Экспрессия человеческого и вирусного интерлейкинов 6 при аденокарциноме предстательной железы
|
Скачать 280.06 Kb.
|
|
РЫБАЛЬЧЕНКО Александр Владимирович ЭКСПРЕССИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО И ВИРУСНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНОВ – 6 ПРИ АДЕНОКАРЦИНОМЕ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.00.40 – «Урология» 14.00.14 – «Онкология» Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2008 Работа выполнена в ГОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию РФ. НАУЧНЫЕ РУКОВОДИТЕЛИ Доктор медицинских наук, профессор Велиев Евгений Ибадович Доктор медицинских наук, профессор Тупицын Николай Николаевич ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ доктор медицинских наук, Зайцев профессор Андрей Владимирович доктор медицинских наук Алексеев Борис Яковлевич ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ: ГОУ ВПО «Московская медицинская академия имени И.М.Сеченова» Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию РФ. Защита состоится « » _________2008 года в ____ часов на заседании диссертационного совета Д 208.041.06. при ГОУ ВПО «Московский госдарственный медико-стоматологический университет Росздрава»(127006 Москва, ул.Долгоруковская, 4). Почтовый адрес: 127473, г.Москва, ул.Делегатская д.20/1. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государственного медико-стоматологического университета (127206, Москва, ул. Вучетича, д. 10а). Автореферат разослан «__» 2008г. Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор М.М. Умаханова 1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Рак предстательной железы (РПЖ) сегодня представляет собой крупную медицинскую и социальную проблему. В России РПЖ ежегодно диагностируется практически у 180 тысяч мужчин и 37 тысяч мужчин ежегодно умирают от этого заболевания. Латентный РПЖ обнаруживается приблизительно у 25% мужчин в возрасте 40 лет [Давыдов М.И., Аксель Е.М., 2003, Заридзе Д.Г., 1997, Матвеев Б.П., Бухаркин Б.В., Матвеев В.Б, 1999]. В последние годы оптимизация оценки прогноза РПЖ и разработка эффективных схем противоопухолевой терапии связаны с поиском новых методов диагностики, среди которых особо важное место занимают биологические маркеры (сигнальные молекулы), синтезируемые в клетках уротелия и предстательной железы. Иммунологическая верификация этих маркеров в ткани опухолей у онкологических больных позволяют во многих случаях своевременно выявить злокачественную опухоль и оценить степень ее прогрессии, инвазии, вероятности метастазирования и возникновения рецидивов. В исследованиях последних лет показано участие биологически активных соединений (цитокинов), в частности, интерлейкина-6 (ИЛ-6) в патогенезе РПЖ. Как известно, биологическая активность ИЛ-6 осуществляется после его связывания с высокоаффинным рецепторным комплексом, состоящим из двух мембранных гликопротеидов 80 kDa (непосредственно связывающего ИЛ-6) и 130 kDA (обеспечивающего высокую аффинность связывающего комплекса). Роль ИЛ-6 при опухолях заключается в том, что он способствует пролиферации клеток и оказывает антиапоптотическое действие [Тупицын Н. Н., 1998, Autissier P., De Vos J., Liautard J., Tupitsyn N. et al., 2 1998. Harris KA, Reese DM., 2001, Palmer J., Hertzog P.J., Hammacher A., 2004]. Клетки нормального эпителия предстательной железы рецептора для ИЛ-6 на мембране не имеют и, поэтому, неспособны к ответу на данный цитокин. При доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) клетки стромы продуцируют ИЛ-6, а эпителиальные клетки приобретают рецептор ИЛ-6 на мембране, и, таким образом, становятся подверженными пролиферативному и антиапоптотическому действию цитокина. Таким образом, при ДГПЖ ИЛ-6 оказывает паракринное ростовое влияние на клетки эпителия предстательной железы. На этапе же малигнизации происходит качественное изменение экспрессии эпителиальных клеток – они становятся способными сами продуцировать ИЛ-6. Именно таким образом клетки, на мембране которых имеются рецепторы к ИЛ-6, приобретают независимость от экзогенного ИЛ-6, т.е. на этом этапе уже идет речь об аутокринной регуляции опухолевого роста [Siegsmung M.J. et al., 1994; Тупицын Н. Н., 2000, Palmer J. et al., 2004]. Помимо человеческого, существует и вирусный ИЛ-6, ген которого находится в геноме человеческого герпес вируса 8 типа (HHV-8). Вирусный ИЛ-6 гомологичен человеческому на 25%. В предстательной железе здоровых лиц гены HHV-8 не выявляются. Однако у больных СПИДом в ткани предстательной железы наблюдается персистенция HHV-8, и методом гибридизации in situ было показано, что в отдельных случаях в железистом эпителии предстательной железы наблюдается экспрессия некоторых генов латентной инфекции HHV-8 [Гурцевич В.Э., 2004, Гурцевич В.Э., Кадырова Е.Л., 2004]. Однако данные о наличии генома HHV-8 в опухолевой ткани РПЖ и об особенностях экспрессии вирусного ИЛ-6 при РПЖ отсутствуют. Получение сведений такого рода позволит глубже понять роль HHV-8 в патогенезе 3 РПЖ, идентифицировать опухоли, продуцирующие ИЛ-6, и разработать новые методы их патогенетической терапии. Цель исследования: изучение наличия генов HHV-8 и экспрессии человеческого и вирусного интерлейкинов-6 в ткани аденокарциномы предстательной железы. Задачи исследования:
Научная новизна работы. Впервые установлен факт наличия генома и экспрессии ИЛ-6 в тканях РПЖ. Впервые обнаружены гены вирусного ИЛ-6 в образцах опухолевой ткани у 12% пациентов и ORF-26 у 6% пациентов, страдающих РПЖ, что может свидетельствовать о патогенетической роли этого вирокина при раке предстательной железы. Впервые показано, что трансформирующий ген К1 HHV-8 в ткани РПЖ отсутствует даже при наличии других фрагментов генома HHV-8. Впервые выявлены нуклеотидные замены в ДНК гена вирусного ИЛ-6, присутствующего в ткани РПЖ, которые отражаются на аминокислотном составе вирокина: в одном случае - замена 192Асп → 192Асп, в другом - 3 аминокислотные замены: 16Лей→16Про, 70Фен→70Тир, 4 90Глу→90Асп. Часть из этих аминокислот находится в сайтах связывания вирокина с рецептором, что может влиять на функцию вирусного ИЛ-6. Впервые показано, что продукция человеческого ИЛ-6 обнаруживается в опухолевой ткани у 70% пациентов, страдающих РПЖ. Установлено, что экспрессия человеческого ИЛ-6 ассоциируется с большей агрессивностью распространенностью РПЖ. Так, практически у всех больных в «ИЛ-6 позитивной» группе опухоли крупного размера (Т3 и Т4), наблюдается поражение обеих долей, достоверно большая частота случаев с высокой степенью дисплазии железистого эпителия, преобладание низкодифференцированных аденокарцином и достоверно более высоких уровней ПСА в сыворотке крови. Практическая значимость работы. Полученные данные, в частности, выявление экспрессии ИЛ-6 в тканях РПЖ, могут служить дополнительным критерием идентификации наиболее агрессивных форм РПЖ, что в свою очередь может быть полезным при выборе адекватных подходов к лечению, основанных на блокаде продукции или биологического действия ИЛ-6. В случаях выявления фрагментов генома HHV-8 в ткани РПЖ целесообразно изучать вопрос о показаниях к противовирусной терапии. Вирусные белки (вирусный ИЛ-6, продукт гена К2), в случае их экспрессии в ткани РПЖ, могут явиться потенциальной мишенью иммунотерапии. Личное участие диссертанта в разработке проблемы. Автором было проведено обследование и лечение 85 пациентов различных возрастных групп, в основную группу вошло 17 пациентов с гистологически верифицированным диагнозом – аденокарцинома предстательной железы. В ходе сбора материала для диссертационной работы Рыбальченко А.В. были освоены все необходимые лабораторные и инструментальные методы диагностики, консервативные и оперативные способы лечения аденокарциномы предста- 5 тельной железы. Выбор методов исследования, планирование и проведение различных исследований, выполнение расчетов, обработка и обсуждение результатов, оформление диссертации и автореферата выполнены автором самостоятельно. ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
Апробация работы. Основные положения настоящей работы обсуждены на заседании кафедры урологии и хирургической андрологии ГОУ ДПО «РМАПО РОСЗДРАВА». Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 научные работы, в том числе 1 работа в журнале, рекомендованном ВАК Министерства образования и науки РФ. 6 Внедрение результатов работы в практику. Предложенный новый метод определения ИЛ-6-продуцирующего РПЖ внедрен в клиническую практику урологических отделений ГКБ им. С.П. Боткина. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы описания материалов и методов, 3 глав, содержащих результаты собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 177 источников (15 отечественных и 162 зарубежных). Работа иллюстрирована 20 таблицами, 5 диаграммами и 6 рисунками. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Исследование выполнено на кафедре урологии и хирургической андрологии РМАПО совместно с лабораторией иммунологии гемопоэза РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН в 2004-2007 годах. Материалом исследования явились образцы биопсийного материала гистологически верифицированного РПЖ, полученные от 17 больных, находившихся на лечении в отделении урологии КБ им. С.П.Боткина. Верификацию диагноза РПЖ проводили путем сбора анамнеза больных, их физикального обследования, морфологического исследования пункционного биоптата и хирургически удаленной опухоли, определения уровня ПСА в сыворотке крови, проведения УЗИ, ТРУЗИ, КТ, МРТ органов малого таза и сцинтиграфии костей скелета. Морфологическая верификация РПЖ осуществлялась в патологоанатомическом отделении Московского научно-исследовательского института им. П.А. Герцена. Все пациенты находились в возрасте старше 50 лет. Средний возраст пациентов в исследуемой группе составил – 62,5±3,5 года. Сроки наблюдения за пациентами варьировали от 6 месяцев до 3 лет. 7 Размеры опухоли у пациентов в исследуемой группе составляли 1,0 - 7,0 см в диаметре. У 4 пациентов опухоль находилась в пределах капсулы, у 7 пациентов наблюдалось поражение семенных пузырьков, у 6 пациентов опухоль прорастала за пределы капсулы. У 10 (59%) пациентов была поражена одна доля предстательной железы, а у 7 (41%) – обе доли. У 10 (59%) пациентов имела место высокая и умеренная степень дифференцировки клеточных элементов опухоли, а у 7 (41%) пациентов – низкая. У 13 (76%) пациентов наблюдалась аденокарцинома с инфильтративным ростом, а у 4 (24%) пациентов – ацинарная аденокарцинома. У 14 (82%) пациентов была 1-2 стадия РПЖ, а у 3 (8%) пациентов – распространенная (см. таблицу № 1). В эксперименте были использованы стандартные методы выделения ДНК и РНК, полимеразной цепной реакции (ПЦР) и обратной транскрипции. Секвенирование ДНК проводили в Межинститутском Центре коллективного пользования «ГЕНОМ» ИМБ РАН (http://www.genome-centre.narod.ru/), организованном при поддержке РФФИ (грант №00-04-55000). 8 Таблица № 1 Распределение больных в зависимости от стадии РПЖ.
9 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Результаты одновременного изучения экспрессии человеческого и вирусного ИЛ-6 тканью РПЖ суммированы в таблице № 2. В качестве положительного контроля изучалась мРНК -глобина (100% положительный результат). Таблица № 2 Результаты ПЦР с обратной транскрипцией с РНК, выделенной из образцов аденокарциномы предстательной железы.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 |
В. А. Солодкий Лечение рака предстательной железы Анамнез заболевания и физикальное обследование, пальцевое ректальное исследование |
|
Расстройства мочеиспускания у больных первично выявленным раком предстательной железы. Работа выполнена в гоу дпо «Российская медицинская академия последипломного образрвания Росздрава» |
|
Подготовка для узи Для подготовки к трансректальному обследованию предстательной железы необходимо в день исследования утром выполнить очистительную... |
 |
Клинические рекомендации (протоколы) по оказанию скорой медицинской... Клинические рекомендации (протоколы) оказания скорой медицинской помощи при воспалительных болезнях мужских половых органов |
|
Приказ от 1 июля 2015 г. N 402ан об утверждении стандарта специализированной... Об утверждении стандарта специализированной медицинской помощи при злокачественных новообразованиях предстательной железы II-III... |
|
Аргунов А. В., врач дерматовенеролог Хронический простатит — воспалительное заболевание предстательной железы различной этиологии (в том числе неинфекционное), проявляющееся... |
|
Структура и экспрессия mmtv-родственного провируса у больных раком молочной железы Работа выполнена в нии канцерогенеза, Учреждения Российской Академии медицинских наук Российского Онкологического Научного Центра... |
|
Донецкой Народной Республики унифицированный клинический протокол... Риск заболеть раком достигает 27,7% для мужчин и 18,5% для женщин, то есть на протяжении 75 лет жизни злокачественные новообразования... |
|
Роль тиреоидной патологии в развитии дисгормональных заболеваний молочной железы На основе данных отечественной и зарубежной литературы приведены итоги изучения возможных связей между функциональным состоянием... |
|
Влияние человеческого и интеллектуального Проблемы оценки и влияния человеческого и интеллектуального капитала на результаты |
|
Эндокринная офтальмопатия при аутоиммунной патологии щитовидной железы у взрослых |
|
Роль патологии сосков молочной железы в развитии маститов у коров при машинном доении |
|
Неадекватные операции при раке щитовидной железы Учреждение высшего профессионального образования санкт-петербургский государственный |
|
Основная образовательная программа магистратуры «биология» Экспрессия простагландина е2 и сосудистых факторов в иммунокомпетентных органах человека в раннем постнатальном онтогенезе |
|
Люси Истоки рода человеческого Перевод с английского канд биол наук... Восточной Африке, которые во многом изменили привычную картину происхождения и становления человеческого рода. Связанные с именами... |
|
Заседание Президиума Общероссийской общественной организации «Ассоциация врачей-офтальмологов» Диагностика и лечение эндокринной офтальмопатии при аутоиммунной патологии щитовидной железы |