Скачать 1.69 Mb.
|
2.2. Выделение микроорганизмов и чувствительность аэромонад, псевдомонад, флексибактерий к фторхинолонам В ходе эпизоотологического обследования Клинского рыбхоза из нагульных прудов Дятловского, Яузского и Владимирского участков в летний период 2002 года были отобраны 2-х, 3-х и 4-х летки карпа с признаками хронического течения аэромоноза. Бактериологическими исследованиями из крови, почек, печени и селезенки была выделена в основном смешанная микрофлора, включающая роды и виды бактерий: Aeromonas – 19, Pseudomonas – 5, Acinetobacter – 17, Alcaligenes – 6, Flavobacterium – 3, Flexibacter – 3, Plesiomonas – 2, E.coli – 3, энтеробактерии - 6 изолятов. Выборочная проверка патогенности выделенных бактерий в биопробах на здоровых карпах показала, что среди аэромонад встречались как вирулентные (A. hydrophila, A. sobria, A. veronii), выделенные от больных рыб с покраснением брюшка и язвами, так и авирулентные культуры, а псевдомонады были, как правило, авирулентны. Для определения наиболее активного препарата в отношении аэромонад и псевдомонад было использовано 3 препарата из группы фторхинолонов: ципрофлоксацин, энрофлоксацин и норфлоксацин (табл. 2). Методом диффузии в агар изучали чувствительность к ним вирулентных аэромонад (изоляты – Кл-152, Кл-222) и авирулентных псевдомонад (Кл-3, Кл-39, Кл-241), выделенных из Клинского рыбхоза и авирулентной культуры аэромонад (ХК-5), выделенной от здоровых карпов из благополучного по инфекционным болезням пруда, расположенного на экспериментально-производственной базе ВНИИ ирригационного рыбоводства. Из таблицы 2 видно, что в отношении аэромонад ципрофлоксацин и энрофлоксацин обладают примерно одинаковой активностью, которая выше, чем у норфлоксацина. При этом прослеживается взаимосвязь вирулентности Таблица 2 Сравнительная активность фторхинолоновых препаратов в отношении аэромонад и псевдомонад
и устойчивости микроорганизмов к антимикробным препаратам. Вирулентная культура A. hydrophila (Кл-222) оказалась устойчивой практически ко всем 3-м препаратам, в то время как авирулентная - A. schubertii (ХК-5) показала к ним высокую чувствительность. Вирулентная культура A. sobria (Кл-152) занимала промежуточное положение и ее можно отнести к умеренно чувствительной к ципрофлоксацину и энрофлоксацину. В отношении псевдомонад наиболее активным оказался ципрофлоксацин, что свидетельствует о его преимуществе по сравнению с другими препаратами. Исходя из того, что в «Рыбхозе Клинский» установлена смешанная инфекция, вызванная аэромонадами в ассоциации с псевдомонадами и другими бактериями, для групповой лечебно-профилактической обработки было решено использовать Антибак 100 с кормом. В последующие годы при изучении эпизоотической ситуации и постановке производственных опытов мы также определяли чувствительность аэромонад к ципрофлоксацину по сравнению с другими антибиотиками. Так, аэромонады, выделявшиеся от рыб из «Рыбхоза Клинский» были наиболее чувствительны к ципрофлоксацину (зона задержки роста 22 – 28 мм), несколько менее чувствительны к тетрациклину (20 – 24 мм) и левомицетину (19 – 27 мм), но устойчивы к гентамицину (12 – 14 мм) и стрептомицину (0 – 11 мм). С целью определения минимальных подавляющих концентраций (МПК) и бактерицидных концентраций ципрофлоксацина методом серийных разведений нами было использовано по 5 изолятов аэромонад и псевдомонад, отобранных из разных хозяйств (табл. 3). Аэромонады были отобраны из 3-х хозяйств: из ООО «Русская рыбалка», выделенные от 2-х и 3-хлетков карпа вирулентные культуры A. sobria (Каш-1, Каш-5), из Клинского рыбхоза, выделенные от 3-хлетков карпа вирулентные культуры (Кл-222, Кл-152) и из Новомичуринского рыбхоза, выделенные от сеголетков сибирского осетра авирулентная культура A. schubertii (Ос-12). При этом все 4 культуры аэромонад, выделенные от карпов, были вирулентны. Из псевдомонад использовали одну вирулентную культуру (БК), выделенную от карпа рыболовно-спортивного комплекса «Ромашково» и 4 авирулентные культуры, выделенные из Новомичуринского рыбхоза от сеголетков форели (Ф-4) и сеголетков сибирского осетра (Ос-3, Ос-41, Ос-42). Результаты испытаний представлены в таблице 3. Таблица 3 Чувствительность бактерий родов Aeromonas и Pseudomonas к ципрофлоксацину
Диапазоны МПК ципрофлоксацина для аэромонад составили 0,01 – 0,16 мкг/мл, для псевдомонад – 0,08 – 0,32 мкг/мл, а бактерицидной концентрации для аэромонад – 0,08 – 1,25 мкг/мл, для псевдомонад – 0,63 – 1,25 мкг/мл. Более чувствительными к препарату оказались бактерии рода Aeromonas. При этом МПК вирулентных аэромонад и псевдомонад была заметно выше, чем у авирулентных. В целом все исследуемые культуры можно считать высокочувствительными по отношению ципрофлоксацину. Учитывая то, что в рыбхозе «Новомичуринский» весной 2003 года были 2 вспышки флексибактериоза, вызванного флексибактериями в ассоциации с другой условно патогенной микрофлорой, возникла необходимость поиска средств, подавляющих флексибактерии и сопутствующие потенциально опасные аэромонады, псевдомонады и др. С этой целью нами были использованы результаты сотрудников ВНИИПРХ (Л.Н. Юхименко), проводивших по заказу НВЦ «Агроветзащита» исследования сравнительной чувствительности бактерий родов Aeromonas и Flexibacter, выделенных от рыб Новомичуринского рыбхоза, к различным химиотерапевтическим препаратам. Для этого были взяты 3 препарата: 1. Хлортетрациклин из группы антибиотиков, ранее применявшийся в хозяйстве; 2. Фуранас (Furanace, Aqua Furan, Baktopur direct) из группы фурановых препаратов фирмы Pahlsmeier GmbH, действующим веществом которого является нифурпиринол; 3. Антибак из группы фторхинолонов, содержащий в качестве действующего вещества ципрофлоксацин. Оценка активности препаратов проводилась методом диффузии в агар по величине зоны задержки роста бактерий. Результаты исследования представлены в таблице 4. Из таблицы 4 видно, что концентрация Антибака, соответствующая минимальной зоне задержки роста флексибактерий, составила 0,17 мкг/мл, нифурпиринола – 5 мкг/мл, окситетрациклина – 200 мкг/мл. Минимальная зона задержки роста аэромонад обусловлена концентрациями: Антибака – 0,67 мкг/мл, нифурпиринола – 5 мкг/мл, окситетрациклина – 2 мкг/мл. Флексибактерии оказались более чувствительны к Антибаку и Фуранасу, тогда как по отношению к окситетрациклину они были более устойчивы, чем аэромонады. В целом можно заключить, что по антимикробному действию на возбудителей флексибактериоза и аэромоноза препарат Антибак показал Таблица 4 Сравнительная активность антибактериальных препаратов в отношении аэромонад и флексибактерий (по данным ВНИИПРХ)
бόльшую активность по сравнению с окситетрациклином и новым препаратом Фуранас. Исходя из этого, в данном хозяйстве для борьбы с флексибактериозом осетров и форели также было принято решение применить препарат Антибак. 2.3. Фармакокинетика ципрофлоксацина в организме карпов Фармакокинетику ципрофлоксацина в организме рыб изучали при пероральном, перкутанном (через воду) и внутрибрюшинном введении препарата сеголеткам карпа. В опыты брали такое количество рыб, которое необходимо для определения препарата в динамике. Результаты опытов представлены в таблицах 5, 6, 7, 8, 9. 2.3.1. Пероральное введение При однократном пероральном введении через зонд суспензии Антибака 100 двум группам рыб в дозах 20 и 100 мг/кг живой массы установили, что он достаточно быстро всасывается из кишечника и распределяется по всем органам. Максимального уровня накопления ципрофлоксацин достигал в организме карпов обеих групп через 2 – 5 часов (табл. 5). При этом в 1-й группе количество препарата в крови через 5 часов после его введения оказалось на уровне 13% от вводимой дозы (20 мг/кг), а во 2-й группе – 2,6% от дозы 100 мг/кг. Таблица 5 Концентрация ципрофлоксацина в пробах исследуемого материала при пероральном введении (мкг/г)
*( - ) – отсутствие препарата Несмотря на разную биодоступность, полученные показатели в обеих группах превышали максимальную бактерицидную концентрацию в отношении аэромонад и псевдомонад (1,25 мкг/мл) в 2 и более раза. Однако у рыб 1-й группы через 24 часа в крови содержание препарата резко снизилось: он не обнаруживался вообще, а мышцах улавливали только его следы. Полностью препарат выводился из организма уже через 3 суток. Во 2-й группе рыб ципрофлоксацин задерживался дольше, особенно в паренхиматозных органах. Так, в крови он удерживался до 3-х суток, во внутренних органах его бактерицидная концентрация сохранялась не менее 5 суток, затем снижалась до бактериостатической и находилась на этом уровне 20 суток и более, а в мышцах препарат не обнаруживался на 10-е сутки с момента введения. В среднем период полувыведения ципрофлоксацина во 2-ой группе составил около 19 часов, а в 1-ой группе данный показатель точно установить не удалось, но он оказался гораздо ниже, чем во 2-ой группе, так как через 19 часов наблюдалось его полное отсутствие в крови. |
Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с миксобактериозами лососевых рыб общие положения Миксобактериозы широко распространенные бактериальные заболевания пресноводных рыб, вызывающие поражения жабр и кожи рыб при их выращивании... |
Министерство здравоохранения российской федерации Профилактическая витаминизация детей в дошкольных, школьных, лечебно-профилактических учреждениях и домашних условиях |
||
Программа наименование дисциплины ветеринарная санитария Рекомендуется... Общая эпизоотология, терапия и лечебно-профилактические мероприятия при инфекционных болезнях; ветеринарная санитария; частная эпизоотология.... |
Временная инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации болезней прудовых рыб С целью предупреждения инфекционных и инвазионных болезней рыб в прудовых и других рыбоводных хозяйствах рекомендуется |
||
Должностная инструкция На должность гигиениста стоматологического назначается лицо, имеющее среднее профессиональное образование по специальности "Стоматология... |
Временная инструкция Небольшая глубина прудов (до 2 3 м), быстрое прогревание воды выше 17°, обилие промежуточных хозяев, большая концентрация рыб, разновозрастные... |
||
Инструкция о мероприятиях по борьбе с бранхиомикозом рыб общие положения Бранхиомикоз опасное инфекционное (микозное) заболевание рыб разных видов и возрастов, возникающее в прудовых, садковых рыбоводных... |
М. Д. Махлин (среда обитания, обзор рыб и растений) Ю. А. Митрохин (корма и кормление, как создается новое); Г. Л. Куприянов (практика аквариумной гидрохимии); канд биол наук А. Е.... |
||
Сокращения Рекомендуются те методы и препараты, которые имеют убедительные доказательства преимуществ в безопасности, эффективности перед другими,... |
Согласовано Рекомендуются те методы и препараты, которые имеют убедительные доказательства преимуществ в безопасности, эффективности перед другими,... |
||
1. Вещества, применяемые при изготовлении лечебно-косметических препаратов 4 Группы растений, наиболее часто применяемые при изготовлении лечебно-косметических средств 10 |
Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов... Лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите |
||
О совершенствовании службы функциональной диагностики в учреждениях... Медицинскому страхованию граждан становится чрезвычайно актуальной задача разработки и внедрения в практику новых медицинских технологий,... |
Психотерапевтическая мишень в психотерапии или как повысить эффективность... Что делают психотерапевты, чтобы повысить свою эффективность и «не свихнуться» |
||
Выпускная квалификационная работа по направлению «Экономика» повышение... Эффективность менеджмента и факторы влияния на эффективность менеджмента предприятий 4 |
Учебно-методический комплекс для преподавателя по профессиональному... «Участие в лечебно-диагностическом и реабилитационном процессах» мдк 02. 01 «Сестринский уход при различных заболеваниях и состояниях»... |
Поиск |