Практикум по птицеводству издание второе, дополненное
|
Скачать 4.83 Mb.
|
Занятие 8Искусственное осеменение сельскохозяйственной птицы.Цель занятия- Освоить методики получения спермы, оценки спермы по основным параметрам её качества, осеменения самок сельскохозяйственной птицы. Тема рассчитана на несколько академических занятий. Искусственное осеменение является необходимым элементом технологии промышленного птицеводства. Оно позволяет в 6-10 раз сократить потребность в самцах, широко использовать только лучших самцов, проверенных по качеству потомства, а проверку их племенных качеств проводить в более сжатые сроки и более достоверно. В индейководстве этот метод позволяет избежать травмирования самок, поскольку самцы имеют очень большую массу. В отличие от сперматозоидов млекопитающих сперматозоиды птиц, попадая в яйцевод самок после спаривания или искусственного осеменения, в течение длительного времени сохраняют способность к оплодотворению, У кур оплодотворенные яйца возможно получать спустя 25-35 дней после отсадки петухов, у индеек отмечены случаи снесения отдельных оплодотворенных яиц в течение 60-72 дней после однократного спаривания, у гусынь и уток - 8-17 дней. Попавшие в яйцевод спермии продвигаются как за счет собственных винтообразных поступательных движений, так и в результате колебания ресничек мерцательного эпителия слизистой оболочки и сокращения мышц стенок яйцевода. Скорость собственных поступательных движений сперматозоидов в среднем равна 1,5 - 2 мм в минуту. Сперматозоиды быстро проходят вверх по яйцеводу, большинство из них сразу оседает в трубчатых железах слизистой оболочки маточно-влагалищного сочленения. Небольшая часть их остается в железах шеечной части воронки яйцевода, а оставшиеся в просвете яйцевода спермии мигрируют обратно к шейке матки. Крипты в слизистой маточно-влагалищного сочленения являются основным местом хранения сперматозоидов, отсюда они постепенно выходят в просвет яйцевода, и поднимаются в верхнюю его часть для оплодотворения яйцеклеток. Крипты в слизистой нижней части воронки яйцевода – место временного хранения сперматозоидов. У кур через 1-2 часа после спаривания сперматозоиды обнаруживались во влагалище, через 5 часов - в матке и перешейке, через 72-75 часов - в воронке яйцевода. В воронке происходит встреча половых клеток и оплодотворение яйцеклеток. В норме яйцеклетки кур могут быть оплодотворены примерно через 20-25 минут после овуляции. Если в течение этого времени не произойдет встреча яйцеклетки со сперматозоидами, она утрачивает способность к оплодотворению. При оплодотворении в яйцеклетку кур одновременно могут проникать до 60 спермиев, однако с ядром яйцеклетки сливается ядро только одного сперматозоида, остальные ассимилируются цитоплазмой яйцеклетки. Деление зиготы начинается при поступлении ее в перешеек яйцевода примерно через 5 часов после овуляции. При снесении оплодотворенного яйца зародыш, как правило, находится в начальной стадии гаструлы. Получение спермы Для получения спермы отбирают петухов от высокопродуктивных родителей. Петухи должны быть крепкой конституции, с хорошо развитым гребнем, поскольку этот признак высоко коррелирует с качеством спермы. Отбор петушков для искусственного осеменения проводят в три этапа: первый отбор в 60-70-дневном возрасте, второй - в 90-100 дней для яичных и в 11O-120 дней для мясо-яинных пород и окончательный - в 7 месяцев и 7,5-8 месяцев соответственно. Основное требование при отборе " хорший" ответ на массаж. Оставляют самцов, реагирующих на массаж выворачиванием клоаки, эрекцией копулятивного органа и выделением спермы хорошего качества. Норматив окончательного отбора - один петух на 35-40 искусственно осеменяемых кур. Предварительно петухов тренируют для выработки рефлекса выделения спермы в ответ на массаж. Три - пять тренировок, как правило, достаточны. У петухов, индюков и цесарей копулятивный орган представляет собой пещеристое тело, расположенное в клоаке возле расширенной части спермопровода. При половом возбуждении оно набухает, во время спаривания самец прижимает свою клоаку к клоаке самки, сперма поступает в выпячиващееся влагалище. У гусаков и селезней половой член состоит из двух фиброзных тел, при эрекции набухающих и образующих продольный желоб, по которому сперма поступает во 'влагалище самки. При покое половой член расположен в полости клоаки, при возбуждении выводится из нее сокращением специальных мышц. При получении спермы для искусственного осеменения наиболее распространен метод массажа, предложенный в 1939 г. Барроусом и Квинном. При этом методе один из операторов левой рукой берет петуха за обе голени и держит его так, чтобы он находился под левой рукой головой к спине техника. Правой рукой оператор делает легкий, но интенсивный двухсторонний массаж по направлению от киля вдоль лонных костей к хвостовой части. Другой человек большим и указательным пальцами слегка нажимает с обеих сторон на клоаку, после чего следует эрекция пещеристого тела и овуляция. Если работает только один оператор, у петухов подстригают все перья возле клоаки и перья, опускающиеся возле хвоста вниз. Надев фартук, оператор садится на стул и держит петуха головой налево, зажав коленями обе его ноги. Между указательным, средним и безымянным пальцами правой руки оператор держит спермоприемник, а большим пальцем и мизинцем движением от киля к хвосту массирует нижнюю часть живота, одновременно левой рукой поглаживая поясничную область спины от груди к хвосту. Когда, реагируя на массаж, петух поднимает хвост, оператор большим и указательным пальцем левой руки производит легкий массаж задней части живота петуха. При эрекции копулятивного органа сжимает клоаку пальцами левой руки и собирает сперму в спермоприемник. Сперму удобно получать в двухстенный градуированный спермоприемник. Между его стенками наливают воду, нагретую до +41 °С. После получения спермы спермоприемник закрывают пробкой или ватой. Получают сперму у петухов через день по 1-2 эякулята (второй эакулят берут только в том случае, если первого было недостаточно). У индюков сперму можно также получать с помощью массажа по Барроусу и Квинну. Однако, наиболее перспективным считается аска-нийский метод, разработанный М.М. Асланяном и другими сотрудниками УНИИЖ "Аскания-Нова". Для естественного возбуждения индюка используется индейка, фиксируемая металлическим сетчатым щитком в яйцевидном углублении на площадке специального станка. Щиток выполняется в форме округло изогнутого прямоугольника и предотвращает травмирование самки во время проявления рефлекса топтания. При возбуждении индюка и попытках его к спариванию оператор слегка поглаживает мягкую часть живота или вокруг клоаки. В момент эрекции оператор большим и указательным пальцами левой руки надавливает на кольцо клоаки, в правой руке держит спермоприемник, в который собирает сперму. Для получения спермы у гусаков наилучшим следует считать метод, усовершенствованный сотрудниками ВНИИРГЖ. Сидящий на табурете помощник оператора фиксирует гусака на коленях головой по левую руку, а правой придерживает хвост и крылья. Оператор, сидящий на более низком табурете, левой рукой 5-10 секунд массирует в нижней части живота около клоаки, а правой рукой прижимает теплый (+35 ... +40°С ) спермоприемник к клоаке. Затем указательным пальцем левой руки надавливает на клоаку сверху, выводя пенис в спермоприемник, куда и стекает сперма. Спермоприемник имеет в высоту 90 мм и внутренний диаметр 35 мм. Получение спермы у селезней наиболее удобно и просто так же с помощью массажа. Оператор, сидя на табурете, кладет селезня себе на колени под левую руку. Сидящий с правой стороны помощник фиксирует селезня, держа его левой рукой за обе ноги. Ладонью левой руки оператор умеренно надавливает на спину самца и в течение 5-8 секунд проводит массаж от основания крыльев к хвосту, делая 4-5 движений рукой по спине. Пальцами правой руки захватывает кольцо клоаки снизу, ритмично сдавливает его, выводя пенис наружу. Это приводит к эрекции и эакуляции. Сперма собирается в пневматический спермоприемник. У цесарей сперму получают также как и у селезней. К получению спермы приступают на третий день после отсадки самцов от самок и повторяют через каждые 2-3 дня. У перепелов массаж также является основным методом получения спермы. Оператор держит самца ладонью правой руки за грудь и отводит хвост. Большим и указательным пальцами левой руки выдавливает и сбрасывает пенообразный секрет клоачных желез, затем снова указательным и большим пальцами массирует от спины к хвосту. Указательным и средним пальцами правой руки одновременно делает массаж абдомипальной части. При появлении спермы помощник оператора собирает ее пипеткой или малогабаритным спермособирателем. Сперма перепела имеет кремово-белый цвет. Оценка спермы по основным параметрам Внешний вид. Используют только чистую сперму мелочно-белого и слегка желтоватого цвета, без примеси крови или помета, сливкообразной консистенции. При наличии примеси крови сперма имеет розовый цвет, с примесью помета - желтовато-коричневый; наличие белых хлопьев свидетельствует о присутствии в сперме мочи. Объем эякулята определяется в градуированном спермоприемнике или, при его отсутствии, градуированной пипеткой на 1-2 мл. Объем эякулята у птиц разных видов несколько различен, его минимальные значения приведены в таблице 12 Если самцы имеют очень высокую племенную ценность, допускается использование спермы с показателями ниже указанных не более, чем на 30%. Таблица 12 Минимально допустимые значения объема эякулята и концентрации спермиев
Активность спермиев. Для определения активности (подвижности) спермиев наносят каплю спермы на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и помещают под микроскоп на обогреваемом столике с температурой +42 ...+41°С. Сперма должна быть равномерно распределена под покровным стеклом без пустот и пузырьков воздуха. Просматривают препарат под малым увеличением (в 300 раз) при слегка затемненном поле зрения, регулируя его конденсором диафрагмой и осветительным зеркалом. Активность спермиев определяют по десятибалльной шкале: каждые 10% спермиев с поступательным прямолинейным движением оцениваются одним баллом; если более 90% спермиев имеют поступательные движения, ставят 10 баллов; до 90% - 9 баллов; до 80% - 8 баллов и т.д. Для оценки состояния спермы вне десятибальной шкалы применяются следующие обозначения: "Е" - (единичное) - один спермий с поступательным прямолинейным движением приходится на несколько десятков спермиев с колебательными, манежными движениями или неподвижных; "К" – (колебательное) – спермии конвульсивно вздрагивают, слабые движения хвоста не приводят к поступательному движению; "М" - (манежное) - спермии вращаются вокруг своей головки или по небольшому кругу. "Н" -(некроспермия) - все спермин мертвы; "А" - (азооспермия) - в сперме полное отсутствие спермиев; Густота спермы. Оценка по густоте проводится одновременно с оценкой активности. Оценивается на обогреваемом столике в капле спермы, нанесенной на предметное стекло и покрытой покровным стеклом . Сперму считают густой (Г) , когда все поле зрения микроскопа заполнено спермиями, что соответствует концентрации от 4 до 6 млрд/мл. В средней по густоте сперме (С) между спермиями на препарате имеются промежутки, число спермиев колеблется от 2 до 4 млрд/мл. В редкой (Р) сперме пространство между отдельными спермиями превышает их длину, концентрация спермиев равна 0,5-2 мдрд/мл. Для осеменения непригодна. Для осеменения можно использовать только густую и среднюю по густоте спермы при активности 7 баллов и более. Определение концентрации спермиев. Концентрация спермиев или насыщенность спермы половыми клетками, выражается количеством спермиев в миллиардах на I мл спермы. Концентрация спермиев определяется подсчетом в счетной камере Горяева или с помощью фотоэлектрокало-риметра или с использованием центрифуги. На занятии проводится подсчет в счетной камере Горяева., которую предварительно протирают смесью спирта и эфира и высушивают. В эритроцитарный меланжер набирают сперму до деления 0,5 затем дополнительно набирают 3% раствор хлористого натрия до деления 101. Зажав оба. конца меланжера большим и указательным пальцами, встряхивают его в течении 30 секунд. Затем выпускают из смесителя 3-4 капли для удаления несмешанного со спермой раствора. Притирают к камере Горяева, шлифованное покровное стекло и под него наносят одну каплю смеси из меланжера. Устанавливают камеру под микроскоп. Подсчет наиболее удобно вести при увеличении в 400 раз (объектив 40, окуляр 10). Считают число спермиев в пяти больших квадратах (или 80 малых) по диагонали сетки. Учитываются только головки спермиев, находящиеся в данном квадрате полностью или на 3/4 их площади. Число спермиев, подсчитанных в пяти больших квадратах, в сумме составляет величину "h", концентрация "С" рассчитывается по формуле:  ,Оценка по интенсивности дыхания или редукции метиленовой сини. Интенсивность дыхания спермиев является их наиболее важным жизненным процессом. Продолжительность обесцвечивания 0,01 %-ного раствора метиленовой сини зависит от концентрации спермиев и интенсивности их дыхания; чем активнее поглощается кислород, тем быстрее наступает обесцвечивание сини, тем лучше выживаемость и оплодотворяющая способность спермиев. Сперма хорошего качества быстро обесцвечивает раствор метиленовой сини (петухов за 3-4 мин., индюков - за 4-5 , гусаков - за 7-9 мин., селезней - за 3-7 мин.). На предметное стекло наносят каплю свежей неразбавленной спермы и каплю 0,01 %-ого раствора метиленовой сини. Обе капли смешивают стеклянной трубочкой (внутренний диаметр 0,8-1 мм), затем насасывают смесь в трубочку так, чтобы столбик ее был длиной около 2 см. Кладут трубочку на лист белой бумаги при температуре +18...+20°С и по часам отмечают время обесцвечивания сини. Обычно метиленовая синь обесцвеаивается в середине столбика, на концах его могут оставаться голубые кольца. Подсчет живых и мертвых спермиев. Метод основан на том, что живые спермии не окрашиваются красителями, тогда как мертвые и ослабленные окрашиваются. Применяется 1,8%-ный раствор краски трилана голубого на фосфатном буфере или 5% раствор эозина. В небольшой стеклянной трубочке смешивают каплю свежеполученной спермы и 0,5 мл раствора краски, каплю смеси наносят на предметное стекло и делают мазок. Через 10 минут головки мертвых спермиев частично или полностью окрашиваются в цвет красителя. Подсчитываются всего 400-500 спермиев (по 100 на концах препарата). Рассчитывается процент живых спермиев по формуле:  ,где V - процент живых спермиев;  - количество живых спермиев в подсчете; Г - всего подсчитано спермиев.Чем ниже процент мертвых спермиев, тем выше оплодотворяющая способность спермы. Подсчет патологических форм спермиев. Наличие в сперме патологических (уродливых) форм спермиев выше допустимых норм называется тератоспермией. У птиц различают следующие патологические формы: - акросома крючкообразная, набухшая или она отсутствует; - головка вакуолизирована, раздвоена или увеличена; - шейка нитевидная, изогнутая или вздутая; - хвост сдвинут или отсутствует; Наиболее низка оплодотворяющая способность спермы при наличии спермиев, с изогнутыми шейками. Во флаконе в 0,9%-ном растворе хлористого натрия разбавляют пробу спермы в 20-30 раз. Наносят каплю разбавленной спермы на предметное стекло и шлифованным стеклом делают тонкий мазок. Высушенный мазок ставят на стеклянную подставку, фиксируют на 1-2 минуты спиртом,который затем смывается дистиллированной водой. Покрыв мазок полоской фильтровальной бумаги, наливают на нее краску фуксин или 1%-й раствор метиленовой сини на 3-5 минут. Смывают краску дистиллированной водой и высушивают мазок на воздухе. В разных частях препарата подсчитывают всего не менее 500 спермиев, отмечая отдельно нормальные и патологические формы. Подсчитывают процент патологических форм по формуле:  ,где М - процент патологических форм спермиев; Р - число подсчитанных патологических форм спермиев; Г - общее число спермиев, подсчитанных в препарате. Разбавление спермы В отличие от млекопитающих спермии птиц во внешней среде при плюсовых температурах быстро теряют оплодотворяющую способность. В целях повышения длительности сохранения спермиями их оплодотворяющей способности применяются разбавители . В средах ИГГКФ и С-2 сперму петухов можно хранить до 2-х суток. Среда ВНИИРГЖ -2, используемая для хранения спермы в течении 1-2 часов, включает в расчете на 100 доз следующие компоненты: глутамат натрия - 0,07 г, глюкоза или фруктоза - 0,45 г, вода дистиллированная - 2,5 мл. Входящие в состав среды вещества должны, не нарушая энергетические процессы в спермиях, сохранять в сперме осмотическое давление, уровень кислотности, нейтрализовать вредные воздействия продуктов жизнедеятельности спермиев, иметь бактерицидное действие. Сперму разбавляют сразу после ее получения. Для этого в спермоприемник наливают небольшое количество разбавителя из расчета того, чтобы соотношение спермы и разбавителя было оптимальным; при разбавлении спермы следует иметь в виду , что количество сперматозоидов, вводимое в половой тракт самки , должно обеспечить нормальное оплодотворение яйцеклеток. Для этого курам необходимо однократно вводить от 50 до 100 млн. сперматозоидов. Осеменение кур. Осеменение проводят во вторую половину дня, когда большая часть кур снесла яйца. Осеменяют кур свежей неразбавленной спермой в течение первых 10-20 минут после ее получения. Однократная доза осеменения неразбавленной спермой 0,025 мл - при концентрации спермиев 3-3,5 млрд/мл в такой дозе содержится около 80 млн. спермиев. При первом осеменении курицы для обеспечения насыщения половых путей необходимым числом спермиев вводят удвоенную дозу спермы. При использовании однократной дозы через день осеменение повторяют. В дальнейшем курицу осеменяют каждые пять дней. Яйца для инкубации можно собирать через 48 часов после первого осеменения. Техника осеменения состоит в следующем. При клеточном содержании оператор открывает дверцу клетки и фиксирует курицу, не вынимая ее из клетки; правой рукой он надавливает на левую сторону живота в области между задним концом киля и лонными костями. Происходит раскрытие клоаки, внутри нее левее выхода прямой кишки виден вход во влагалище яйцевода, представляющий собой розоватое выпячивание. Другой оператор набрав в микропипетку дозу спермы, вводит пипетку в яйцевод на глубину 2-3 см и впрыскивает сперму. Одновременно прекращается надавливание на живот курицы. Осеменатор вынимает пипетку из яйцевода, не прекращая сдавливать ее. При напольном содержании кур один оператор берет курицу левой рукой за ноги, помещает ее подмышкой левой руки , а правой рукой слегка надавливает на живот между лонными костями и килем, где расположен яйцевод. При этом клоака курицы раскрывается. Другой оператор двумя пальцами левой руки слегка растягивает клоаку, а правой рукой вводит в яйцевод пипетку со спермой на глубину 2-3 см. Осеменение индеек. Осеменение индеек лучше проводить через 2-10 часов после снесения яиц. Доза осеменения 0,0125 мл цельной спермой и 0,025 - 0,05 разбавленной. Глубина введения спермы в яйцевод 4-5 см. Частота осеменения индеек - один раз в 7-10 дней. Осеменение гусынь. Осеменять гусынь предпочтительно утром. Доза осеменения 0,05 мл цельной и 0,1 мл разбавленной спермой. В дозе однократного осеменения должно содержаться 20-39 млн. активных спермиев. При осеменении гусынь техник вводит в клоаку указательный палец левой руки и нащупывает яйцевод, расположенный левее и немного ниже входа в прямую кишку. Пипетка вводится в яйцевод по пальцу левой руки. Глубина введения спермы в яйцевод 2-4 см. Применяется стеклянная или полистероловая пипетка длиной 80-100 мм с заостренным и оплавленным концом. В начале сезона яйцекладки гусынь нужно осеменять 2 дня подряд или один раз двойной дозой; в дальнейшем осеменяют один раз в 10 дней, в последнюю треть яйцекладки - с интервалом в 7 дней. Осеменение уток. Наилучшая оплодотворенность яиц имеет место при осеменении уток в 16-18 часов дня. Доза, осеменения 0,1 мл разбавленной спермы, число спермиев в дозе - 46-80 млн. Катетер вводится в яйцевод как и у гусынь по указательному пальцу правой руки на глубину 4-5 см. Осеменение проводят каждые 4 дня. Осеменение цесарок. Осеменатор вводит указательный палец правой руки в клоаку , нащупывает яйцевод, расположенный с левой стороны у входа в клоаку. По указательному пальцу катетер вводят во влагалище на глубину 3-6 см. Осеменение повторяют через каждые 8-10 дней. Осеменение самок перепелов Оптимальным временем осеменения перепелок считается, когда в матке имеется яйцо со слабой скорлупой. Обычно это бывает за 1-2 часа до окончания светового дня. Доза неразбавленной спермы на одно осеменение 0,005-0,01 мл. Канюля микрошприца вводится на глубину I см, Интервал между первым и вторым осеменением 2-3 дня, в дальнейшем перепелок осеменяют каждые 6-7 дней. Материалы и оборудование 1. Петухи, натренированные на получение спермы. 2. Куры для искусственного осеменения. 3. Микроскоп МБИ-3 или МБР. 4. Столик термостат к микроскопу. 5. Осветитель к микроскопу. 6. Счетная камера Горяева. 7. Меланжеры эритроцитарные. 8. Стекла предметные. 9. Стекла покровные. 10. Стекла шлифованные. 11. Флаконы пеницилиновые. 12. Бюретки на 50 и 100 мл. 13. Спермоприемники двустенные градуированные. 14. Пипетки градуированные на 1,2,5,10 мл. 15. Трубки полистироловые диаметром 1,5 мм, длиной IOO-I50 мм. 16. Ватные тампоны стерильные. 17. Марлевые салфетки стерильные. 18. Спирт ректификат. 19. Смесь спирта и эфира (поровну). 20. Дистиллированная вода. 21. Раствор хлористого натрия 3%-ный. 22. Раствор хлористого натрия 1%-ный. 23. Раствор метиленовой сини 0,01-ный. Техника приготовления раствора: Приготавливают 200 мл 1%-ного раствора хлористого натрия; добавляют в него 0,5 г метиленовой сини, полученный раствор сохраняют в течение трех дней в стеклянной колбе № I с притерой пробкой при +25 ...+30°С; затем в колбу №2 наливают 90 мл 1% -ного раствора хлористого натрия и из колбы № I добавляют 10 мл раствора метиленовой сини, тщательно взбалтывают, далее в колбу № 3 наливают 40 мл раствора из колбы №2 и добавляют 60 мл раствора хлористого натрия, взбалтывают. В колбе № 3 в итоге получают 0,01%-ный рабочий раствор метиленовой сини для определения интенсивности дыхания спермиев. 24. Раствор метиленовой сини 1%-ный (краситель). 25. Фуксин (краситель). Применяется для окраски патологических форм спермиев. 26. Раствор краски трилана голубого 1,8%-ный на фосфатном буфере. Техника приготовления раствора: к 10 мл раствора трилана голубого добавляют 20 мл фосфатного буфера непосредетвенно перед использованием, рН конечного раствора 7,2; применяется для окрашивания при подсчете живых и мертвых спермиев. Практические задания Работа 1. Освоить практически приемы получения спермы у петухов с применением массажа по Барроусу и Квинну. Получить сперму в спермоприемник, определить её объем, сделать оценку по внешнему виду. Работа 2. Освоить изложенные в задании методики оценки качества спермы. По каждому из используемых на занятии петухов получить и оценить сперму в двух эякулятях. Второй массаж проводится через 10-20 секунд после первого и длится не более 15 секунд. Результа • ты оценки качества спермы записать в рабочей форме 14. Форма 14 Результаты оценки спермы
Работа 3. Произвести осеменение кур неразбавленной спермой , применяя установленную дозу. Контрольные вопросы:1.Чем определяется целесообразность и эффективность искусственного осеменения сельскохозяйственной птицы? 2. Насколько долго сперматозоиды могут сохранять жизнеспособность, находясь в половых путях самки птицы? 3. В какой части яйцевода происходит оплодотворение яйцеклетки? 4. Насколько часто и какой дозой спермы целесообразно осеменять кур? Индеек? Гусынь ? Уток ? Какое количество спермиев необходимо для одного осеменения? 5. Какова техника массажа по методу Барроуса и Квинна для получения спермы у петухов? В чем особенность метода получения спермы у гусаков и селезней? 6. Какова техника получения спермы у индюков? 7. Опишите методику оценки спермы по её густоте и активности спермиев. 8. Методика определения концентрации спермиев. 9. Оценка спермы по интенсивности дыхания спермиев. 10. Методики подсчета живых и мертвых спермиев; подсчета патологических фирм спермиев. 11. Опишите технику осеменения кур. 12. В чем состоит специфика осеменения самок других видов сельскохозяйственных птиц (индеек, гусынь, цесарок, самок перепелов)? |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 |
Культура Социогуманитарные исследования Издание второе, дополненное Борисов С. Б. Человек. Текст. Культура. Социогуманитарные исследования. Издание второе, дополненное. – Шадринск, 2007 – 556 с |
|
Издание второе дополненное и адаптированное для широкого круга читателей Интерес к этой книге со стороны читателей и общественных организаций, искренне переживающих за судьбу России, превзошел все ожидания.... |
|
Учебно-методическое пособие. Издание второе, переработанное и дополненное.... «Доврачебная помощь в туристском походе». Учебно-методическое пособие. Издание второе, переработанное и дополненное. – Йошкар-Ола:... |
|
Социология: искусство задавать вопросы (издание второе переработанное и дополненное) Социология: искусство задавать вопросы. Издание 2-е, переработанное и дополненное. М., 1998 |
|
Алесей Васильевич Трехлебов клич феникса (Второе издание исправленное и дополненное) Владыка Рафаил (Истинно Русская Православная Церковь) и Алексей Васильевич Трехлебов |
|
Учебник материал подготовлен с использованием правовых актов по состоянию... Коробеев А. И. заведующий кафедрой уголовного права Юридического института Дальневосточного государственного университета, доктор... |
|
Практикум по конфликтологии 2-е издание, дополненное и переработанное Главный редактор Заведующий редакцией Руководитель проекта Литературный редактор Художественный редактор Корректор Верстка |
|
Настоящее сокращенное и отредактированное издание «Временных методических... Временные методические указания по расчету выбросов загрязняющих веществ в атмосферный воздух предприятиями деревообрабатывающей... |
|
Руководство по изучению рыб (преимущественно пресноводных) Четвертое... Учитывая массовые запросы на эту книгу, И. Ф. Правдин готовил к печати четвертое, значительно переработанное и дополненное издание.... |
|
Бассейн Амура: осваивая сохранить Бассейн Амура: осваивая – сохранить. Издание второе (дополненное и переработанное). Хабаровск: ООО "Архипелаго Файн Принт", 2007.... |
 |
Человек умирает. Что делать? Москва, 2016 Издание второе, переработанное, дополненное Мы попробовали собрать под одной обложкой и справочную, и медицинскую информацию, и советы о помощи по организации похорон, и материалы,... |
|
Электронные системы отображения навигационных карт второе издание, переработанное и дополненное Ватущенко Л. Л, Лдипевич В. А., Кошевой А. А. Электронные системы отображения навигационных карт. 2-е изд., перераб и доп. Одесса,... |
|
Гэри К. У. Инглэнд. / Пер с англ. О. Суворов А45 Полный курс акушерства и гинекологии собак. (Второе издание исправленное и дополненное Гэри К. У. Инглэнд.) / Пер с англ. О.... |
|
Учебное пособие Второе издание переработанное и дополненное Издательство... Передерин, С. В. Трудовое право: права, обязанности, ответственность : учеб пособие / С. В. Передерин; Воронеж гос ун-т. — Воронеж... |
|
Учебное пособие Издание второе, переработанное и дополненное Москва... Подписано в печать с готовых диапозитивов 24. 12. 2004. Формат 60х90'/ Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл печ л. 12. Тираж 3000... |
|
Учебник сержанта химических войск издание второе переработанное и дополненное Учебник предназначен для сержантов и курсантов частей и подразделений химических войск. Он разработан на основе требований уставов,... |