Возможности флюоресцентной лапароскопии в диагностике ранних метастазов рака в брюшной полости
|
Скачать 372.24 Kb.
|
|
Методика и аппаратура для проведения лазерного флюоресцентного обследования опухолей. При аналоговых исследованиях Аласенс вводился внутрь в дозе 5-30 мг/кг в 200 мл негазированной воды за 1-9 часов до проведения флюоресцентной диагностики при исследовании параметров накопления препарата в опухолях. Всем больным проводилась термометрия, измерение АД, взятие общеклинических и биохимических анализов крови до флюоресцентной диагностики, после приема Аласенса, через сутки и 7 суток. Возбуждение флюоресценции вызывалось источниками света сине-фиолетового спектра - 400-480 нм. Люминесценция оценивалась визуально, или изображение передавалось с помощью чувствительной телекамеры на экран компьютера. Спектральный анализ проводился на длине волны 630 нм. Он позволяет определить степень накопления флюорохромов в различных тканях in vivo и in vitro. Использована лазерная электронно-спектральная установка ЛЭСА-01. Методика проведения лапароскопии. Препарат Аласенс производства ФГУП «ГНЦ НИОПИК» (Регистрационное удостоверение Р №002148/01 - 2003 от 27.01.2003). Порошок для приготовления раствора во флаконах по 0,5 и 1,5 г. Аласенс вводился в дозе 20 мг/кг массы тела больного, растворенный непосредственно перед приемом в 200 мл негазированной питьевой воды, принимался внутрь за 3-4 часа перед флюоресцентной лапароскопией. В качестве источника излучения, возбуждающего флюоресценцию протопорфирина IX в тканях, использовался стандартный осветитель белого света и светодиодный источник с длиной волны 420 нм и выходной мощностью на этой длине волны 300 мВт с получением 2-х мерного флюоресцентного изображения. Спектрометрия проводилась на длине волны 630 нм (Лазерная электронно-спектральная установка для флюоресцентной диагностики опухолей и контроля ФДТ ЛЭСА-01). После осмотра в белом свете лапароскопическую аппаратуру переключали для работы в режиме флюоресценции и проводили осмотр брюшной полости в синем свете. Оценивались наличие или отсутствие флюоресценции опухолевых очагов, видимых в белом свете, границы флюоресцирующих очагов, и проводился поиск очагов флюоресценции на визуально неизмененной при осмотре в белом свете париетальной и висцеральной брюшине и капсуле печени. Методика оценки и регистрации результатов исследования. В зависимости от наличия или отсутствия визуально наблюдаемой флюоресценции опухоли мы встретились со следующей ситуацией: 1. Есть флюоресценция - есть опухоль (Ф+О+) 2. Нет флюоресценции - нет опухоли (Ф – О –) 3. Есть флюоресценция - нет опухоли (Ф+О –) 4. Нет флюоресценции - есть опухоль (Ф – О+). В случае наличия опухоли и флюоресценции и в случае отсутствия опухоли и флюоресценции результат не является ошибочным. При (Ф+О–) и (Ф–О+) – результат признается ошибочным - ложноположительным или ложноотрицательным. Оценка яркости флюоресценции была субъективна. Флюоресценция считалась слабой, если наблюдалась при освещении источником света с близкого расстояния и различалась с применением светофильтра (+). Четко видимая флюоресценция при освещении источником света с расстояния 5-10 см считалась флюоресценцией средней яркости (++). Флюоресценция опухоли при освещении с расстояния 20 см при осмотре макропрепарата или наблюдаемая во время лапароскопии при вхождении в брюшную полость оценивалась как яркая (+++). При математической обработке материала использовали методы вариационной статистики. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Оценка степени влияния собственной флюоресценции тканей на результаты флюоресцентной диагностики с применением аласенса. В некоторых работах приводятся исследования по диагностике ранних раков на основании различий в собственной флюоресценции тканей. Неизвестно совпадают ли пики собственной флюоресценции с пиками флюоресценции вводимых флюорохромов или индуцированных ими эндогенных веществ и как они могут влиять на результаты вторичной люминесценции. Кроме того, Аласенс - производное 5-аминолевулиновой кислоты, которая вырабатывается и эндогенно, так же, как и протопорфирины. Мы, выбирая модель для исследования влияния собственной флюоресценции на результаты диагностики, остановились на поражениях кожи и вульвы, потому что они доступны постоянному спектрометрическому контролю. Спектрометрические исследования проводились при возбуждении флюоресценции источниками светового излучения как для визуального (420 нм), так и спектрометрического контроля (630 нм). Все результаты определены с достоверностью р < 0,05 (Табл. 6,7), где n= количество больных/количество спектрометрий. 842 спектрометрии на длине волны 420 нм не обнаружили признаков видимой собственной флюоресценции. В организме нет экзогенных веществ, люминесцирующих на длине волны флюоресценции протопорфирина IX. Собственная флюоресценция (измерена в абсолютных величинах) всех изученных тканей практически отсутствует, одинакова как у кожи, вульвы, так и у доброкачественных, злокачественных опухолей кожи и фоновых заболеваний и рака вульвы. Следовательно, собственная флюоресценция при облучении коротковолновым светом не может быть методом диагностики и дифференциальной диагностики и не может влиять на результаты вторичной флюоресценции. Таблица 6. Собственная флюоресценция (420 нм)
Проведенные аналогичные измерения в абсолютных величинах на длине волны 630 нм подтверждают выводы об отсутствии различия флюоресценции опухоли и нормальных тканей. То есть без введения в организм 5-аминолевулиновой кислоты (Аласенса) в опухолях не накапливается избыток индуцированного протопорфирина IX и вторичная флюоресценция не наблюдается. Таблица 7. Собственная флюоресценция (630 нм)
Собственная люминесценция изученных доброкачественных и злокачественных опухолей и тканей при возбуждении её на длине волны 630 нм так же, как и при возбуждении коротковолновым излучением, не может являться диагностическим критерием наличия или отсутствия опухоли, а тем более ее доброкачественности или злокачественности. Зрительных различий при осмотре в монохроматическом свете опухолевой и нормальной тканей не определяется. В противоположность этому, при исследовании 44 опухолевых узлов наружной локализации: 31 – базальноклеточный рак кожи, 3 – плоскоклеточный рак кожи и 10 – кератоакантом с вторичной флюоресценцией с 5-аминолевулиновой кислотой мы всегда видели хорошо заметное свечение опухоли на фоне непораженных тканей. Визуально у многих больных опухоль определялась как бледно-розовое свечение на сине-фиолетовом фоне. Флюоресценция наблюдалась на всей поверхности опухоли, либо её части, что обусловлено размерами. С увеличением размеров флюоресценция носила все более неравномерный характер по интенсивности. С целью определения накопления Аласенса в опухолевой ткани статистически обработаны 220 спектров флюоресценции. Флюоресцентная контрастность (опухоль/нормальная ткань) максимально достигала 7,3 кратной величины, а в среднем составила 4,65+0,2 для злокачественных опухолей малого размера и 3,27 + 0,16 для опухолей размером свыше 2 см. Флюоресценция доброкачественных опухолей достигала 1,21+0,05 ед., что подтвердило избирательность накопления протопорфирина IX непосредственно в опухолях со злокачественным ростом. Изучение достоверности различия результатов (разность результатов не случайна при t >3) показало, что проведение дифференциальной диагностики между доброкачественными поражениями и злокачественными опухолями используя Аласенс возможно (t=15,6). Обоснование выбора оптимального времени флюоресцентного обследования при применении Аласенса. В злокачественных клетках идут два конкурирующих процесса – селективное накопление фотосенсебилизатора за счет особенностей метаболизма злокачественных клеток и удаление его за счет естественных процессов жизнедеятельности клетки. Очевидно, что должен существовать отрезок времени, когда концентрация протопорфирина IX в опухолевой клетке будет максимальна относительно окружающей ткани. Для определения этого отрезка измерялся контраст накопления опухоль/кожа у больных базальноклеточным и плоскоклеточным раком кожи и вульвы в разные сроки после приема стандартной дозы препарата (Табл. 8). Таблица 8. Контраст накопления Аласенса в зависимости от времени.
Сравнивая полученные результаты можно полагать, что при проведении флюоресцентной лапароскопии наиболее объективные сведения получаются в сроки от 3-х до 6-и часов после приема аласенса, а наиболее раннее обследование не должно проводиться до трех часов после приема препарата. Сопоставление спектральных характеристик накопления протопорфирина IX в опухолях различного гистологического строения и локализации (кожа, вульва, шейка матки, молочная железа). Нами не найдено конкретных исследований зависимости уровня флюоресценции от гистологического строения опухоли. Поэтому, имея обширный и разносторонний материал и накопленную базу спектральных характеристик опухолей, мы не могли обойти этот вопрос стороной. Оценивая полученные результаты и сравнивая средние величины относительной флюоресценции опухолей различного гистологического строения, мы пришли к выводу, что они накапливают протопорфирин IX, стимулированный приемом Аласенса примерно одинаково и вне зависимости от локализации опухолей, что подтверждают результаты спектрометрий, приведенные в таблице 9. Таблица 9. Спектральные характеристики накопления протопорфирина IX в опухолях различного гистологического строения и локализации.
Обоснование выбора оптимальной дозы аласенса на модели рака шейки матки. Из 22 больных, поступавшие в стационар с диагнозом рак шейки матки 4 пациенткам по единой методике давался Аласенс в количестве 5 мг/кг веса. При осмотре этих больных в темном помещении и освещении шейки матки светом с длиной волны 420 нм видимой флюоресценции ни в одном случае четко не наблюдалось ни в зоне органических изменений, ни в других отделах шейки матки и влагалища. И только при освещении с очень близкого расстояния появлялся слабовыраженный красный фон (+) в области нахождения опухоли. Не смотря на это, спектрометрически (630 нм) имелось полуторократное превышение уровня флюоресценции в опухолях. Спектрометрия показала низкий уровень флюоресценции с контрастностью накопления максимально 1,8 ед. То есть опухоль может накапливать протопорфирин IX, но количество введенного в организм аласенса по всей вероятности недостаточно для полного насыщения им раковой клетки. В таблице 10 представлены данные спектрограмм (n= количество спектрограмм), снятые с различных точек опухолей указанных больных. Таблица 10. Зависимость уровня флюоресценции от дозы Аласенса
У всех 6 больных с раком шейки матки 1-2 стадии, которым давался Аласенс в количестве 10 мг/кг отмечена видимая флюоресценция опухоли в её пределах. В 3-х случаях она имела значительную яркость (+++) и в одном из них носила характер отдельных очагов. Один из них не совпадал с границами видимого поражения. Средняя флюоресцентная контрастность (опухоль/норма) 3,9 ед. Сравнение результатов спектроскопии показало, что при дозах 20 мг/кг и 30 мг/кг накопление индуцированного Аласенсом протопорфирина IX идет более интенсивно и средние показатели контрастности флюоресценции более значительны, чем при дозах 10 мг/кг, но различаются менее выражено, чем в сравнении дозы 10 мг/кг с дозой 5 мг/кг. Разница в накоплении протопорфирина IX при дозах 20 и 30 мг/кг почти незаметна. То есть, по всей вероятности уже при дозе в 20 мг/кг происходит практически максимальное насыщение клеток опухоли протопорфирином IX и дальнейшее увеличение принятой дозы Аласенса может вести в основном к увеличению фототоксичности препарата без эффективного увеличения уровня флюоресценции. |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 |
Как подготовиться к узи брюшной полости Чтобы получить точные результаты, подготовка к узи брюшной полости требует полностью исключить из рациона |
|
Инструкции по подготовке к ультразвуковому исследованию Подготовка к узи брюшной полости Главное препятствие для проведения узи брюшной полости – наличие воздуха. Поэтому главная задача подготовки к ультразвуковому исследованию... |
 |
Профилактика рака возможна! Возбудитель рака открыт ? Ростов-на-Дону Узнаете и о том, что рак, инфаркт, инсульт — это всего лишь последние стадии трихомоноза. И вы убедитесь, что способны остановить... |
|
3 Объяснить пациенту необходимость и последовательность предстоящей... Показания: при кровотечениях, острых воспалительных процессах в брюшной полости, ушибах (в первые сутки), сильной лихорадке, в послеоперационный... |
|
Абакумов М. М., Андрияшкин В. В., Бреусенко В. Г. и др. Руководство... Суковатых Б. С., Хирургические болезни и травмы в общей врачебной практике [Текст]/ Б. С. Суковатых, С. А. Сумин, Н. К. Горшунова:... |
|
Памятками по подготовке к процедурам… При подготовке к узи брюшной... Ультразвуковые исследования пациентам Няганской городской поликлиники проводятся строго по алгоритмам. Если вам предстоит какое-либо... |
|
Хирургическая подготовка полости рта к протезированию У 80 больных, пользующихся зубными протезами, нет хорошей опоры для их фиксации в полости рта |
|
Ф. Батмангхелидж Вода натуральное лекарство от ожирения, рака, депрессии Королевского колледжа Лондонского университета. Фонд «За простоту в медицине» попросил его проанализировать мои выводы о том, что... |
|
Ф. Батмангхелидж Вода натуральное лекарство от ожирения, рака, депрессии Королевского колледжа Лондонского университета. Фонд «За простоту в медицине» попросил его проанализировать мои выводы о том, что... |
|
Возможности ультразвуковых методов в диагностике и прогнозировании... Работа выполнена в гоу впо «Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава» |
|
Примерная программа дисциплины стоматология модуль «хирургия полости рта» Цель подготовка врача стоматолога, способного оказать амбулаторную стоматологическую хирургическую помощь пациентам с воспалительными... |
|
Возможности ультразвуковой технологии отслеживания пятнистых структур... Работа выполнена в гоу впо «Московский государственный медико-стоматологический университет» Минздравсоцразвития России |
|
С введением в действие "Ведомственных строительных норм. "Строительство... Разработаны и внесены всесоюзным научно-исследовательским институтом по строительству магистральных трубопроводов (вниист) |
|
С введением в действие "Ведомственных строительных норм. "Строительство... Разработаны и внесены всесоюзным научно-исследовательским институтом по строительству магистральных трубопроводов (вниист) |
|
Возможности мультиспиральной компьютерной гистеросальпингографии... Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московский государственный... |
|
Номинация: Инновационные проекты Организация, представляющая проект: ООО «Интера-Мед» Разработка диагностического таргетного пептидного препарата, меченного изотопом Tc99m, для выявления метастазов и контроля лечения... |