Антимикробное и инсекто-акарицидное действие биоцида Агро-Велт и его применение на объектах ветнадзора

и циперметрина в процессе хранения образцов Агро-Велта Продолжительность хранения Образец № 1 Образец № 2 Образец № 3 ЧАС Циперметрин ЧАС Циперметрин ЧАС Циперметрин До постановки опыта 10,0 25,0 10,0 25,0 10,0 25,0 4 месяца 10,0 25,0 10,0 25,0 10,0 25,0 8 месяцев 10,0 25,0 10,0 25,0 10,0 25,0 12 месяцев 9,9 24,9 9,9 24,9 10,0 25,0 16 месяцев 9,8 24,8 9,9 24,9 9,89 24,9 Как следует из приведенных результатов, при хранении трех образцов Агро-Велта при температуре 40 0С в течение 480 суток (что соответствует 5 годам и 4 месяцам хранения средства при 20ºС) содержание в препарате клатрата ЧАС с карбамидом и циперметрина сохраняется в пределах нормы, регламентированной показателями качества в СТО на данное средство. Не выходили за пределы допускаемых интервалов также физико-химические параметры всех изученных образцов. Для определения стабильности рабочих эмульсий Агро-Велта при хранении и влия­ния условий хранения на бактерицидные свойства средства, образцы 2,0; 1,0; 0,5 и 0,2% эмульсий Агро-Велта закладывали на хранение в темном месте в стеклянных колбах, закры­тых герметично, при комнатной температуре, а также хранящихся при комнатной температуре без герметичной упаковки и при естественном освещении. Ежедневно, в течение 7 суток проводили иссле­дования внешнего вида образцов и определяли бактерицидную активность рабочих эмульсий Агро-Велта в соответствии с методическими указаниями «О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики» (1987). Было установлено, что у рабочих эмульсий Агро-Велта в концентрациях 2,0; 1,0; 0,5 и 0,2% при разных условиях хранения органолептические свойства не изменялись. Бактерицидная и инсектицидная активность образцов Агро-Велта, хранящихся при комнатной температуре без герметичной упаковки и при доступе света, не снижалась на протяжении всего эксперимента. Проведенные исследования гарантируют стабильность свойств концентрата Агро-Велта в течение не менее 5 лет, а рабочих эмульсий – в течение не менее 7 суток. Таким образом, биоцид Агро-Велт обладает важными технологическим свойствами, обуславливающими перспективность его применения для обеззараживания объектов ветнадзора и уничтожения насекомых и клещей - переносчиков возбудителей ТПОБ. Поверхностное натяжение рабочих эмульсий Агро-Велта больше чем у бидистиллированной воды на 0,01-0,04 мН/м, что свидетельствует о высокой проникающей способнсти средства. Величина краевого угла смачивания рабочих эмульсий Агро-Велта исключает необходимость использования поверхностно-активных веществ. Агро-Велт не обладает коррозионными свойствами; белковый индекс средства равен единице, что свидетельствует о том, что Агро-Велт можно использовать на объектах ветнадзора без предварительной их санитарной очистки. Рабочие эмульсии Агро-Велта сохраняют физико-химические и антибактериальные свойства после замерзания и оттаивания. Бактерицидное действие Агро-Велта сильнее бактерицидного действия фенола в 14 раз. 2.2.2. Определение антибактериальной и противогрибной активности Агро-Велта Целью данного этапа исследований являлось определение бактерицидных и фунгицидных концентраций рабочих эмульсий Агро-Велта в отношении бактерий и грибов. Для этого использовали тест-штаммы грамположительных, грамотрицательных, и спорообразующих бактерий, а также штаммы кандид, дерматофитов и плесневых грибов в концентрации 2 млрд. микробных клеток в 1 мл суспензии (по стандартам мутности). Для приготовления бактериальной взвеси суточные культуры тест-штаммов E.coli 12570, S.aureus 906, P. aeruginosa АТСС 27853 и S. typhimurium 11 засевали на скошенный МПА и выращивали в термостате при температуре 37°С в течение 24 часов. Тест-штамм C.albicans 15 культивировали в МПБ и на триптозо-соевом агаре в течение 48 ч, а T.gypseum НИИД и A.niger НИИД – на агаре Сабуро в течение 14 дней при температуре 29°С. Для получения споровой формы B.cereus 96 суточные бульонные культуры тест-штамма засевали на скошенный МПА в про­бирках. Пробирки в течение 48 часов выдерживали в термостате при 37°С, а затем 5-7 дней при комнатной температуре (10-18°С) в тем­ноте. По истечении указанного срока делали мазки из культуры бацилл, окрашивали их по Цилю-Нильсену и проверяли споро­образование под микроскопом. Рассматривали 10 полей зрения. В опыте использовали культуру бацилл, количество спор в которой составляло не менее 90%. Пробирки с микробными суспензиями до и вo время опыта хранили в стакане с тающим льдом. Приготовленные взвеси микроорганизмов каждого тест-штамма не содержали посторонней микрофлоры. Для приготовления батистовых тест-объектов кусок батиста пог­ружали на 24 часа в холодную водопроводную воду, затем его тща­тельно стирали с мылом, кипятили, сушили и гладили горячим утюгом. Приготовленную ткань разрезали на лоскуты размером 5x10 мм и по 50 штук раскладывали в чашки Петри. Чашки заворачивали в бумагу и стерилизовали в автоклаве 30 минут при 110° (0,5 атм). Для заражения тест-штаммами микроорганизмов стерильные батистовые тест-объекты (в коли­честве 50-100 шт. на каждый тест-штамм) в чашке Петри заливали 20 мл приготовленной взвеси микроорганизмов, равномерно смачивали все тест-объекты. Чашку Петри закрывали крышкой и оставляли тесты в микробной взвеси в течение 20 минут. Затем в асептических условиях батистовые тест-объекты, пропитанные культурой микроорганизмов, переносили на поверхность стерильной фильтровальной бумаги на дно чаш­ки Петри, покрывали их сверху стерильной бумагой и закрывали чашку Петри крышкой. Через 10 минут после удаления избытка жид­кости, для фиксации микроорганизмов на батистовых тест-объектах, последние переносили на поверхность сухой стерильной фильтроваль­ной бумаги в чашку Петри и сверху прикрывали стерильным лис­том фильтровальной бумаги, подсушивали в термостате при 37°С в течение 20 минут с приоткрытыми крышками. Рабочие эмульсии Агро-Велта готовили в стеклянных колбах путем добавления соответствующих количеств концентрата к водопроводной воде. Было приготовлено 11 разведений Агро-Велта в концентрациях от 0,02 до 2,0 %, которые использовались в экспериментах по определению бактерицидных и фунгицидных свойств средства. На первом этапе исследований бактерицидные и фунгицидные свойства Агро-Велта определяли ориентировочно в отношении культур тест-штаммов Е.coli 12570, S.typhimurium 11, P.aeruginosa АТСС 27853, S.aureus 906, C.albicans 15 и T.gypseum НИИД, выращенных на специальных питательных средах. Исследования проводили методом бумажных дисков с использованием плотных питательных сред МПА, Эндо и Сабуро (рис. 7-9). Рис. 7. Зоны торможения роста Е.coli 12570 и S. typhimurium 11 на агаре Эндо при использовании 0,05% концентрации рабочей эмульсии Агро-Велта Было установлено, что все изучаемые концентрации рабочих эмульсий Агро-Велта обладают бактерицидной и противогрибной активностью в отношении тест-штаммов микроорганизмов. При увеличении концентрации рабочей эмульсии Агро-Велта, которой смачивали бумажные диски, увеличивалась зона отсутствия роста тест-штамма микроорганизма. Рис.8. Зоны отсутствия роста P. aeruginosa АТСС 27853 и S.aureus на МПА при использовании 0,02% концентрации рабочей эмульсии Агро-Велта Рис. 9. Зоны отсутствия роста C.albicans 15 и T.gypseum НИИД на агаре Сабуро при использовании 1,0% концентрации рабочей эмульсии Агро-Велта Антимикробную активность Агро-Велта определяли ориентировочно и с использованием бульонных культур с высевом на плотные питательные среды. Для этого в каждую пробирку с различными концентрациями средства с интервалом 1 мин. вносили по 0,2 мл 2-миллиардной взвеси суточной культуры тест-штаммов микроорганизмов. После 10-минутной экспозиции с тем же интервалом стерильной бактериологической петлей брали пробы и переносили в пробирки с МПБ или на агар Сабуро. Через 30 мин., сохра­няя тот же интервал, вновь брали пробы и делали вторичный посев в МПБ и на агар Сабуро. Пробирки с бульоном ставили в термостат с температурой 37°С. Учет роста тест-культур проводили через 24 часа и окончательно - через 7 сут., учитывая рост микроорганизмов в бульоне и подсчитывая количество выросших колоний на МПА (КОЕ/мл). Чашки Петри с агаром Сабуро выращивали при температуре 29°С в течение 14 дней. Учитывали наличие или отсутствие роста кандид, дерматофитов и плесневых грибов. Одновременно с опытом ставили контроли: - I контроль – контроль жизнеспособности культуры (0,2 мл 2-милли-ардной взвеси тест-культуры вносили на 30 мин. в колбу с 10 мл дистиллированной воды с последующим высевом на МПБ или агар Сабуро, как и в опыте); - II контроль - контроль бактериостатического и фунгиостатического действия препарата (0,2 мл 2-миллиардной взвеси тест-культуры вносили в 10 мл основного (1:50) разведения препарата и тотчас делали петлей посев в МПБ или на агар Сабуро). Эффективной считали ту концентрацию средства, в которой была отмечена гибель тест-культуры при наличии ее роста в I контроле. С учетом результатов ориентировочного опыта прово­дили окончательное определение бактерицидного и фунгицидного разведения в опытах на батистовых тест-объектах. Параллельно пробиркам с различными концентрациями Агро-Велта в штативе устанавливали 2 ряда пробирок с универсальным нейтрализатором и с дистиллированной водой. В каждое разведение Агро-Велта с интервалом 1 мин. вносили по 4 тест-объекта, контаминированного взвесью микроорганизмов. Пробирки слегка покачивали до полного погружения тест-объектов в раствор. Через 10 минут с интервалом 1 мин. стерильной бак­териологической петлей извлекали по 2 тест-обьекта и переносили в пробирку с нейтрализатором на 5 мин и в пробирку с водой на 5 мин. После отмывания в воде тест-объекты, каждый в отдельности, переносили в пробирку с МПБ. Через 30 мин., сохраняя тот же интервал, извлекали остав­шиеся 2 тест-объекта, промывали их водой и делали вторичный посев на МПБ или агар Сабуро. Одновременно с опытом ставили контроль: - I контроль - контроль жизнеспособности культуры (контаминированные тест-объекты погружали на 30 мин. в дистиллированную воду, осторожно промывали в течение 10 мин. в свежей порции стерильной воды и засевали в МПБ или на агар Сабуро. - II контроль - для исключения бактериостатического и фунгиостатического действия и проверки полноты нейтрализации препарата 2 тест-объекта погружали в основное разведение препарата (1:50) и без экспозиции переносили в воду-нейтрали­затор. Затем отмывали в воде (5 мин.) и помещали в пробирки с МПБ или на агар Сабуро. Посевы инкубировали в термостате при 37°С. Учет результатов проводили через 24 часа (ориентировочно) и через 7 суток (окончательно). При наличии роста на МПБ делали подтверждающие посевы на МПА. Чашки Петри с агаром Сабуро также выращивали при температуре 29°С в течение 14 дней. Учитывали наличие или отсутствие роста кандид, дерматофитов и плесневых грибов. В случае отсутствия роста тест-культур во II контроле, что может свидетельствовать о бактериостатическом или моментальном бактерицидном действии, в последующих опытах для постановки контроля использовали Агро-Велт в разведении вдвое меньше бактерицидного разведения, найденного в первом опыте. Полученные данные приведены в табл. 10 и 11. Таблица 10. Антимикробная активность Агро-Велта в опыте на бульонных и агаровых культурах тест-штаммов микроорганизмов Тест-штамм микроорганизма Концентрация рабочей эмульсии , % Среднее количество бактерий после обработки, КОЕ/мл Эффективность, % 1 2 3 4 E.coli 12570 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 0 15,5±2,5 150,0±18,0 100 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 S.aureus 906 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 76±10 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 P.aeruginosa АТСС 27853 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 0 25,0±1,5 100±10,0 100 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 S.typhimurium 11 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 0 18,5±3,5 750,0±105,5 100 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 1 2 3 4 C.albicans 15 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 0 12,5±1,5 135±10,5 100 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 B.cereus 96 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 120±15 540±55 855±25 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 <100 T.gypseum НИИД 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 38,5±10,0 180,5±25,0 440,0±37,0 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 <100 A.niger НИИД 2,0 1,5 1,0 0,75 0,50 0,40 0,20 0,1 0,05 0,04 0,02 0 0 0 0 0 0 0 0 73,0±12,5 225,5±42,0 485,0±120,5 100 100 100 100 100 100 100 100 <100 <100 <100 Как следует из данных таблицы 10, бактерицидная активность Агро-Велта в отношении бульонной тест-культуры штамма S.aureus 906 составила 0,04%, в отношении тест-штаммов E.coli 12570, P. aeruginosa АТСС 27853, S. typhimurium 11 и C.albicans 15 – 0,05%, а в отношении тест-штаммов B.cereus 96, T.gypseum НИИД и A.niger НИИД - 0,1%. 0,02 0,04 0,05 0,1 Концентрация рабочих эмульсий Агро-Велта Рис. 10. Антимикробная активность рабочих эмульсий Агро-Велта Через 7 суток используемые в опыте тест-штаммы микроорганизмов не были выделены ни с одной обработанной Агро-Велтом бульонной культуры. С учетом результатов предыдущего опыта, отбросив неэффективные концентрации Агро-Велта для бульонных культур тест-штаммов микроорганизмов, батистовые тест-объекты обрабатывали Агро-Велтом в концентрациях 0,04; 0,05; 0,1 и 0,2%. Как следует из данных таблицы 11, бактерицидная активность Агро-Велта в опытах на батистовых тест-объектах была аналогична в опытах на бульонных культурах и составила: в отношении тест-штамма S.aureus 906 -0,04%, в отношении тест-штаммов E.coli 12570, P. aeruginosa АТСС 27853, S. typhimurium 11 и C.albicans 15 – 0,05%, Таблица 11. Антимикробная активность Агро-Велта в опыте

Похожие:

	Чувашской Республики «Агро-Инновации» Авторский коллектив: начальник отдела куп чр «Агро-Инновации» Фомин Г. Н., консультанты куп чр «Агро-Инновации» Любаев А. В., Сумков...		Чувашской Республики «Агро-Инновации» Авторский коллектив: начальник отдела куп чр «Агро-Инновации» Фомин Г. Н., консультант куп чр «Агро-Инновации» Любаев А. В
	Инструкция по сборке и основам эксплуатации деревянных домов СкандиТек Общие положения Рд является основой для профессионального производства строительно-монтажных работ. Отклонения от рд допускается только по письменному...		Введена в действие На объектах нефтегазодобычи, нефтегазопереработки и нефтепродуктообеспечения компании
	Административный регламент Федеральной службы по экологическому,... Москва "Об утверждении Административного регламента Федеральной службы по экологическому, технологическому и атомному надзору по...		Москва В пункте 5 слова "на производственных объектах, объектах, на которых" заменить словами "на производственных и складских объектах,...
	Утвержден и введен в действие решение Производство строительно-монтажных работ на объектах инфраструктуры железнодорожного транспорта		Отчёт о состоянии регулирующей деятельности и безопасности на поднадзорных... Производство, хранение и применение взрывчатых материалов промышленного назначения и средств инициирования
	Отчёт о состоянии регулирующей деятельности и безопасности на поднадзорных... Производство, хранение и применение взрывчатых материалов промышленного назначения и средств инициирования		3. На какой из приведенных сосудов, работающих под давлением свыше... Б 24. Эксплуатация медицинских и водолазных барокамер на опасных производственных объектах
	1 Экскаватор гидравлический на базе грузового автомобиля типа uds-214 шт. 2 Возможна замена любой единицы на модель с аналогичными характеристиками и надежностью, технические устройства должны иметь разрешение...		Инструкция №11- 09/13 по применению средства инсекто-родентицидного «медирэт-комби» Помимо этих дв в состав средства входят вспомогательные вещества – битрекс (горечь), растительное масло, краситель, функциональные...
	1. 2 Проект и его признаки 9 Совершенствование технологии проектирования на объектах гражданского строительства 79		3. Технические характеристики Тележка (кузов 1000х800х350) к мотоблокам "нева" мб-2,мб-1, «салют», «агро», «ока»
	Фармако токсикологические свойства минерал сорбента сорби и его применение...		Инструкция по приведению в действие огнетушителя оу-5 и тактическим... Переносной углекислотный огнетушитель оу-5 предназначен для тушения возгорания (пожара в начальной стадии его развития) площадь которого...