Euro-asian council for standardization, metrology and certification
|
Скачать 292.54 Kb.
|
|
7.7 Определение ростовых свойств питательных сред 7.7.1 Определение ростовых свойств проводят для каждой партии коммерческой среды (сухой и готовой к использованию), а также для каждой партии среды, изготовленной в лаборатории. 7.7.2 При испытании ростовых свойств питательных сред, используемых для определения бактерий и грибов, в две пробирки со средой вносят культуру тест-штамма, каждого отдельно, согласно таблице 3 в количестве 10 – 100 КОЕ. Таблица 3 – Тест-микроорганизмы для проверки ростовых свойств питательных сред, используемых для определения бактерий, грибов и микоплазм
Окончание таблицы 3
Инкубируют в соответствии с условиями, описанными в таблице 3. Если в течение времени инкубации в средах визуально отмечают рост тест-штамма микроорганизма, среду считают пригодной для использования. 7.7.3 При проведении испытаний на ростовые свойства питательных сред для определения микоплазм в биологических препаратах используют по крайней мере один из видов микоплазм, указанных в таблице 3. При этом учитывают целевое назначение тест-культур: - Acholeplasma laidlawii NCTC 10116, ATCC 23206 (вакцины для ветеринарного применения, в производстве которых используют антибиотики); - Mycoplasma gallisepticum NCTC 10115, ATCC 19610 (в случаях, когда при производстве вакцин используются материалы, имеющие птичье происхождение или для вакцин, применяемых в птицеводстве); - Mycoplasma hyorhinis NCTC 10130, ATCC 17981 (вакцины для ветеринарного применения, кроме птичьих); - Mycoplasma orale NCTC 10112, ATCC 23714 (вакцины для ветеринарного применения); - Mycoplasma synoviae NCTC 10124, ATCC 25204 (в случаях, когда для производства вакцин используются материалы, имеющие птичье происхождение или для вакцин, применяемых в птицеводстве). 7.7.4 Выбранные питательные среды для микоплазм засевают соответствующими тест-микроорганизмами. На чашку Петри с твердой питательной средой или флакон вместимостью 100 см3, содержащий жидкую питательную среду, вносят не более 100 КОЕ тест-микроорганизма. Для каждого вида микроорганизма используют отдельные чашки и флаконы. Жидкие среды инкубируют при температуре от 36 оС до 38 оС; твердые среды инкубируют в микроаэрофильных условиях (в атмосфере азота, содержащего 5 % − 10 % диоксида углерода) при температуре от 36 оС до 38 оС. После инкубации проводят пересевы по 0,2 см3 жидкой среды на твердую среду на седьмой, четырнадцатый и двадцатый день. Твердая среда выдерживает испытание, если наблюдается адекватный рост каждого тест-микроорганизма. Жидкая среда выдерживает испытание, если наблюдается адекватный рост пересеянного с нее тест-микроорганизма на чашках Петри с твердой питательной средой. 7.7.5 Питательные среды должны обеспечивать рост микроорганизмов-контаминантов биологических препаратов. 7.7.6 Готовые питательные среды, проверенные на ростовые свойства, разливают по 6 – 8 см3 (для определения анаэробных микроорганизмов по 10 – 12 см3) в пробирки и по 50 – 60 см3 во флаконы вместимостью 100 см3. 8 Проведение испытания 8.1 Проведение испытания на стерильность инактивированных лекарственных средств с использованием тиогликолевой среды 8.1.1 Из каждого флакона (ампулы) лекарственного средства проводят посев в количестве, приведенном в таблице 2, в три пробирки с тиогликолевой средой, три пробирки с жидкой средой Сабуро и три пробирки с соево-казеиновой средой. Посевы на жидкой тиогликолевой среде инкубируют при температуре (32,5 ± 2,5) оС, а на жидкой среде Сабуро и жидкой соево-казеиновой среде (независимо от метода посева) при температуре (22,5 ± 2,5) оС. Срок инкубирования – 14 сут. Посевы периодически просматривают. 8.1.2 Наличие роста микроорганизмов определяют визуально. Если в процессе инкубирования посевов исследуемая проба вызывает помутнение питательной среды, через 5 – 7 сут после начала испытания не менее 1 см3 помутневшей среды переносят в две пробирки с той же стерильной средой. Инкубируют исходные посевы и пересевы в течении (14 ± 4) сут. 8.1.3 При испытании проб препаратов на стерильность проводят контроль стерильности сред: три пробирки с каждой средой выдерживают в термостате в течение 14 сут при температуре (32,5 ± 2,5 ) оС, со средой Сабуро – при температуре (22,5 ± 2,5) оС. 8.2 Проведение испытания на стерильность инактивированных или микробной контаминации анаэробными, анаэробными микроорганизмами и грибами лекарственных средств, содержащих живые микроорганизмы без тиогликолевой среды 8.2.1 Из каждой пробы лекарственного средства проводят посев на жидкие питательные среды: Сабуро, МПБ и МППБ (среда Китт-Тароцци) и твердые питательные среды: Сабуро и МПА. На посев используют по три пробирки и две чашки с питательной средой. На среду Китт-Тароцци делают высевы в две пробирки и два флакона. 8.2.2 Для выявления аэробных микроорганизмов и факультативно-анаэробных микроорганизмов высевают 0,5 см3 посевного материала в одну пробирку и 1 – 2 см3 в один флакон, а для выявления анаэробных микроорганизмов – соответственно по 1 и 5 см3. 8.2.3 Пробирки и флаконы с посевами на всех средах, кроме среды Сабуро, выдерживают в термостате при температуре (37 ± 1) оС, на среде Сабуро – при температуре (22,5 ± 2,5) оС, в течение 7 сут (для анаэробных препаратов – 14 сут). 8.2.4 По истечении указанного срока делают пересев, за исключением посевов на МПА. Пересевают пробы на те же питательные среды и в тех же объемах, что и при посеве. Вторичные посевы выдерживают 7 сут (для анаэробных препаратов – 14 сут). 8.3 Проведение испытания на контаминацию микоплазмами 8.3.1 Для определения контаминации микоплазмами лекарственных средств проводят их посев на выбранные питательные среды (7.5.9 – 7.5.11) в количестве 10 см3 лекарственного средства на 100 см3 каждой жидкой среды, а также по 0,2 см3 на четыре чашки Петри с аналогичной твердой питательной средой. Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) оС в аэробных и микроаэрофильных условиях (в атмосфере азота, содержащего 5 − 10 % диоксида углерода). Жидкие питательные среды инкубируют в течение 20 – 21 дня. Твердые питательные среды инкубируют в течение не менее 14 дней, за исключением посевов, соответствующих 20 – 21-дневному пересеву, которые инкубируют в течение 7 дней. Одновременно в тех же условиях инкубируют по одному флакону, содержащему 100 см3 и по две чашки Петри со средами для контроля их стерильности. На 2 – 4 день после посева проводят пересев материала от каждой жидкой среды в количестве не менее 0,2 см3 на две чашки Петри каждой твердой среды. Пересевы повторяют на 7, 14 и 20-ый дни испытания. Пересевы инкубируют при температуре (37 ± 1) оС в аэробных и микроаэрофильных условиях (в атмосфере азота, содержащего 5 − 10 % диоксида углерода) в течение 21 дня. 8.3.2 Состояние жидких сред контролируют каждые два или три дня и, в случае изменения окраски среды, выполняют пересев. Если в жидких средах обнаруживают рост бактерий и грибов, испытание считают недействительным и повторяют. 8.3.3. Допускается для целей экспресс-метода выявления микоплазм и/или подтверждения принадлежности выделенных культур к микоплазмам использование метода полимеразной цепной реакции с применением соответствующих тест-систем. Работу проводят по инструкции производителя. 9 Проведение испытания на стерильность методом мембранной фильтрации 9.1 При определении стерильности лекарственных средств, обладающих выраженным антимикробным действием, а также в расфасовке более, чем 100 см3, можно использовать метод мембранной фильтрации. 9.2 Испытание проводят с использованием фильтрационной установки, которую монтируют таким образом, чтобы исследуемую пробу жидкого препарата можно было ввести и профильтровать в условиях асептики. Используют мембранные фильтры с размером пор 0,45 ± 0,02 мкм и внешним диаметром 47 мм с установленной способностью к удерживанию микроорганизмов. Материал фильтров − нитрат целлюлозы или ацетат целлюлозы. 9.3 Отбирают необходимое для испытания количество исследуемой пробы согласно таблице 2 и асептически переносят на один или несколько фильтров. При использовании замкнутой системы, емкости заполняют равным объемом сред. При этом следует избегать аэрации тиогликолевой среды. Испытания проводят под вакуумом при давлении 93,3 кПа и скорости прохождения жидкости 55 − 75 см3 в мин. 9.4 После окончания фильтрации мембрану промывают 3 − 5 порциями стерильного 0,9 %-ного раствора хлорида натрия или дистиллированной воды, после чего мембрану асептически извлекают, разрезают стерильными ножницами пополам. Одну половину помещают в колбу, содержащую 100 см3 тиогликолевой среды, а вторую − в колбу со 100 см3 среды Сабуро. Тиогликолевую среду с помещенными в них фильтрами выдерживают при температуре (32,5 ± 2,5) оС, а среду Сабуро при температуре (22,5 ± 2,5) оС в течение 7 сут при ежедневном просмотре. 10 Учет и оценка результатов 10.1 Учет результатов проводят после окончания периода инкубации. 10.1.1 Лекарственные средства, содержащие инактивированные микроорганизмы и грибы, считают стерильными, если в посевах на питательные среды отсутствует рост бактерий, грибов и микоплазм. 10.1.2 Лекарственные средства, содержащие живые микроорганизмы и грибы, считают свободными от контаминации посторонними бактериями, грибами и микоплазмами, если в посевах на питательные среды не обнаруживают рост посторонней микрофлоры. 10.1.3 Если при определении микоплазм обнаружен рост сомнительных колоний, то проводят их идентификацию. Клеточные культуры окрашивают флуоресцентным красителем, обладающим способностью связываться с ДНК. Микоплазмы обнаруживают по характерной точечной или волокнистой флуоресценции на клеточной поверхности. Лекарственные средства считают выдержавшими испытание, если типичная для микоплазм флуоресценция не обнаружена. Библиография [1] EC Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products for Human and Veterinary Use УДК 615.37: 619.001. 006.354 МКС 11.220 Ключевые слова: средства лекарственные, стерильность, контаминация, микробиологическая оценка, питательные среды, микрофлора, микоплазмы, мембранная фильтрация |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 |
Euro-asian council for standardization, metrology and certification Еасс представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых... |
|
Euro-asian council for standardization, metrology and certification Еасс представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых... |
|
Euro-asian concil for standartization, metrology and certification Еасс представляет собой региональное объединение национальных органов по стандартизации государств, входящих в Содружество Независимых... |
|
Инструкция по обслуживанию r/4CT90-1ME/I/uaz euro 2 9242 Двигатели 4СТ90-1меа1602, 4СТ90-1меа1603 оборудованы топливным насосом Моторпаль, исполняют требования норм Euro 2 (экг №49. 02).... |
|
Инструкция по обслуживанию r/4CT90-1ME/I/uaz euro 2 9242 Двигатели 4СТ90-1меа1602, 4СТ90-1меа1603 оборудованы топливным насосом Моторпаль, исполняют требования норм Euro 2 (экг №49. 02).... |
|
Request for Taxpayer Identification Number and Certification Коммерческое обозначение/наименование организации, не являющейся юридическим лицом, если отличается от указанного выше |
 |
Организации, не являющейся юридическим лицом / Business name/disregarded... Идентификация номера и сертификации налогоплательщика / Request for Taxpayer Identification Number and Certification |
|
Зао «соломенский лесозавод» Certification Body (CB): Rainforest Alliance SmartWood Program Республика Карелия, Республика Коми, Вологодская, Архангельская, Ленинградская, Кировская области |
|
Топливо, масла и смазки ... |
|
Задача отборочного теста Целью данного теста является отбор кандидатов, владеющих английским языком на уровне Bl (Threshold) согласно классификации, принятой... |
|
1 Понятие Internet. Ресурсы Internet Под словом Internet понимается глобальная компьютерная сеть, "Сеть сетей", как часто говорят о ней. Такое понимание Internet зафиксировано... |
|
Инструкция по эксплуатации назначение Январь., Bosch 5 4, Bosch 4N., Bosch мр 0 (Euro 2,3), vs 1 Ителма, Bosch mp 7 (Bosch 80), Январь 2, а также на автомобили иж (ода),... |
|
Розничные цены в Euro, самовывозом со склада поставщика, включая ндс Рама с пескоструйной обработкой и двумя слоями порошковой краски: эпоксидная антикоррозионная грунтовка и верхний слой из полиэстер... |
|
В штате техас руководящие материалы и процесс одобрения для учреждений высшего образования Техас (Texas Higher Education Coordinating Board, thecb), Комиссией Общего Сервиса / Офисом Сбережения энергии штата (General Services... |
|
Поддержка Агентств Поддержки мб и Центров Деловой Информации в Российской... Данный Отчет был составлен ramb0ll cna veneto Euro-ln Consulting Консорциум в рамках Проекта Tacis smerus 9602 "Поддержка Агентств... |