Разработка и стандартизация Таблеток секстафаг ®
|
Скачать 403.28 Kb.
|
|
На правах рукописи КОВЯЗИНА НАТАЛЬЯ АНАТОЛЬЕВНАРазработка и стандартизация Таблеток секстафаг®15.00.01 – технология лекарств и организация фармацевтического дела АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2009 Диссертационная работа выполнена в Государственном общеобразовательном учреждении высшего профессионального образования «Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».
Защита состоится «15» сентября 2009 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 208.068.01. при ГОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 614000, г. Пермь, ул. Ленина, 48, e-mail: perm@pfa.ru. факс: 2-12-94-76 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пермской государственной фармацевтической академии по адресу: 614070, г. Пермь, ул. Крупской, 46. Автореферат разослан « » 2009г. У  ченый секретарь диссертационного совета,кандидат фармацевтических наук, доцент Липатникова И.А. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Лечение заболеваний инфекционной природы является одной из центральных задач современной медицины и представляет существенную проблему как с клинических, так и с эпидемиологических позиций. К числу наиболее часто встречающихся заболеваний относятся инфекции, вызванные условно патогенными микроорганизмами, в том числе Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus spp. Традиционными препаратами этиотропной терапии гнойно-воспалительных заболеваний являются антибиотики. Однако применение антибиотиков сопряжено не только с гибелью патогенных агентов, поддерживающих инфекционный процесс, но и с нарушением жизнедеятельности организма - поражение органов и функциональных систем (Трапезов Е.В. и др., 1990; Кушнарева Н.В., 2000). Вопрос об успешной профилактике и терапии гнойно-септических инфекций приобретает чрезвычайную актуальность в условиях формирования полирезистентности микроорганизмов к антибиотикам (Коленчукова О.А., 2007; Орлова Т.И. и др., 2007; Потапов А.С., 2008). В связи c этим интенсифицируются исследования по совершенствованию и разработке альтернативных методов лечения, в том числе и фаготерапии. Основными достоинствами препаратов бактериофагов являются: высокая чувствительность к ним патогенной микрофлоры, сочетаемость со всеми видами традиционной антибактериальной терапии, отсутствие противопоказаний к применению (Лазарева Е.Б., 2003; Ворошилова Н.Н. и др., 2008). Распространенными формами выпуска препаратов бактериофагов являются жидкие лекарственные формы и таблетированные с кислотоустойчивой оболочкой. Известны желудочно-резистентные (кишечно-растворимые) таблетки бактериофагов без оболочки с пектиновой защитой, пригодные только для стабильных видов монобактериофагов кишечной группы (дизентерийный, брюшнотифозный и сальмонеллезный). В условиях смешанных инфекций, вызванных условно патогенными микроорганизмами, наиболее целесообразна и актуальна разработка лекарственных форм на основе поливалентных комплексных бактериофагов (Рафиев Х.Л., 2001; Хайруллин И.Н., 2003). Цель и задачи исследования. Целью работы явилось создание таблеток комплексного препарата Секстафаг® (Пиобактериофаг поливалентный). Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Научная новизна работы. Впервые разработан оригинальный состав и технология желудочно-резистентных таблеток без оболочки комплексного препарата Секстафаг®. Определены оптимальные технологические параметры производства таблетированной лекарственной формы секстафага, обеспечивающие высокие показатели фармацевтической доступности. Изучены сохранение литической активности сухого остатка жидкого, маточного и концентрированного секстафага в процессе хранения и стабильность таблетированного препарата при различных температурных режимах. Исследования «in vitro» показали, что таблетированный секстафаг обладает большей кислотоустойчивостью в желудочном соке, чем жидкий препарат. Результаты изучения фармакокинетики жидкого и таблетированного препаратов Секстафаг® при пероральном пути введения выявили преимущества таблетированной лекарственной формы. В эксперименте на животных установлено, что таблетки Секстафаг® не токсичны. Практическая значимость. Полученные данные расширяют представления о методологических подходах к конструированию фаговых препаратов. На основании разработанного состава и технологии желудочно-резистентных таблеток Секстафаг® без оболочки на базе лаборатории биорегуляторов ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ «Пермское НПО «Биомед» (далее НПО «Биомед») в соответствии с лабораторным регламентом (утвержден 20 февраля 2009 г.) проведена апробация технологии получения таблеток Секстафаг®. В экспериментально-производственных условиях получены три серии таблеток количество каждой серии по 800 штук (акт апробации от 20 марта 2009 г.). В отделении биологического и технологического контроля НПО «Биомед» проведен контроль качества полученных серий препарата согласно проекту ФСП. Установлено полное соответствие показателей качества кишечно-растворимых таблеток Секстафаг® требованиям проекта ФСП Секстафаг® таблетки. Установлена рациональность и воспроизводимость предложенной технологии и возможность её использования в промышленных условиях. Положения, выносимые на защиту.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на Российской научно-практической конференции «Достижения и перспективы в области создания новых лекарственных средств» (Пермь, 2007); XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2008); Российской научно-практической конференции «Фармация и общественное здоровье» (Екатеринбург, 2008); Всероссийской научно-практической конференции «Создание и перспективы применения медицинских иммунобиологических препаратов» (Пермь, 2008); Российской научно-практической конференции «Современное состояние и пути оптимизации лекарственного обеспечения населения» (Пермь, 2008); на заседаниях ученого совета и производственных совещаниях ФГУП «НПО Микроген» МЗ РФ «Пермское НПО «Биомед» (2007-2009г.г.). Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», (номер государственной регистрации: 01.9.50 007426). Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 2 публикации в журналах, рекомендуемых ВАК. Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 151 странице компьютерного текста, содержит 28 таблиц и 24 рисунка. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, двух глав эспериментальных исследований, выводов, списка использованной литературы и приложения. Библиографический указатель включает 197 источников, из которых 24 иностранных. Во введении изложены актуальность, цель и задачи исследования, научная новизна и практическая значимость работы. В первой главе представлен обзор литературы по теме диссертации, включающий историю открытия бактериофагов, их морфологию, состав и свойства. Приведены этапы взаимодействия бактериофага с бактериальной клеткой и устойчивость фагов к факторам воздействия. Представлены данные о фаготерапии, ассортименте лекарственных форм препаратов бактериофагов и технологические возможности их создания. Вторая глава посвящена характеристике объектов и методов исследования. В третьей главе приводятся данные по разработке оригинального состава и технологии желудочно-резистентных таблеток Секстафаг®. Определены технологические параметры таблетирования. Изучена стабильность таблетированного препарата при различных температурных режимах хранения. В четвертой главе представлены результаты изучения острой токсичности и сравнительной фармакокинетики жидкого и таблетированного препаратов Секстафаг®. В приложении представлены материалы, подтверждающие практическую значимость проведенных исследований: проект ФСП и лабораторный регламент на производство таблеток Секстафаг® (Пиобактериофаг поливалентный); акт апробации производства таблеток Секстафаг®. ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Секстафаг представляет собой смесь шести очищенных бактериофагов: стафилококкового, стрептококкового, клебсиеллезного, синегнойного, коли и протейного. В работе использован маточный секстафаг; концентрированный в 100 раз секстафаг; препарат Секстафаг® (пиобактериофаг поливалентный очищенный жидкий) – регламент производства № 04862997, ФСП 42 – 0504674405 (НПО «Биомед»). В качестве вспомогательных веществ использованы: аэросил, глюкоза, кальция глюконат, кальция карбонат, кальция фосфат двузамещенный, лактоза, магния карбонат основной, магния стеарат, маннит, метилцеллюлоза марки 16 и 35, микрокристаллическая целлюлоза, натрия альгинат, натрий-карбоксиметил-целлюлоза, пектин яблочный импортный и отечественный, полифепан (лигнин гидролизный), сахароза, сорбит пищевой, разрешенные к применению в медицине и отвечающие требованиям соответствующей нормативной документации. Эксперименты по изучению острой токсичности и фармакокинетики проводили на лабораторных животных – белых мышах (230 особей). Технологические свойства материалов, гранулята и таблеток изучали по известным общепринятым методикам. Микробиологические и биологические методы контроля проводили в отделении бактериофагов НПО «Биомед». Диапазон и степень литической активности бактериофагов определяли методом Аппельмана на питательном бульоне для культивирования микроорганизмов (ФС 42-0049-00). Учет вели в титрах, вызывающих полный лизис бактериальной культуры и в процентах, сопоставляя суммарное количество баллов в опытной и контрольной пробах вычисляли процент сохранения активности отдельных фагов и их среднее значение по секстафагу. Для контроля литической активности бактериофагов использованы производственные штаммы Staphylococcus aureus; Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiaе, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium; Klebsiella pneumoniae; Pseudomonas aeruginosa; Escherichia coli разных серо- групп; Proteus mirabilis, Proteus vulgaris. Определение микробиологической чистоты проводили в соответствии с ГФ XII изд., часть 1. Острую токсичность изучали в соответствии с рекомендациями «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Хабриев Р.У., 2005) и санитарных правил СП 3.3.2.561-96 «Государственные испытания и регистрация новых медицинских иммунобиологических препаратов». Белым мышам массой 20-25 г вводили однократно перорально таблетки Секстафаг® в виде суспензии в объеме 0,5 мл в количествах, эквивалентных 10, 100 и 300 дозам для человека. Контрольные животные получали эквиобъемное количество растворителя, суспензию таблеток-плацебо 300 доз и жидкий Секстафаг®. После введения препаратов наблюдали за животными в течение 14 суток. Ежедневной регистрации подлежали: гибель животных, их внешний вид, поведение, активность, наличие клинических симптомов интоксикации, динамика массы. У всех животных опытных и контрольных групп через 1, 7 и 14 сутки эксперимента после эвтаназии хлороформом проведена некропсия и макроскопическое исследование внутренних органов, динамика их массы (тимус, легкие, сердце, печень, селезенка, почки) в сравнении с внутренними органами животных из контрольных групп. Фармакокинетику таблетированного и жидкого Секстафага® изучали на белых мышах после однократного перорального введения препарата в количестве, эквивалентном 10 дозам для человека. Клинический материал (моча и кал), собранный до перорального введения препаратов, а также через каждый час до интервала 9 часов, после 24, 30, 48 и 72 часов (всего 14 интервалов), разводили в питательном бульоне и обрабатывали хлороформом (Габрилович И.М., 1968). В пробах крови отделяли сыворотку от плазмы. Пробы наносили на газон тест-культуры соответствующего микроорганизма. По числу колоний фагов определяли временные промежутки обнаружения бактериофагов при их выведении. Статистическую обработку результатов проводили по методике ГФ ХI изд. вып.1. Статистическую значимость различий между группами оценивали с использованием t-критерия Стьюдента, с использованием программы Excel. Разработка состава таблеток Секстафаг® При разработке таблеток Секстафаг® параметры планировали таким образом, чтобы одна доза соответствовала 20 мл жидкого препарата. Для достижения наилучшего технологического результата в качестве субстанции использовали концентрированный в 100 раз секстафаг, активность которого составляла не ниже 10-6,5, сухой остаток - 2,5%. Исследована стабильность вакуумно высушенного остатка бактериофага. Наиболее лабильны при сушке стрептококковый и стафилококковый фаги. После 1 месяца хранения усредненная активность компонентов снизилась в 1,5 раза, через 3 месяца – в 2,5, при этом стафилококовый фаг полностью инактивировался. После одного года хранения устойчивым оказался только клебсиеллезный фаг (табл. 1). Т  аблица 1Стабильность вакуумно высушенного сухого остатка концентрированного секстафага в процессе хранения
|
||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 |
1. Аспаркам Аспаркам имеет в своем составе калий и магний в форме,... Как правило, этот препарат выпускают в виде таблеток, порядок употребления и дозировку можно найти в инструкции. Прием таблеток должен... |
|
Учебно-методический комплекс дисциплины «разработка и стандартизация... Рабочая программа составлена на основании типовой программы гос впо и авторских разработок. Номер государственной регистрации 774... |
|
«Разработка и стандартизация программных средств и информационных технологий» Целью подготовки студентов по дисциплине является формирование целостной системы знаний о принципах, моделях и методах, используемых... |
|
Руководство по изучению дисциплины «Метрология, стандартизация и сертификация» «Метрология, стандартизация и сертификация» является базой при подготовке инженеров электротехнического профиля и должна формировать... |
|
Комплект контрольно-оценочных средств по учебной дисциплине Метрология,... Федерального государственного образовательного стандарта среднего профессионального образования по специальности «Теплоснабжение... |
|
Методические указания к выполнению практических и лабораторных работ... Стандартом начального профессионального образования по специальности 260807 «Технология продукции общественного питания», утвержденным... |
 |
Стандарт организации Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. №184-фз «О техническом регулировании», а правила разработки и оформления — гост р 0—2004... |
|
Настоящий проект стандарта не подлежит применению «Стандартизация» Федерального закона от 27 декабря 2002 года №184 «О техническом регулировании», правила разработки и структура комплекса... |
|
Исо 2553 201 сварные и паяные швы условное обозначение на чертежах ( iso 2553: 2013, idt ) Российской Федерации установлены гост р 0-2012 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения» и гост р 2-2014 «Стандартизация... |
|
Рабочая программа учебной дисциплины оп. 05. Метрология, стандартизация... Федерального государственного образовательного стандарта среднего профессионального образования по 23. 02. 07 Техническое обслуживание... |
|
Исо 17662 201 Сварка калибровка, верификация и валидация оборудования... По государственной стандартизации в Российской Федерации установлены гост р 0-2012 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные... |
|
Инструкция по применению дезинфицирующего средства «абсолюцид окси» Средство хорошо растворимо в воде, водные растворы прозрачные, бесцветные, не имеют резкого запаха. Средство в форме таблеток выпускается... |
|
Департамент государственного заказа и торговли ямало-ненецкого автономного округа Мнн «Ацетазоламид» в Государственном реестре лекарственных средств зарегистрирован под торговым наименованием «Диакарб», согласно... |
|
Техническое задание наименование услуги Оказание услуги по разработке... Разработка автоматизированной функциональности по учету договоров комиссии и агентских договоров. Разработка автоматизированной функциональности... |
|
Методическая разработка занятия по учебной дисциплине «Английский язык» Методическая разработка предназначена для преподавателей иностранного языка профессиональных образовательных учреждений |
|
2) Какое количество заявок (кратность и сроки поставок ежемесячно,... Заказчику количества таблеток покрытых пленочной оболочкой (или увеличенное количество кратное упаковке) не менее запрошенного по... |