Скачать 0.68 Mb.
|
Изучение устойчивости штаммов грибов к фунгицидам Оценка устойчивости к фунгицидам проводится в чашках Петри на агаризованной (сусло-агар) среде с добавлением фунгицидов в концентрациях 0,1; 1; 10; 100 мкг/мл по действующему веществу и на среде без фунгицида (контроль). Исследуемый изолят высевают в центр чашки Петри. Когда диаметр контроля достигает 60-80% от диаметра чашки Петри, проводят замер двух взаимно перпендикулярных радиусов всех исследуемых колоний. После измерения проводят усреднение по 2-м радиусам. Эксперименты проводят в трёх повторностях, результаты которых также усредняют. Для каждого изолята с помощью математической обработки определяют показатели EC50 (концентрация фунгицида, необходимая для замедления скорости радиального прироста колонии в 2 раза относительно бесфунгицидного контроля) и EC90 (концентрация фунгицида, необходимая для замедления скорости радиального прироста колонии на 90% относительно бесфунгицидного контроля). В оценке концентраций действующих веществ часто используют показатель ppm (частей на миллион): 1ppm=1мкг/мл=1мг/л. Методы молекулярной диагностики фитопатогенных грибов Обнаружение и точная идентификация патогенов растений является одной из наиболее важных стратегий для борьбы с их болезнями. Особый интерес вызывает выявление возбудителей на раннем этапе в семенах, маточных растениях и в рассаде, что помогает избежать их дальнейшего распространения. По этой причине необходимо наличие быстрых, чувствительных и точных методов идентификации фитопатогенных грибов. Развитие молекулярной биологии и создание обширных баз данных о структуре геномов фитопатогенов (Geiser, 2004) позволили разработать диагностические системы на основе молекулярного анализа возбудителей болезней картофеля. Методы молекулярной диагностики обладают значительной специфичностью и чувствительностью, что делает диагностические системы на их основе высокоэффективными для идентификации возбудителей заболеваний сельскохозяйственных культур. Молекулярные методы также позволяют изучать генетическую изменчивость популяций патогена, обнаруживать и идентифицировать некультивируемые виды, и, ввиду их высокой степени специфичности, различать близкородственные организмы на разных таксономических уровнях. Практическая значимость молекулярной идентификации фитопатогенных грибов также обусловлена необходимостью выявления латентной инфекции в тканях растения, что имеет большое значение для своевременного применения химических средств защиты (Kolombet et al., 2006). Методы молекулярной идентификации не противопоставляются анализу культурально-морфологических признаков, а дополняют друг друга. Совместное использование этих подходов позволяет преодолеть недостатки обоих методов. Для практических целей более удобны методы идентификации на основе ПЦР с видоспецифичными праймерами, т. е. амплификация тех участков ДНК, которые коррелируют с видовым статусом гриба. В большинстве случаев идентификация с помощью ПЦР не требует выделения чистых культур. Общее описание коллекции Коллекция грибов – возбудителей болезней картофеля включает 174 штамма, из них: Colletotrichum coccodes (Wallr.) S. Hughes – 52 штамма, выделенные из пораженных образцов, собранных в Костромской, Владимирской, Московской областях, Республике Марий Эл, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля. Все штаммы C. coccodes охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), генов глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназы, актина и глутамин-синтетазы, а также по морфолого-культуральным признакам. Изучена устойчивость штаммов к фунгицидам тиабендазол, пенцикурон, азоксистробин, дифеноконазол, флудиоксонил, модифицированное коллоидное серебро. Thanatephorus cucumeris (A.B. Frank) Donk (название анаморфной стадии Rhizoctonia solani) – 14 штаммов, выделенных из пораженных образцов, собранных в Костромской и Владимирской областях, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля. Все штаммы T. cucumeris охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), а также по морфолого-культуральным признакам. Изучена устойчивость штаммов к фунгицидам тиабендазол, пенцикурон, азоксистробин, дифеноконазол, флудиоксонил, модифицированное коллоидное серебро. Helminthosporium solani Dur. et Mont – 21 штамм, выделенный из пораженных образцов, собранных в Брянской, Костромской, Московской областях, Республике Чувашия, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля. Все штаммы охарактеризованы по структуре ДНК участка ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), по морфологическим параметрам, по устойчивости к фунгицидам тиабендазол, азоксистробин, дифеноконазол, модифицированное коллоидное серебро. Alternaria alternata (Fr.) Keissl – 16 штаммов, выделенных из пораженных образцов, собранных в Костромской, Владимирской, Московской областях. Все штаммы A. alternata охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), а также по морфолого-культуральным признакам. Alternaria solani Sorauer – 3 штамма, выделенные из пораженных образцов, собранных в Рязанской области. Все штаммы A. solani охарактеризованы по последовательностям нуклеотидов ядерных рибосомных генов и межгенных спейсеров (ITS), а также по морфолого-культуральным признакам. Phytophthora infestans (Mont.) de Bary – 55 штаммов, выделенных из пораженных образцов, собранных в Рязанской и Московской областях. Два штамма выделены из пораженных листьев паслена сладко-горького в Москве. Все штаммы P. infestans охарактеризованы по типам спаривания. Fusarium spp. – 10 штаммов, из них 9 выделены с картофеля и 1 – с томата. Также в коллекции имеется 3 штамма (Fusarium solani (Mart.) Sacc., F. sporotrichioides Sherb., F. oxysporum Schltdl), переданные специалистами Крымского НИИСХ. Colletotrichum coccodes (Wallr.) S. Hughes Возбудитель заболеваний антракноз и черная пятнистость клубней. Принадлежит к семейству Glomerellaceae, подклассу Hypocreomycetidae, классу Sordariomycetes, подотделу Pezizomycotina, отделу Ascomycota, царству Fungi. Колонии C. coccodes, выращенные на искусственных средах, представлены преимущественно белым рассеянным воздушным мицелием и обильными черными микросклероциями, которые равномерно распределены по поверхности агара (Davis & Johnson, 2002) (рисунок 1). Микросклероции представляют собой плотное сплетение меланизированных гиф и щетинок. Размер микросклероциев варьирует от 150 до 230 мкм (Blakeman & Hornby, 1966; Griffiths & Campbell, 1972; Sutton, 1992). Морфология микросклероциев может меняться в зависимости от конкретного изолята и субстрата. Возможно непосредственное прорастание микросклероциев для проникновения в тело хозяина посредством мицелия, либо вокруг них формируется палисадный слой конидиеносцев и образуются конидии (Sanogo & Pennypacker, 1997). Рисунок 1 – Колония C. coccodes (штамм 13 Ges 18) на агаризованной среде (сусло-агар) Конидии гиалиновые (неокрашенные), без перегородок, веретенообразные, резко сужающиеся к каждому концу, формируются в слизистой массе и имеют 16-24 мкм в длину и 3-4 мкм в ширину (Sutton, 1992). Конидии прорастают в течение 2-х часов, а меланизированные аппрессории могут образовываться через 22 часа (Byrne et al., 1997). Конидиеносцы септированные и разветвленные, оканчиваются группой конидиогенных клеток – фиалид (McIntyre & Rusanowski, 1975). Конидиеносное ложе, полученное в культуре, а также на стеблях, корнях, плодах и клубнях, обычно ассоциированное с микросклероциями, имеет круглую или удлиненную форму и достигает 200-300 мкм в диаметре. Коллекционные штаммы были выделены из пораженных образцов, собранных в Костромской, Владимирской, Московской областях, Республике Марий Эл, а также из импортированных в Россию из Германии и Голландии клубней семенного картофеля (таблица 2). Таблица 2 – Происхождение коллекционных штаммов C. coccodes.
Продолжение таблицы 2
|
Удаление или уничтожение возбудителей инфекционных (паразитарных)... Дезинфекция удаление или уничтожение возбудителей инфекционных (паразитарных) болезней в (на) объектах окружающей среды. Производится... |
Унифицированный клинический протокол оказания медицинской помощи при инфекционном эндокардите Эти рубрики не используются при первичном кодировании заболевания. Они предназначены для использования в качестве дополнительных... |
||
Донецкой Народной Республики 02. 03. 2017 №285 унифицированный клинический... Эти рубрики не используются при первичном кодировании заболевания. Они предназначены для использования в качестве дополнительных... |
Сибирского отделения российской академии наук Название коллекции «Коллекция экстремофильных микроорганизмов и типовых культур» |
||
01. 11 Выращивание зерновых, технических и прочих Выращивание картофеля, столовых корнеплодных и клубнеплодных культур с высоким содержанием крахмала или инулина |
Отдел образования муниципального района илишевский район Основной вид лпх приусадебное хозяйство многопрофильного характера с посевами картофеля и овощных культур, плодовыми деревьями и... |
||
Временная инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации болезней прудовых рыб С целью предупреждения инфекционных и инвазионных болезней рыб в прудовых и других рыбоводных хозяйствах рекомендуется |
Инструкция по дезинфекции Общие положения Основное назначение дезинфекции, дезакаризации, дезинсекции и дератизации на пасеках обезвредить возбудителей и переносчиков заразных... |
||
Установка сетевой версии системы "kadastr" Создайте на жестком диске каталог kadastr (или каталог с другим названием), в котором будут размещены Ваши базы данных и скопируйте... |
Подготовка картофеля к посадке Не стоит использовать на посадку смесь сортов картофеля. Из-за неодинаковых сроков созревания они требуют разных сроков посадки и... |
||
Оао «чувашторгтехника» Электрическая фритюрница кухонная ... |
Российской федерации фгу «Владимирская государственная зональная... Предназначена для рядковой посадки не пророщенных клубней картофеля с междурядьями 70; 75 и 90см с одновременным внесением минеральных... |
||
2. назначение дезинфекции и подготовка к ее проведению Под дезинфекцией понимают уничтожение на объектах внешней среды или удаление патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Под... |
На поставку товара: Реагенты для генодиагностики возбудителей Реагенты для генодиагностики возбудителей инфекционных заболеваний г. Екатеринбург «24» апреля 2013 года |
||
Исследование продовольственного картофеля нашего поселения «Непецинское» Века. Его по праву называют вторым хлебом. Клубни картофеля, в зависимости от его назначения, содержат до 25 сухого вещества, в том... |
Инструкция по охране труда для работ на электромеханической картофелечистке... Для обработки овощей и картофеля необходимо предусматривать максимальную механизацию труда. Важнейшая операция при его обработке... |
Поиск |