К.А. Егоров, А.В. Смирнов, В.Ф. Михальченко, Г.Л. Снигур, С.В. Гришин, М.В. Черников, М.В. Букатин.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПУЛЬПЕ КРЫС ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ПУЛЬПИТА
Кафедра патологической анатомии, кафедра терапевтической стоматологии, кафедра биологии ВолГМУ, лаборатория морфологии и иммуногистохимии ВНЦ РАМН и АВО.
Проблема пульпита на протяжении многих лет привлекает внимание исследователей. Ее актуальность объясняется тем, что пульпит, занимает в структуре стоматологических заболеваний значительное место: 20-30% от общего числа лиц, обратившихся за стоматологической помощью[1], а успех эндодонтического лечения в нашей стране составляет 36% [4].
Считается, что основной причиной, способствующей воспалению в пульпе, является кариозное поражение, которое проявляется локальным, прогрессивным разрушением зуба [1, 12]. Начальные стадии воспалительного процесса в пульпе зуба в основном протекают по типу экссудативного воспаления, однако исход этого процесса может существенно отличаться ввиду ограниченности полости зуба твердыми дентинными стенками, почти полным отсутствием коллатерального кровообращения и способностью одонтобластов к выработке репаративного дентина [1, 3, 7, 10].
При остром воспалении нейтрофилы выделяют вещества, разрушающие ткани, включающие в себя кислородные радикалы, лизосомальные ферменты и значительные количество оксида азота (NO) [8, 10]. Эти агенты способствуют деградации пульпарной ткани и активации иммунологической реакции [7]. Несмотря на воздействие микроорганизмов и интенсивную воспалительную реакцию, пульпа может сохранять свои функции еще продолжительный период времени, но в отсутствие правильно проведенного лечения результатом обычно оказывается пульпарный некроз [1, 4, 7].
В зависимости от вирулентности инфекционного начала, компенсаторно-приспособительных возможностей организма, общего иммунного статуса острое воспаление пульпы может перейти в хроническое, но нередко пульпит может возникнуть как первично-хронический воспалительный процесс [1,2,4].
Хроническое воспаление может развиться и без предшествующего острого воспаления, как реакция на внедрение бактерий при кариозном процессе и микроподтекании между реставрацией и зубными тканями. Хроническое воспаление иногда рассматривается как «неудавшееся восстановление» («frustrated repair») после острого воспаления [9].
При патологоанатомическом исследовании основным изменением при хроническом пульпите является разрастание волокнистой соединительной ткани. Клеточная реакция при хроническом пульпите проявляется лимфо-гистиоцитарной инфильтрацией. В корневой пульпе часто встречаются явления фиброза и петрификации. Кроме того, выявляется вакуолизация цитоплазмы одонтобластов, гиалиноз коллагеновых волокон, следы кровоизлияний различной давности [1, 2, 4].
Цель работы. Выявить морфологические особенности протекания воспалительного процесса в пульпе зуба в различные сроки экспериментально моделируемого хронического пульпита.
Методика исследования. Исследования были выполнены на 15 половозрелых нелинейных белых крысах-самцах массой 350-420 г. Зубы животных интактной группы (5 крыс, n = 20) составляли контроль. Животные содержались в условиях вивария, согласно правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ Р 50258-92, ГОСТ 3 51000.3-96 и 51000.4-96) с соблюдением Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997).
У животных экспериментальной группы (10 крыс, 40 зубов) моделировали хронический пульпит. Под общей анестезией раствором золетила 5 мг/кг и рометара 2% 2 мг/кг [5] алмазным шаровидным бором с диаметром рабочей части 1,5 мм наносили повреждения на жевательной поверхности 4 моляров. Повреждения были сделаны на глубину 1,5 мм и точечно файлом № 20 вскрыта полость пульпы. Крысы контрольной группы были только анестезированы аналогично опытной группе. Все животные содержались в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. Через 2 недели (1-я группа) , 4 недели (2-я группа), 6 недель (3-я группа), 8 недель (4-я группа), 10 недель (5-я группа) крысы подвергались эвтаназии путем декапитации в соответствии с Приложением № 4 к Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных (Приказ № 755 от 12.08.1977 г.). Зубы фиксировали в течение 24 часов в 10% растворе нейтрального забуференного формалина (pH 7,4), декальцинировали в растворе трилона В, обезвоживали и заливали в парафин по общепринятой гистологической методике. Изготавливались срезы толщиной 3-5 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином по стандартной методике [6].
Гистологические препараты изучали с использованием микроскопа «Micros» (Австрия), фотографировали цифровой камерой (Canon, Япония). При исследовании оценивали наличие морфологических признаков воспалительной реакции в пульпе зуба.
Результаты исследования и их обсуждение. В пульпе зубов первой экспериментальной группы отмечались умеренно выраженные явления отека стромы, полнокровие кровеносных сосудов и очаговые кровоизлияния в строму, а так же умеренное очаговое разрастание волокнистой соединительной ткани, отложение солей кальция и диффузная инфильтрация стромы с незначительным количеством лимфоцитов и макрофагов.
При морфологическом исследовании второй группы были выявлен незначительный неравномерный отек стромы, умеренное полнокровие кровеносных сосудов, а так же умеренное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани. В единичных случаях отмечалась выраженная очаговая инфильтрация стромы сегментоядерными нейтрофильными гранулоцитами (формирование пульпарных микроабсцессов).
В третьей экспериментальной группе отмечалось умеренное полнокровие кровеносных сосудов и умеренное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани. Наряду с этим наблюдалась очаговая инфильтрация стромы лимфоцитами и макрофагами. Необходимо отметить очаговые дистрофические изменения (кальцификация) в пульпе на фоне умеренно выраженных признаков диффузного продуктивного (хронического) пульпита.
В пульпе зубов четвертой и пятой экспериментальных групп отмечалось отложение солей кальция, более выраженное диффузное разрастание волокнистой соединительной ткани и очаговая инфильтрация стромы лимфоцитами и макрофагами, что свидетельствует о сохранении дистрофических изменений в пульпе и умеренно выраженных признаках продуктивного воспаления (хронического пульпита).
Полученные данные сопоставимы с описанием морфологической картины пульпита в научной литературе [1-4, 7-9, 11, 12], что говорит об адекватности, предложенной модели хронического пульпита. Исследование морфологических изменений в пульпе зуба выявило ряд особенностей протекания воспалительного процесса в пульпе зубов крыс.
Заключение. Результаты исследования свидетельствуют о том, что в пульпе зубов второй и третьей экспериментальных групп (2 и 4 неделя эксперимента) обнаруживаются морфологические признаки экссудативного серозного, реже гнойного очагового воспаления и умеренно выраженные признаки продуктивного (хронического) пульпита. В более поздние сроки эксперимента (6-10 недель) отмечено преобладание признаков продуктивного воспаления в пульпе и очаговое дистрофическое обызвествление.
ЛИТЕРАТУРА
1. Боровский Е.В. // Терапевтическая стоматология. – М.: «Медицинское информационное агенство». - 2004. - С. 375-377.
2. Данилевский Н.Ф., Сидельникова Л.Ф., Рахний Ж.И. // Пульпит. - Киев.: Издательство «Здоровье». - 2003. – С. 18-24.
3. Коэн С., Бернс Р.// Эндодонтия. - Перевод с английского Шульги О.А., Куадже А.Б.. –С.-Петербург: НПО «Мир и семья», ООО «Интерлайн». - 2000.- С. 312-320.
4. Петрикас А.Ж. // Пульпэктомия. – 2-е изд. – М.: АльфаПресс. 2006. - Стр. 26-28, 35.
5. Пламб Д.К.// Фармокологические препараты в ветеринарной медицине. - Перевод с англ. Осипова Е.И.- М.: Аквариум ЛТД. - 2002. - Стр. 737-739, 774-776.
6. Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. // Микроскопическая техника. - М.: Медицина. - 1996. – 544с.
7. Bergenholtz G., Horsted-Bindslev P., Reit C.// Textbook of endontology. - Blackwell Publishing Ltd. - 2010. - P. 25-278.
8. Cawson R.A., Odell E.W. // Oral Pathology. - Churchill Livingstone. - 1995.- Р. 7-9.
9. Hargreaves K.M., Goodis H.E. // Seltzer and Bender’s dental pulp. - Quintessence Puplishing Co, Inc. 2002. - P. 227-235.
10. Ingle J.I., Bakland L.K. // Endodontics. – William & Wilkians. - 1994. – Р. 350-357.
11. Nevill B. W., Allen C. M., Bouquot J.E. // Oral and Maxillofacial Pathology. – 2002. - Р. 107-110.
12. Seltzer S., Bender I. // The dental pulp. – Philadelphia. - J.B. Lippincott Company. - 1987. - P. 11, 252-260.
|
