3.1.5.2.1. Типичные ошибки, возникающие при работе
с вакуумными контейнерами
1. Кровь не поступает в пробирку.
Возможная причина:
Конец иглы вплотную прилегает к стенке вены.
Игла проколола вену насквозь.
Игла не полностью вошла в вену.
Жгут затянут слишком туго или намного выше места взятия крови.
Способ решения проблемы.
Аккуратно поверните иглу, не вынимая иглу из вены.
Аккуратно потяните иглу вместе с иглодержателем, не вынимая иглу из вены.
Аккуратно надавите на иглу вместе с иглодержателем, не вынимая иглу из вены.
Снять жгут.
Заменить пробирку на новую.
Пробирка уже использовалась либо была предварительно открыта, либо пробка пробирки была проколота до того, как игла вошла в вену.
2. Ток крови быстро прекращается, не наполнив пробирку.
Возможная причина:
Пробирка была слишком быстро снята с иглы и вынута из держателя.
Всасывание крови в пробирку слишком быстро для вены (коллапс вены).
Игла повредила вену в процессе венепункции или игла прошла вену насквозь.
Способ решения проблемы.
Вставьте пробирку обратно на иглу и оставьте до тех пор, пока в пробирке полностью не компенсируется вакуум (наполнив пробирку, ток крови прекратится);
Вытащите пробирку из держателя на секунду, а затем снова ее вставьте.
Повторите венепункцию в другом месте, где нет гематомы.
3. Гемолиз крови в пробирке.
Возможная причина:
Слишком сильное сдавливание вены (больше 1 минуты).
Перенос крови в пробирку с помощью шприца.
Слишком интенсивное перемешивание образца.
Пробирка неадекватно заполнена.
Способ решения проблемы.
Наложение жгута не более 1 минуты.
Использование специально двусторонней иглы для вакуумных пробирок.
Аккуратно перевернуть пробирку 6–8 раз.
После забора крови процедурная медсестра пункта дистанционного забора крови указывает дату и время забора крови, и ставит свою подпись в направлении (в ИДЦ эти условия введены в ЛИС и контролируются автоматически).
3.1.5.3. Центрифугирование образцов крови
Центрифугирование свернувшейся крови для получения сыворотки или плазмы производится в течение 10–15 минут при ускорении от 1000 до 2000 g. Для получения плазмы, свободной от тромбоцитов, требуется центрифугирование в течение 15–30 минут пи 2000–3000 g. При исследовании свертывания цитратную цельную кровь следует центрифугировать при 2000 g в течение 15 минут. Температура 20–22 °С.
Образцы не должны подвергаться повторному центрифугированию после отбора проб сыворотки или плазмы.
Образцы, взятые в пробирки с разделительным гелем, никогда не следует подвергать повторному центрифугированию.
Убедитесь, что пробирки вставлены в ротор таким образом, что крышка не опирается на стенки стакана центрифуги, иначе крышка может соскочить с пробирки.
Визуальный контроль адекватности центрифугирования перед проведением анализа (рис. 24).
Рис. 24. Визуальный контроль центрифугирования образцов крови. Слева направо: недостаточная скорость центрифугирования; достаточная скорость.
Расчет ОЦС.
ОЦС (относительная центробежная сила) измеряется относительно дна пробирки при ее горизонтальном положении (ротор центрифуги имеет свободно вращающиеся головки).
Для расчета ОЦС используется следующая формула:
ОЦС= 1,118 х 10–5 х rpm2 х r (см),
где rpm — количество оборотов в минуту, а r — радиус.
Пример расчета:
1,118 х16 (см) х (3000)2 (об/мин) :100000 = 1609,9 g
Примечание: радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки при ее максимально удаленном расположении.
3.1.5.4.Обработка после центрифугирования
Аликвоты из первичной пробирки должны обрабатываться в соответствии с теми же правилами, что и первичная проба, в отношении их идентификации, условий хранения и правил безопасности.
Для предупреждения контакта с кровью разделение первичной пробы следует избегать, насколько это возможно.
Процесс обработки проб облегчается при использовании пробирок с разделительным гелем.
Влияние примеси тромбоцитов, вызванное недостаточным временем центрифугирования и центробежной силой, применительно к гепаринизированной крови. Пробы плазмы с примесью тромбоцитов дают ложное завышение результатов.
Основные критические этапы перекрестного загрязнения проб (при использовании стеклянной центрифужной пробирки) составляют около 60 % ошибок на внелабораторном этапе, даже при заборе крови в вакуумную систему. Поэтому обращаем особое внимание на процессы, связанные с аликвотированием образцов.
Угрозу ложноположительного или отрицательного результатов при аликвотировании образцов представляют:
Грязная пробирка.
Использование одной стеклянной палочки для обведения сгустка.
Использование «пастеровской» пипетки для переноса образца во вторичную пробирку.
Многократное использование одноразовых наконечников для переноса образца во вторичную пробирку.
Многократное использование пробирок для хранения аликвот.
Охлаждение и замораживание: АКТГ может быть стабилизирован только помещением контейнера с образцом на лед немедленно после взятия крови, и пробирки должны быть подвержены быстрому центрифугированию (в центрифуге с охлаждением при 4 °С). Сыворотка для определения АКТГ хранится замороженной до исследования.
Быстрая подготовка образца (не более 4 часов при 15–25 °С). Особенно критично продление подготовки для инсулина, С–пептида, паратгормона, но это желательное условие для всех аналитов.
Разрешается только однократное замораживание образцов. Исключение: РЭА, общий P1NP, ВИЧ комби, HIV Ag, Anti–HAV, Anti–HBe, Анти–HBc IgM.
Размороженные пробы или содержащие осадки пробы, используемые для повторных исследований, необходимо центрифугировать перед проведением анализа.
Перед измерением необходимо довести сыворотки пациентов, калибраторы и контроли до температуры окружающей среды 20 – 25°С.
3.1.5.5. Хранение и транспортировка образцов крови
Нельзя хранить цельную кровь! Кровь должна быть центрифугирована через 30–45 минут после взятия в пункте дистанционного забора крови. Или пробы крови должны быть доставлены в лабораторию в течение 45 минут после взятия крови, чтобы центрифугирование и разделение пробы было выполнено в течение 1 часа.
Избегайте влияния гликолиза для сохранения стабильности глюкозы, лактата и рН (гликолиз может быть предотвращен добавлением ингибитора в комбинации с антикоагулянтом).
Избегайте воздействия света (падение уровня билирубина, витамина С, порфиринов, креатинкиназы и фолиевой кислоты).
Предотвратите контакт с воздухом (заметное увеличение концентрации нелетучих компонентов).
Для исследования определенных аналитов пробы не должны замораживаться (см. инструкции).
Правильное оттаивание образца позволяет избежать ошибок (создаются градиенты концентраций, концентрированные растворы оттаивают первыми и затем опускаются вниз по стенкам сосуда). После оттаивания сосуд с пробой следует перевернуть несколько раз, избегая образования пены!
Хранение проб должно обеспечить их быструю реидентификацию, для проведения подтверждающих тестов.
Избегайте воздействия прямого солнечного света, особенно при высоких температурах (около +50 °С).
Храните пробирки при температуре +4°– +25°С.
Избегайте складирования вблизи отопительных приборов.
При транспортировке избегайте температур ниже –15 °С и выше +40 °С.
Избегайте хранения при температуре ниже 0 °С – особенно содержащих гель пробирок для сыворотки. Если пробирки хранились ниже 0 °С, то перед использованием их необходимо хотя бы два дня подержать при комнатной температуре.
3.1.5.6. Условия для взятия образцов мокроты
Мокрота используется при доставке из пункта дистанционного забора биологического материала, в основном, для ПЦР–анализа. Для сбора мокроты используются общеизвестные правила:
Свободно отделяемая (отхаркиваемая) мокрота – предпочтителен утренний сбор.
Перед сбором пробы пациент, если это возможно, должен почистить зубы и сполоснуть рот и горло теплой кипяченой водой, если пациент не в состоянии сделать это сам, то туалет его ротовой полости осуществляет медицинский работник.
Необходимо предупредить больного, чтобы он не собирал в контейнер слюну или носоглоточное отделяемое.
Пробу мокроты, полученную в результате глубокого кашля, собирают в специальный стерильный одноразовый контейнер с завинчивающей крышкой или в специальным образом подготовленную стерильную стеклянную банку.
Пробу мокроты передают в лабораторию в специально полученных для этого емкостях.
3.1.5.7. Условия для взятия образцов мочи
|
