Аланинаминотрансфераза диас




Скачать 65.11 Kb.
Название Аланинаминотрансфераза диас
Тип Документы
rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Документы


АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА ДИАС

ALAT (GPT) DiaS (IFCC mod.)

Информация для заказа

Кат. № Фасовка

10 270 021 R1 520 мл + R2 125 мл

10 270 022 R1 580 мл + R2 1100 мл

Справка [1, 2]

Аланинаминотрансфераза (AЛАT/AЛT), ранее называвшаяся Глутамат-пируваттрансаминазой (GPT) и Аспартатаминотрансфераза (AСAT/AСT), ранее называвшаяся Глутамат-оксалоацетаттрансаминаза (GOT) – наиболее важные представители аминотрансфераз или трансаминаз (группы ферментов, катализирующих превращение -кетокислот в аминокислоты путем переноса аминогрупп). Значительное повышение AЛT происходит только при болезнях печени, так как это специфичный фермент. Однако, повышение уровня ACT может происходить в связи с повреждением сердечной или скелетных мышц, а также при повреждении паренхимы печени. Следовательно, параллельное измерение AСT и AЛT применяется для дифференциации повреждения печени от повреждения сердечной или скелетных мышц. Соотношение AСT к AЛT используется для дифференциальной диагностики болезней печени. Соотношение <1 указывает на слабое повреждение печени, тогда как соотношение >1 говорит о множественных, часто хронических заболеваниях печени.

Метод

Оптимизированный УФ тест в соответствии с ре­комендациями IFCC (Международная Федерация Клинической Химии и Лабораторной Медицины).

Принцип определения

L-Аланин + 2-Оксоглутарат  L-Глутамат+Пируват

Пируват + НAДH + H+ D-Лактат + НAД+

Реагенты

Компоненты и их концентрации в реакционной смеси

R1: Tрис, ммоль/л pH 7,15 100

L-Аланин, ммоль/л 500

ЛДГ (Лактатдегидрогеназа), Ед/л 1700

R2: 2-Оксоглутарат, ммоль/л 15

НAДH, ммоль/л 0,18

Стабильность и хранение

Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2–8°С, в защищенном от света месте. Не допускать за­грязнения. Не замораживать реагенты!

Меры предосторожности

1. В качестве консерванта реагенты содержат азид натрия (0.95 г/л). Не глотать! Избегать контакта реактивов с кожей и слизистыми.

2. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами.

Обезвреживание отходов

В соответствии с местными правилами.

Подготовка реагентов

Запуск реакции субстратом

Реагенты готовы к использованию.

Запуск реакции образцом

Смешать 4 части реагента 1 с одной частью реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) = монореагент.

Стабильность монореагента:

4 недели при 2–8°С;

5 дней при 15–25°С.

Монореагент хранить в темноте!

Необходимые материалы, не включенные в набор

• 0,9% раствор NaCl.

• Общее лабораторное оборудование.

Исследуемые образцы

• Сыворотка.

• Гепаринизированная или ЭДТА-плазма.

Стабильность:

3 дня при 15-25°С

7 дней при 4-8°С

7 дней при –20°С

Загрязненные образцы хранению не подлежат.

Процедура определения

Адаптации к автоматизированным системам запрашивайте дополнительно

Длина волны, нм 340,Hg 334, Hg 365

Длина опт. пути, см 1

Температура, °С 37

Измерение относительно

воздуха

Запуск реакции субстратом

Образец, мкл 100

Реагент 1, мкл 1000

Перемешать, инкубировать 5 мин, затем добавить:

Реагент 2, мкл 250

Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1, 2 и 3 мин.

Запуск реакции образцом

Образец, мкл 100

Монореагент, мкл 1000

Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1,2 и 3 мин.

Расчет

Из значений оптической плотности вычислить A/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы

A/минфактор = активность АЛТ [Ед/л].

Запуск реакции субстратом

340 нм 2143

334 нм 2184

365 нм 3971

Запуск реакции образцом

340 нм 1745

334 нм 1780

365 нм 3235

Калибраторы и контроли

Для калибровки автоматизированных фотомет-рических систем рекомендуется калибратор TruCal U компании DiaSys. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.




Кат. №

Фасовка

TruCal U

5 9100 60 10 060

13 мл

TruLab N

5 9000 60 10 060

15 мл

TruLab P

5 9050 60 10 060

15 мл

Рабочие характеристики

Диапазон измерений

Тест разработан для определения активности АЛТ, соответствующей изменению оптической плотности не более A/мин = 0,16 при 340 (диапазон измерения активности АЛТ составляет 4-600 Ед/л при запуске реакции образцом) и 334 нм или A/мин = 0,08 при 365 нм. Если значение превосходит верхнюю границу диапазона, необходимо развести образец изотоническим раствором NaCl (0,9%) в соотношении 1 + 9 и полученный результат умножить на 10.

Специфичность/Помехоустойчивость

аскорбиновая кислота до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл, гемоглобин до 400 мг/дл и липемия до 2000 мг/дл триглицеридов не влияют на точность анализа.

Чувствительность/Пределы определения

Нижний предел определения 4 Ед/л.
Воспроизводимость

(t = 37°C, число измерений n = 20)

Образец

Среднеарифметическое значение, Ед/л

SD, Ед/л

CV, %

Внутрисерийная

Образец 1

22,2

1,38

6,22

Образец 2

44,8

1,17

2,62

Образец 3

101

1,02

1,00

Межсерийная

Образец 1

22,8

0,70

3,08

Образец 2

42,6

0,68

1,60

Образец 3

99,3

0,92

0,92

Референсные значения [1, 3]

Женщины, Ед/л <31

Мужчины, Ед/л <41

Литература

1. Thomas L. Alanine aminotransferase (ALT), Aspartate aminotransferase (AST). In: Thomas L, editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 55-65.

2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p. 617-721.

3. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, Fйrard G et al. IFCC primary reference procedure for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37°C. Part 5: Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of alanine aminotransferase. Clin Chem Lab Med 2002; 40: 718-724.

4. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples. 1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 18-9.

Изготовитель

ЗАО «ДИАКОН-ДС»

142290, Московская область, г. Пущино,

ул. Грузовая, д. 1а

По лицензии «DiaSys Diagnostic Systems GmbH», Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany.

</1>

Похожие:

Аланинаминотрансфераза диас icon Аланинаминотрансфераза диас alat ( gpt ) DiaS ( ifcc mod.)
Аспартатаминотрансфераза (aсat/aсt), ранее называвшаяся Глутамат-оксалоацетаттрансаминаза (got) – наиболее важные представители...
Аланинаминотрансфераза диас icon Гамма-глутамилтрансфераза диас gamma gt diaS
Гт широко используется для исключения их гепатического или билиарного происхождения. Вместе с другими ферментами, такими как аланинаминотрансфераза...
Аланинаминотрансфераза диас icon Романская лексикография донаучного периода: глоссарии раннего Средневековья Испании и Франции
В связи с этим целесообразно обратить внимание, что до сих пор глоссарии изучались только в свете их родства с глоссами, толковыми...
Аланинаминотрансфераза диас icon Альбумин диас albumin DiaS
Набор реагентов для определения содержания альбумина в сыворотке и плазме крови
Аланинаминотрансфераза диас icon Рамон Менендес Пидаль Сид Кампеадор пер. М. Ю. Некрасов
Менендеса Пидаля посвящена национальному герою Испании — Родриго Диасу де Бивару, прозванному Сидом Кампеадором. Кастильский рыцарь...
Аланинаминотрансфераза диас icon Химизации и защиты растений фгбу «Владимирская государственная зональная...
Испытания проведены по государственному заданию на соответствие машины требованиям ту 4732-003-65866012-2013, утвержденных генеральным...

Руководство, инструкция по применению






При копировании материала укажите ссылку © 2024
контакты
rykovodstvo.ru
Поиск