Скачать 0.8 Mb.
|
На правах рукописи АДИЕВА АЙНА АХМЕДОВНА РОЛЬ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ПАТОЛОГИИ ПЛОДА И НОВОРОЖДЕННОГО. ПОИСК НОВЫХ ПРОТИВОВИРУСНЫХ СРЕДСТВ. 03.00.06. – Вирусология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва - 2009 г.Работа выполнена в Учреждении РАМН НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМННаучные консультанты: доктор биологических наук, КУЩ профессор Алла Александровна доктор медицинских наук, НИСЕВИЧ профессор Лика Львовна Официальные оппоненты: доктор биологических наук, МИЛЛЕР профессор Галина Генриховна доктор биологических наук БРАГИНА профессор Елизавета Ефимовна доктор медицинских наук, ЧЕШИК профессор Святослав Георгиевич Ведущая научная организация: НИИ переливания крови Научного гематологического центра РАМН Защита состоится «___» _______________ 2009 г. в ____часов на заседании Диссертационного Совета Д.001.020.01 при Учреждении РАМН НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН по адресу: 123098 Москва, ул. Гамалеи, д.16 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке при Учреждении РАМН НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН Автореферат диссертации разослан «___» __________ 2009 г. Ученый секретарь диссертационного совета, БУРЦЕВА доктор медицинских наук Елена Ивановна Список использованных сокращенийАГ – антиген АПФ – аминокислотные производные фуллерена С60 АТ – антитело БКМ – быстрый культуральный метод БОЕ – бляшкообразующая единица ВКЖ – вируссодержащая культуральная жидкость ВПР – врожденные пороки развития ВУИ – внутриутробное инфицирование ГВИ – герпесвирусные инфекции ГЦВ - ганцикловир ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота ИА – индекс авидности ИППП – инфекции, передаваемые половым путем ИФА – иммуноферментный анализ ИФН – интерферон МИ – множественность инфицирования МКА – моноклональные антитела ОАГА – осложненный акушерско-гинекологический анамнез ПСА – поликлональные антитела ПЦР – полимеразная цепная реакция ПЦР – IS - полимеразная цепная реакция in situ ПЦР – RT - полимеразная цепная реакция с детекцией в реальном времени РИФ (РНИФ) – реакция прямой (непрямой) иммунофлюоресценции УФ - ультрафиолет ФЛЭЧ – фибробласты легкого эмбриона человека ХТИ – химиотерапевтический индекс ЦД – цитотоксическая доза ЦМВ – цитомегаловирус человека ЦМВИ – цитомегаловирусная инфекция ЦНС – центральная нервная система ЦПД – цитопатическое действие ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ. Актуальность проблемы. Внутриутробная инфекция (ВУИ) занимает одно из ведущих мест в структуре перинатальной смертности, являясь основной причиной смерти или осложняя течение основного заболевания у 37,5% умерших новорожденных [Цинзерлинг и др., 2002]. Достоверных данных об истинной распространенности ВУИ нет, однако согласно данным ряда исследователей, инфекционные заболевания выявляют у 50-60% госпитализированных доношенных и 70% недоношенных новорожденных [Володин и др., 2004; Сидорова и др., 2006]. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) является одной из наиболее распространенных внутриутробных инфекций, вызывающих тяжелые патологии, вплоть до гибели ребенка [Gibson et.al., 2008; Kenneson et.al., 2007; Kriebs et.al., 2008]. Прогресс в изучении ЦМВИ связан с разработкой и широким внедрением в практику здравоохранения принципиально новых диагностических технологий – высокочувствительных и специфичных методов иммунохимии, молекулярной и клеточной биологии. В связи с этим оценка эффективности современной специфической диагностики ЦМВИ приобретает особую актуальность. Трудности анте - и постнатальной диагностики ЦМВИ связаны с неоднозначностью возможной реализации инфекционного процесса из-за особенностей иммунной системы новорожденных и неспецифичностью клинических проявлений. Несмотря на многочисленные исследования, посвященные этой проблеме, устоявшихся канонов пренатальной диагностики ЦМВИ в мире не существует. Разработка четких и общепринятых рекомендаций по лабораторному обследованию недоношенных новорожденных с сочетанной перинатальной патологией с подозрением на ЦМВИ и в России остается нерешенной задачей. Высокая инфицированность недоношенных новорожденных детей ЦМВ ставит вопрос о своевременной диагностике ЦМВИ у беременных женщин и о вертикальной передаче вируса. В связи с этим тактика ведения беременных женщин с высоким риском инфицирования плода должна включать эффективную диагностику и своевременное начало лечения ЦМВИ. На клеточном уровне цитопатический эффект ЦМВ проявляется в изменении морфологии клетки и ядра (увеличение размера, изменение формы), в образовании многоядерных клеток и в появлении внутриядерных включений [Mocarski et.al., 2001]. В связи с этим, исследования, направленные на анализ действия ЦМВ на клеточную пролиферацию, вызывают особый интерес. Так, группой авторов было показано, что ЦМВ стимулирует репликацию клеточной ДНК в зараженных клетках [Hume et.al., 2008; Kalejta et.al., 2003; McElroy et.al, 2000; Prichard et.al., 2008], описывалось существенное возрастание митотического индекса в инфицированной культуре [Sanchez et.al., 2003; Tran et.al., 2008; Wiebusch et.al., 2005]. Позже появились работы, опровергающие эти данные. Было показано, что вирус может блокировать прохождение клеточного цикла клетками в нескольких точках, включая переход из G1 – периода в фазу синтеза ДНК [Lu and Shenk, 1999; Murphy et.al., 2000; Sinclar et.al., 2000] и переход из стадии G2 в М, в точке, обозначаемой как G2/М [Castillo et.al., 2005; Lu and Shenk, 1999; Sanchez et.al., 2006]. Таким образом, данные о влиянии ЦМВ на клеточную пролиферацию оказались противоречивыми и требовали дальнейшего исследования. Фундаментальные данные о влиянии ЦМВ на клеточные структуры и жизненный цикл клетки необходимы для понимания процессов, приводящих к патологии при внутриутробном развитии детей и их гибели, а также для выбора адекватной терапевтической тактики новорожденных с ЦМВИ. Существующие на сегодняшний день единичные патентованные препараты, обладающие противовирусной активностью в отношении ЦМВ, не применяются у новорожденных и детей раннего возраста вследствие их высокой токсичности. Кроме того, эффективность лечения существующими препаратами снижена из-за развития лекарственной устойчивости, часто возникающей при длительном применении [Biron et.al., 2006; Chou et.al., 1999]. Поэтому поиск эффективных и нетоксичных анти-ЦМВ агентов, перспективных в качестве химиотерапевтических средств при ЦМВИ, остается важной проблемой. Все вышеизложенное в совокупности явилось обоснованием для проведения данного исследования. Цель исследования. Цель настоящей работы состояла в изучении маркеров ЦМВИ у недоношенных новорожденных детей с сочетанной перинатальной патологией в течение первого года жизни и в материалах аутопсии; мониторинга метаболической и иммунной терапии; в изучении антивирусной активности аминокислотных производных фуллерена С60; в исследовании действия ЦМВ жизненный цикл инфицированных клеток. Для достижения поставленной цели ставились следующие задачи:
Научная новизна.
Практическая значимость. На основании полученных данных о распространенности цитомегаловирусного инфицирования среди недоношенных детей с сочетанной перинатальной патологией представлено обоснование для организации лабораторного скрининга в отделениях реанимации и интенсивной терапии. Установлено, что для достоверной диагностики ЦМВИ у недоношенных новорожденных и детей раннего возраста необходимо использование БКМ и ПЦР для исследования различных биологических жидкостей (кровь и моча). Серологические методы диагностики у недоношенных детей, родившихся с низкой и экстремально низкой массой тела, рекомендованы для уточнения фазы течения инфекции. Показана эффективность определения авидности анти-ЦМВ. Впервые при изучении динамики маркеров ЦМВИ у недоношенных новорожденных детей в течение первого года жизни доказана необходимость проведения неоднократного вирусологического обследования недоношенных новорожденных с низкой и экстремально низкой массой тела до года. У недоношенных детей, родившихся с низкой и экстремально низкой массой тела, с клиническими признаками врожденной инфекции обосновано использование Виферона с первых дней жизни. Применение Виферона у беременных со второго триместра беременности показало возможность более ранней антенатальной коррекции иммунопатологических состояний плода и отсутствие и/или снижение количества рецидивов ГВИ у беременных с ОАГА. Предложен новый современный метод диагностики аутопсийного материала и плацент – ПЦР in situ, позволяющий оценить количество внутриклеточной ДНК и тканевую тропность, что особенно важно в изучении патогенеза ЦМВИ. Сравнительная оценка различных методов лабораторной диагностики при анализе структуры перинатальной патологии и смерти способствует совершенствованию организации лабораторно-клинического обеспечения мониторинга перинатальных потерь, этиологически связанных с герпесвирусами, а также повышению достоверности оценки их роли в перинатальной патологии и разработке на их основе адекватных лечебных и профилактических мер по снижению удельного веса ВУИ. Внедрение результатов исследования в практику здравоохранения. Результаты работы стали основой ряда документов, применяющихся в практическом здравоохранении: Методические рекомендации «Быстрый культуральный метод диагностики герпесвирусных инфекций», Роспотребнадзор. - №02.030-08. – Москва, 2008. Методические рекомендации по использованию Виферона у недоношенных новорожденных с клиническими признаками ВУИ с первых дней жизни (2009, в печати). Практические рекомендации используются в работе отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных ГБ №8 КЗ г. Москвы и ДКБ №13 им. Филатова г. Москвы. Материалы диссертационной работы включены в курс лекций и практических занятий для студентов, клинических ординаторов и интернов кафедры клинической лабораторной диагностики РГМУ, кафедры неонатологии РГМУ, аспирантов и ординаторов НИИ педиатрии НЦЗД РАМН. Основные положения, выносимые на защиту.
|
Акушерство перечень практических занятий на 4 курсе лечебного факультета на II семестр Гипоксия плода. Задержка роста плода. Асфиксия новорожденного. Первичная реанимация в родильном зале. Гипоксия плода. Задержка роста... |
Акушерство перечень практических занятий на 4 курсе лечебного факультета на II семестр Плацентарная недостаточность; гипоксия плода, задержка роста плода. Асфиксия новорожденного. Первичная реанимация в родильном зале.... |
||
Документация об аукционе на проведение открытого аукциона по определению... По определению поставщика для поставки противовирусных и иммуномодулирующих средств |
Предварительное решение Панавир раствор для внутривенного введения 04 мг/мл в комплексной терапии хронической цитомегаловирусной инфекции в стадии обострения... |
||
Предварительное решение Панавир раствор для внутривенного введения 04 мг/мл в комплексной терапии хронической цитомегаловирусной инфекции в стадии обострения... |
Роль патологии сосков молочной железы в развитии маститов у коров при машинном доении |
||
02. 01. 04 «Сестринский уход при инфекционных болезнях с курсом вич-инфекции... Фонд оценочных средств пм 02. 01 Участие в лечебно-диагностическом и реабилитационном процессах |
Экзаменационные вопросы по клинической фармакологии фармацевтический факультет Клиническая фармакология противовирусных средств. Классификация. Особенности использования |
||
Техническое задание на выполнение работ по устройству ограждения... Акционерное общество «Научно-производственное объединение «Поиск» (ао «нпо «Поиск») |
Документация об аукционе на проведение открытого аукциона по определению... Лот №2 поставка противовирусных препаратов, препаратов крови, ненаркотических анальгетиков, нестероидных и прочих противовоспалительных... |
||
Алгоритмы поиска. Линейный поиск. Двоичный поиск Также, линейный поиск часто используется в виде линейных алгоритмов поиска максимума/минимума |
В учреждениях здравоохранения российской федерации В этой связи возрастает роль и значение функциональных методов исследования, которые широко применяются с целью раннего выявления... |
||
Отчет фгбу «гнц институт иммунологии» «Поиск и анализ новых биомаркеров с целью диагностики иммунологических и аллергических заболеваний» (шифр: «Диагностика-16») |
Теория и практика торговли Экономическая азбука Эмиссия или золотой стандарт Часть Критика Монетаристкой и Австрийской модели. Поиск новых решений |
||
Методические разработки по аудиторным занятиям утверждаю Тема: Грипп, парагрипп, аденовирусная, рс-, риновирусная инфекции: этиология, эпидемиология, патогенез, клиника, диагностика, осложнения,... |
Место и роль промышленного транспорта в транспортнои системе В экономике государства транспорт играет весьма важную роль, обеспечивая непрерывное перемещение предметов и средств труда между... |
Поиск |