АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА ДиаС ALAT (GPT) DiaS (IFCC mod.) 
Creatinine FS *
Набор реагентов для определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке
крови человека кинетическим методом
Информация для заказа
Кат. №
|
Фасовка
|
SB 10 270 021
|
R1 2х68 мл + R2 2х17 мл
|
SB 10 270 022
|
R1 6х68 мл + R2 6х17 мл
|
Справка [1, 2]
Аланинаминотрансфераза (AЛАT/AЛT), ранее называвшаяся Глутамат-пируваттрансаминазой (GPT) и Аспартатаминотрансфераза (AСAT/AСT), ранее называвшаяся Глутамат-оксалоацетаттрансаминаза (GOT) – наиболее важные представители аминотрансфераз или трансаминаз (группы ферментов, катализирующих превращение α-кетокислот в аминокислоты путем переноса аминогрупп).
Значительное повышение AЛT происходит только при болезнях печени, так как это специфичный фермент. Однако, повышение уровня AСT может происходить в связи с повреждением сердечной или скелетных мышц, также как и при повреждении паренхимы печени. Следовательно, параллельное измерение AСT и AЛT применяется для дифференциации повреждения печени от повреждения сердечной или скелетных мышц. Соотношение AСT к AЛT используется для дифференциальной диагностики болезней печени. Соотношение <1 указывает на слабое повреждение печени, тогда как соотношение >1 говорит о множественных, часто хронических заболеваниях печени.
Метод
Оптимизированный УФ тест в соответствии с рекомендациями IFCC (Международная Федерация Клинической Химии и Лабораторной Медицины).
Принцип определения
L-Аланин + 2-Оксоглутарат  L-Глутамат+Пируват
Пируват + НAДH + H+  D-Лактат + НAД+
Реагенты
Компоненты и их концентрации в реакционной смеси
R1:
|
Tрис, ммоль/л (pH 7.15)
|
100
|
|
L-Аланин, ммоль/л
|
500
|
|
ЛДГ (Лактатдегидрогеназа), Е/л
|
≥1700
|
R2:
|
2-Оксоглутарат, ммоль/л
|
15
|
|
НAДH, ммоль/л
|
0,18
|
Стабильность и хранение
Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2–8°С, в защищенном от света месте. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты!
Меры предосторожности
1. В качестве консерванта реагенты содержат азид натрия (0.95 г/л). Не глотать! Избегать контакта реактивов с кожей и слизистыми.
2. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами.
Обезвреживание отходов
В соответствии с местными правилами.
Подготовка реагента
Запуск реакции субстратом
Реагенты готовы к использованию.
Запуск реакции образцом
Смешать 4 части реагента 1 с одной частью реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) = монореагент.
Стабильность монореагента:
-
-
4 недели
|
при 2 – 8°C
|
5 дней
|
при 15–25°C
|
Монореагент хранить в темноте!
Необходимые материалы, не включенные в набор
• 0,9% раствор NaCl.
• Общее лабораторное оборудование.
Исследуемые образцы
• Сыворотка
• Гепаринизированная или ЭДТА плазма.
Стабильность:
-
-
3 дня
|
при 15–25°C
|
7 дней
|
при 4–8°C
|
7 дней
|
при -20°C
|
Загрязненные образцы хранению не подлежат.
Процедура определения
Адаптации к автоматизированным системам запрашивайте дополнительно
Длина волны, нм
|
340,Hg 334, Hg 365
|
Длина опт. пути, см
|
1
|
Температура, °C
|
37
|
Измерение
|
относительно воздуха
|
Запуск реакции субстратом
Образец/калибратор, мкл
|
|
100
|
Реагент 1, мкл
|
|
1000
|
Перемешать, инкубировать 5 мин, затем добавить:
|
Реагент 2, мкл
|
|
250
|
Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1, 2 и 3 мин.
|
Запуск реакции образцом
Образец/калибратор, мкл
|
|
100
|
Монореагент, мкл
|
|
1000
|
Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1,2 и 3 мин.
|
Расчет
По фактору
Из значений оптической плотности вычислить ∆A/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы
∆A/мин × фактор = активность АЛТ [Е/л].
Запуск реакции субстратом
-
340 нм
|
2143
|
334 нм
|
2184
|
365 нм
|
3971
|
Запуск реакции образцом
-
340 нм
|
1745
|
334 нм
|
1780
|
365 нм
|
3235
|
по калибратору
АЛТ [Е/л] =  х Конц. кал. [Е/л]
Калибраторы и контроли
Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется калибратор TruCal U фирмы DiaSys. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
|
Кат. №
|
Фасовка
|
TruCal U
|
5 9100 60 10 060
|
1х3 мл
|
TruLab N
|
5 9000 60 10 060
|
1х5 мл
|
TruLab P
|
5 9050 60 10 060
|
1х5 мл
|
Рабочие характеристики
Диапазон измерений
При использовании автоматических анализаторов тест позволяет определять активности АЛТ в диапазоне измерений до 600 Е/л.
В ручном режиме измерений тест применяется для определения активности АЛТ, соответствующей изменению оптической плотности не более ∆A/мин = 0.16 при 340 и 334 нм или ∆A/мин = 0.08 при 365 нм. Если значение превосходит верхнюю границу диапазона, образец должен быть разведен 1 + 9 изотоническим раствором NaCl (9 г/л) и полученный результат должен быть умножен на 10.
Специфичность/Помехоустойчивость
аскорбиновая к-та до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл, гемоглобин до 400 мг/дл и липемия до 2000 мг/дл триглицеридов не влияют на точность анализа.
Чувствительность/Пределы определения
Нижний предел определения 4 Е/л.
Воспроизводимость
(t = 37°C, число измерений n = 20)
Образец
|
Среднеарифметическое значение, ммоль/л
|
SD, ммоль/л
|
CV, %
|
Внутрисерийная
|
Образец 1
|
22,2
|
1,38
|
6,22
|
Образец 2
|
44,8
|
1,17
|
2,62
|
Образец 3
|
101
|
1,02
|
1,00
|
Межсерийная
|
Образец 1
|
22,8
|
0,70
|
3,08
|
Образец 2
|
42,6
|
0,68
|
1,60
|
Образец 3
|
99,3
|
0,92
|
0,92
|
Нормальные величины
• Женщины, Е/л <31
• Мужчины, Е/л <41
Литература
1. Thomas L. Alanine aminotransferase (ALT), Aspartate aminotransferase (AST). In: Thomas L, editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 55-65.
2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 617-721.
3. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, Fйrard G et al. IFCC primary reference procedure for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37°C. Part 5: Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of alanine aminotransferase. Clin Chem Lab Med 2002; 40: 718-724.
4. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples. 1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 14-5.
Разрешено к обращению на территории Российской Федерации РУ № ФСР 2011/11587
Система менеджмента качества сертифицирована на соответствие требованиям: ISO 9001:2008, EN ISO 13485:2012, ГОСТ ISO 9001-2011, ГОСТ ISO 13485-2011
 Допущено к обращению на территории Европейского Союза
Авторизованный представитель ЗАО «ДИАКОН-ДС» в ЕС
CE-partner4U
ESDOORNLAAN 13, 3951DB MAARN, THE NETHERLANDS
Изготовитель
ЗАО «ДИАКОН-ДС»
142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а.
По лицензии
«DiaSys Diagnostic Systems GmbH», Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany. Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany.
http://www.diakonlab.ru
E-mail: sale@diakonlab.ru
Тел.: (495) 980-63-39
Тел./факс: (495) 980-66-79
</1>
|
