ГАММА-ГЛУТАМИЛТРАНСФЕРАЗА ДиаС Gamma-GT DiaS (Szasz mod./IFCC stand.) 
Creatinine FS *
Набор реагентов для определения активности гамма-глутамилтрансферазы
кинетическим методом в сыворотке крови
Информация для заказа
Кат. №
|
Фасовка
|
SB 10 280 021
|
R1 2х68 мл + R2 2х17 мл
|
SB 10 280 022
|
R1 6х68 мл + R2 6х17 мл
|
Справка [1, 2]
Гамма-глутамилтрансфераза (гамма-ГТ), также называемая гамма-глутамилтранспептидазой – это фермент, присутствующий в печени и желчном протоке. Он является наиболее чувствительным индикатором гепатобилиарных заболеваний. Из-за высокого отрицательного прогностического значения для этих заболеваний, измерение гамма-ГТ широко используется для исключения их гепатического или билиарного происхождения. Вместе с другими ферментами, такими как аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ) и холинэстераза, гамма-ГТ является ценным инструментом для дифференциальной диагностики заболеваний печени [1].
Метод
Кинетический фотометрический тест в соответствии с методикой Зейца/Персиджина (1974) [2].
Тест также был стандартизован по методу в соответствии с IFCC [4]. Результаты в соответствии с IFCC получены при использовании специального фактора, или, если использовали калибратор (TruCal U), то использовали калибровочное значение для IFCC метода.
Принцип определения
Гамма-ГТ катализирует перенос глутаминовой кислоты на акцепторы, подобные глицилглицину, как в данном случае. При этом высвобождается 5-амино-2-нитробензоат, концентрацию которого можно измерить при 405 нм. Увеличение поглощения при этой длине волны прямо пропорционально активности гамма-ГТ.
L-Гамма-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид +
+ Глицилглицин  Гамма-глутамил-
глицилглицин + 5-Амино-2-нитробензоат
Реагенты
Компоненты и их концентрации в реакционной смеси
R1:
|
Tрис, ммоль/л (pH 8.25)
|
100
|
|
Глицилглицин, ммоль/л
|
100
|
R2:
|
L-Гамма-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид, ммоль/л
|
4
|
Стабильность и хранение
Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2–8°С. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты! Реагент 2 хранить в защищенном от света месте.
Меры предосторожности
1. В качестве консерванта реагенты содержат азид натрия (0.95 г/л). Не глотать! Избегать контакта реактивов с кожей и слизистыми.
2. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами.
Обезвреживание отходов
В соответствии с местными правилами.
Подготовка реагента
Запуск реакции субстратом
Реагенты готовы к использованию.
Запуск реакции образцом
Смешайте 4 части реагента 1 с одной частью реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) = монореагент.
Стабильность монореагента:
-
-
4 недели
|
при 2–8°C
|
5 дней
|
при 15–25°C
|
Монореагент хранить в темноте!
Необходимые материалы, не включенные в набор
• 0,9% раствор NaCl.
• Общее лабораторное оборудование.
Исследуемые образцы
• Сыворотка.
• Гепаринизированная плазма.
Стабильность [6]:
не менее 1 недели от –20°C до +25°C.
Загрязненные образцы хранению не подлежат.
Процедура определения
Адаптации к автоматизированным системам запрашивайте дополнительно
Длина волны, нм
|
405 (400 – 420)
|
Длина опт. пути, см
|
1
|
Температура, °C
|
37
|
Измерение
|
относительно холостой пробы
|
Запуск реакции субстратом
|
|
Образец
|
Холостая
проба
|
Образец/калибр., мкл
|
100
|
–
|
Дист. вода, мкл
|
–
|
100
|
Реагент 1, мкл
|
1000
|
1000
|
Перемешать, инкубировать 1 мин, затем добавить:
|
Реагент 2, мкл
|
250
|
250
|
Перемешать. Через 1 мин. измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1, 2 и 3 мин.
|
Запуск реакции образцом
|
Образец
|
Холостая проба
|
Образец/калибр., мкл
|
100
|
–
|
Дист. вода, мкл
|
–
|
100
|
Монореагент, мкл
|
1000
|
1000
|
Перемешать. Через 1 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плотность (А2) через 1, 2 и 3 мин.
|
Расчет
По фактору
Из значений оптической плотности вычислить ΔA/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы:
ΔA/мин х фактор = активность гамма-ГТ [Е/л]
|
по Szasz
|
по IFCC
|
Запуск субстратом (405 нм)
|
1421
|
1606
|
Запуск образцом (405 нм)
|
1158
|
1309
|
По калибратору
Гамма-ГТ [Е/л] =  х Конц. кал. [Е/л]
Контроли и калибраторы
В случае, если TruCal U используется в качестве калибратора, используйте соответствующие значение для Szasz метода и IFCC метода. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
|
Кат. №
|
Фасовка
|
TruCal U
|
5 9100 60 10 060
|
1х3 мл
|
TruLab N
|
5 9000 60 10 060
|
1х5 мл
|
TruLab P
|
5 9050 60 10 060
|
1х5 мл
|
Рабочие характеристики
Диапазон измерений
При использовании автоматических анализаторов тест позволяет определять активности гамма-ГТ в диапазоне измерений до 1200 Е/л.
В ручном режиме измерений тест применяется для определения активности гамма-ГТ, соответствующей максимальному значению ΔA/мин = 0.20. Если значение превосходит верхнюю границу диапазона, образец должен быть разведен 1 + 5 изотоническим раствором NaCl (9 г/л) и полученный результат должен быть умножен на 6.
Специфичность/Помехоустойчивость
аскорбиновая к-та до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл, гемоглобин до 400 мг/дл и липемия до
2000 мг/дл триглицеридов не влияют на точность анализа.
Чувствительность/Пределы определения
Нижний предел определения 2 Е/л.
Воспроизводимость
(t = 37°C, число измерений n = 20)
Образец
|
Среднеарифметическое значение, ммоль/л
|
SD, ммоль/л
|
CV, %
|
Внутрисерийная
|
Образец 1
|
39.9
|
0.99
|
2.48
|
Образец 2
|
73.6
|
0.85
|
1.16
|
Образец 3
|
206
|
1.32
|
0.64
|
Межсерийная
|
Образец 1
|
41.5
|
0.62
|
1.49
|
Образец 2
|
72.3
|
0.61
|
0.85
|
Образец 3
|
204
|
0.74
|
0.36
|
Нормальные величины
По Szasz [5]
|
Женщины < 32 Е/л;
|
Мужчины < 49 Е/л
|
По IFCC
|
Женщины
|
Мужчины
|
Взрослые, Е/л [4]
|
< 38
|
< 55
|
Дети/ подростки, Е/л [1]
|
|
1 день – 6 мес
|
15 – 132
|
12 – 122
|
|
6 мес – 1 год
|
1 – 39
|
1 – 39
|
|
1–12 лет
|
4 – 22
|
3 – 22
|
|
13–18 лет
|
4 – 24
|
2 – 42
|
Литература
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 80-86.
2. Persijn JP, van der Silk W. A new method for the determination of gamma-glutamyltransferase in serum. J Clin Chem Clin Biochem 1976; 14: 421-427.
3. Szasz G. Gamma-Glutamyltranspeptidase. In: Bergmeyer HU. Methoden der enzymatischen Analyse. Weinheim: Verlag Chemie, 1974. p. 757.
4. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, Fйrard G et al. IFCC primary reference procedure for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37°C. Part 5: Reference procedure for the measurement of catalytic concentration of g-glutamyltransferase. Clin Chem Lab Med 2002; 40: 734-738.
5. Fischbach F, Zawta B. Age-dependent reference limits of several enzymes in plasma at different measuring temperatures. Klin Lab 1992; 38: 555-561.
6. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples. 1 st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 30-1.
Разрешено к обращению на территории Российской Федерации РУ № ФСР 2011/11407
Система менеджмента качества сертифицирована на соответствие требованиям: ISO 9001:2008, EN ISO 13485:2012, ГОСТ ISO 9001-2011, ГОСТ ISO 13485-2011
 Допущено к обращению на территории Европейского Союза
Авторизованный представитель ЗАО «ДИАКОН-ДС» в ЕС
CE-partner4U
ESDOORNLAAN 13, 3951DB MAARN, THE NETHERLANDS
Изготовитель
ЗАО «ДИАКОН-ДС»
142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а.
По лицензии
«DiaSys Diagnostic Systems GmbH», Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany. Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany.
http://www.diakonlab.ru
E-mail: sale@diakonlab.ru
Тел.: (495) 980-63-39
Тел./факс: (495) 980-66-79
|
