B. Frank) Donk (название анаморфной стадии Rhizoctonia solani) 14 штаммов, выделенных из пораженных образцов, собранных в Костромской и Владимирской областях, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля. Все штаммы T. cucumeris охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), а также по морфолого-культуральным признакам. Изучена устойчивость штаммов к фунгицидам тиабендазол, пенцикурон, азоксистробин, дифеноконазол, флудиоксонил, модифицированное коллоидное серебро.

Helminthosporium solani Dur. et Mont – 21 штамм, выделенный из пораженных образцов, собранных в Брянской, Костромской, Московской областях, Республике Чувашия, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля. Все штаммы охарактеризованы по структуре ДНК участка ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), по морфологическим параметрам, по устойчивости к фунгицидам тиабендазол, азоксистробин, дифеноконазол, модифицированное коллоидное серебро.

Alternaria alternata (Fr.) Keissl 16 штаммов, выделенных из пораженных образцов, собранных в Костромской, Владимирской, Московской областях. Все штаммы A. alternata охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), а также по морфолого-культуральным признакам.

Alternaria solani Sorauer 3 штамма, выделенные из пораженных образцов, собранных в Рязанской области. Все штаммы A. solani охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), а также по морфолого-культуральным признакам.

Phytophthora infestans (Mont.) de Bary 55 штаммов, выделенных из пораженных образцов, собранных в Рязанской и Московской областях. Два штамма выделены из пораженных листьев паслена сладко-горького в Москве. Все штаммы P. infestans охарактеризованы по типам спаривания.

Fusarium spp. – 10 штаммов, из них 9 выделены с картофеля и 1 – с томата. Также в коллекции имеется 3 штамма (Fusarium solani (Mart.) Sacc., F. sporotrichioides Sherb., F. oxysporum Schltdl), переданные специалистами Крымского НИИСХ.

Colletotrichum coccodes (Wallr.) S. Hughes
Возбудитель заболеваний антракноз и черная пятнистость клубней. Принадлежит к семейству Glomerellaceae, подклассу Hypocreomycetidae, классу Sordariomycetes, подотделу Pezizomycotina, отделу Ascomycota, царству Fungi. Колонии C. coccodes, выращенные на искусственных средах, представлены преимущественно белым рассеянным воздушным мицелием и обильными черными микросклероциями, которые равномерно распределены по поверхности агара (Davis & Johnson, 2002) (рисунок 1).

Микросклероции представляют собой плотное сплетение меланизированных гиф и щетинок. Размер микросклероциев варьирует от 150 до 230 мкм (Blakeman & Hornby, 1966; Griffiths & Campbell, 1972; Sutton, 1992). Морфология микросклероциев может меняться в зависимости от конкретного изолята и субстрата. Возможно непосредственное прорастание микросклероциев для проникновения в тело хозяина посредством мицелия, либо вокруг них формируется палисадный слой конидиеносцев и образуются конидии (Sanogo & Pennypacker, 1997).

Рисунок 1 – Колония C. coccodes (штамм 13 Ges 18)

на агаризованной среде (сусло-агар)

Конидии гиалиновые (неокрашенные), без перегородок, веретенообразные, резко сужающиеся к каждому концу, формируются в слизистой массе и имеют 16-24 мкм в длину и 3-4 мкм в ширину (Sutton, 1992). Конидии прорастают в течение 2-х часов, а меланизированные аппрессории могут образовываться через 22 часа (Byrne et al., 1997).

Конидиеносцы септированные и разветвленные, оканчиваются группой конидиогенных клеток – фиалид (McIntyre & Rusanowski, 1975). Конидиеносное ложе, полученное в культуре, а также на стеблях, корнях, плодах и клубнях, обычно ассоциированное с микросклероциями, имеет круглую или удлиненную форму и достигает 200-300 мкм в диаметре.

Коллекционные штаммы были выделены из пораженных образцов, собранных в Костромской, Владимирской, Московской областях, Республике Марий Эл, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля (таблица 2).
Таблица 2 – Происхождение коллекционных штаммов C. coccodes.


Штамм

Орган растения

Место сбора образца

Сорт

Год

1

2

3

4

5

13 ГХСС 1/1

клубень

Владимирская обл., Гусь-Хрустальный р-н, пос. Мезиновский.

Удача

2013

13 ГХСС 1/2

клубень

Удача

2013

13 ГХСС 1/2 С1

клубень

Удача

2013

13 ГХСС 2/1

клубень

Удача

2013

13 КСС 4

клубень

Костромская обл., Стрельниково.

Удача

2013

13 КСС 4/2

клубень

Удача

2013

13 КСС 7b

клубень

Удача

2013

13 КСС 11

клубень

Удача

2013

13 КСС 13

клубень

Удача

2013

13 КСС 14

клубень

Удача

2013

13 КСС 15

клубень

Удача

2013

13 КСС 16

клубень

Удача

2013

13 КСС 17

клубень

Удача

2013

13 КСС 21

клубень

Удача

2013

13 КСС 29

клубень

Удача

2013

13 КСС 33

клубень

Удача

2013

13 КСС 34

клубень

Удача

2013

13 КСС 36

клубень

Удача

2013

13 КСС 37

клубень

Удача

2013

13 КСС 47a

клубень

Удача

2013

13 КСС 47b

клубень

Удача

2013

13 КСС 58/1

клубень

Удача

2013

13 КСС 58b

клубень

Удача

2013

13 КСС 65

клубень

Удача

2013

13 ГСС 29/2

клубень

Семенной картофель из Голландии

Астерикс

2013

Продолжение таблицы 2


1

2

3

4

5

13 Gde 9

клубень

Семенной картофель из Германии, пос. Брезен

Дельфине

2013

13 Gde 12

клубень

Дельфине

2013

13 Gde 20

клубень

Дельфине

2013

13 Gde 23

клубень

Дельфине

2013

13 Ges 6

клубень

Семенной картофель из Германии, пос. Брезен

Эстрелла

2013

13 Ges 18

клубень

Эстрелла

2013

13 Ges 19

клубень

Эстрелла

2013

13 Gal 15

клубень

Семенной картофель из Германии, пос. Брезен

Альвара

2013

13 Gal 19

клубень

Альвара

2013

13 Gal 20

клубень

Альвара

2013

13 Gal 22

клубень

Альвара

2013

13 Gal 23

клубень

Альвара

2013

13 Gal 24

клубень

Альвара

2013

13 Gsa 5

клубень

Семенной картофель из Германии, г. Бад Швартау

Сафия

2013

13 Gsa 21

клубень

Сафия

2013

13 Gsa 29

клубень

Сафия

2013

14 ЧаКК6

клубень

Московская обл., Чашниково

Невский

2014

14 ЧаКК18/2

клубень

Невский

2014

15 МЭКЛ 11

Лист

Республика Марий Эл




2015

16 МЭКЛ 7/2

Лист




2016

16 МЭКЛ 3/1

Лист




2016

16 MGPS 9

стебель

Московская обл., Одинцовский р-н, п. Большие Вяземы




2016

16 MGPS 10a

стебель




2016

16 MGPS 10b

стебель




2016

16 MGPS 15

стебель




2016

16 MGPS 16a

стебель




2016

16 MGPS 16b

стебель




2016
1   2   3   4   5   6

Похожие:

Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Удаление или уничтожение возбудителей инфекционных (паразитарных)...
Дезинфекция удаление или уничтожение возбудителей инфекционных (паразитарных) болезней в (на) объектах окружающей среды. Производится...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Унифицированный клинический протокол оказания медицинской помощи при инфекционном эндокардите
Эти рубрики не используются при первичном кодировании заболевания. Они предназначены для использования в качестве дополнительных...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Донецкой Народной Республики 02. 03. 2017 №285 унифицированный клинический...
Эти рубрики не используются при первичном кодировании заболевания. Они предназначены для использования в качестве дополнительных...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Сибирского отделения российской академии наук
Название коллекции «Коллекция экстремофильных микроорганизмов и типовых культур»
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon 01. 11 Выращивание зерновых, технических и прочих
Выращивание картофеля, столовых корнеплодных и клубнеплодных культур с высоким содержанием крахмала или инулина
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Отдел образования муниципального района илишевский район
Основной вид лпх приусадебное хозяйство многопрофильного характера с посевами картофеля и овощных культур, плодовыми деревьями и...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Временная инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации болезней прудовых рыб
С целью предупреждения инфекционных и инвазионных болезней рыб в прудовых и других рыбоводных хозяйствах рекомендуется
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Инструкция по дезинфекции Общие положения
Основное назначение дезинфекции, дезакаризации, дезинсекции и дератизации на пасеках обезвредить возбудителей и переносчиков заразных...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Установка сетевой версии системы "kadastr"
Создайте на жестком диске каталог kadastr (или каталог с другим названием), в котором будут размещены Ваши базы данных и скопируйте...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Подготовка картофеля к посадке
Не стоит использовать на посадку смесь сортов картофеля. Из-за неодинаковых сроков созревания они требуют разных сроков посадки и...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Оао «чувашторгтехника» Электрическая фритюрница кухонная
...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Российской федерации фгу «Владимирская государственная зональная...
Предназначена для рядковой посадки не пророщенных клубней картофеля с междурядьями 70; 75 и 90см с одновременным внесением минеральных...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon 2. назначение дезинфекции и подготовка к ее проведению
Под дезинфекцией понимают уничтожение на объектах внешней среды или удаление патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Под...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon На поставку товара: Реагенты для генодиагностики возбудителей
Реагенты для генодиагностики возбудителей инфекционных заболеваний г. Екатеринбург «24» апреля 2013 года
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Исследование продовольственного картофеля нашего поселения «Непецинское»
Века. Его по праву называют вторым хлебом. Клубни картофеля, в зависимости от его назначения, содержат до 25 сухого вещества, в том...
Каталог коллекции чистых культур возбудителей грибных болезней картофеля и других пасленовых icon Инструкция по охране труда для работ на электромеханической картофелечистке...
Для обработки овощей и картофеля необходимо предусматривать максимальную механизацию труда. Важнейшая операция при его обработке...

Руководство, инструкция по применению






При копировании материала укажите ссылку © 2024
контакты
rykovodstvo.ru
Поиск