Химия растительного сырья. 2013. №3. С. 173-176. Doi: 10. 14258/jcprm. 1303173
|
Скачать 90.22 Kb.
|
|
Химия растительного сырья. 2013. №3. С. 173–176. DOI: 10.14258/jcprm.1303173 УДК 633.88ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГАЛЛОВОЙ КИСЛОТЫ В МНОГОКОМПОНЕНТНЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ СРЕДСТВАХ МЕТОДОМ ВЭЖХ© П.Б. Лубсандоржиева1*, Н.Б. Болданова2, Д.В. Попов21Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН,
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
Лубсандоржиева Пунцык-Нима Базыровна – старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований, кандидат фармацевтических наук, e-mail: bpunsic@mail.ru Болданова Наталья Батлаевна – старший научный сотрудник лаборатории химии природных систем, кандидат биологических наук Попов Дмитрий Витальевич – аспирант лаборатории химии природных систем |
Для определения ГК в растительных, пищевых и технических объектах применяют спектрофотометрический, ТСХ-денситометрический, электрофоретический, ВЭЖХ [7, 8] методы.
Цель данной работы – определение количественного содержания галловой кислоты в многокомпонентных растительных средствах методом ВЭЖХ.
Экспериментальная часть
В состав сбора №1 для лечения алкогольного гепатита и абстинентного синдрома входят листья Vaccinium vitis-idaea L. и Mentha piperita L., трава Gnaphalium uliginosum L.s.l., плоды Rosa и Crataegus, корневища и корни Inula helenium L., корни Eleutherococcus senticosus Rupr. Et Maxim. В состав сбора №2 для лечения патологического влечения к алкоголю входят корневища Acorus calamus L., трава Achillea millefolium L., Artemisia absinthicum L., Thymus vulgaris L., цветы Tanacetum vulgaris L., листья Urtica dioica L. В состав сбора № 3 для лечения алкогольного гепатита с сопутствующим колитом входят черные листья и корни Bergenia сrassifolia (L.) Fritsch., листья M. piperita L., цветки Calendula officinalis L., побеги Pentaphylloides fruticosa (L.) Schwarz, M., корни Scutellaria baicalensis Georgi. В состав сбора №4 для лечения и профилактики гиперлипидемии входят черные листья B. сrassifolia, цветки Matricaria recutita L., трава Polygonum aviculare L., плоды Rosa L. и Crataegus L., корни A. calamus L. и Taraxacum officinale Wigg. В состав сбора №5 для лечения и профилактики язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки входят цветки C. officinalis L., плоды Rosa L., Coriandrum sativum L., Hippophae rhamnoides L., и Crataegus L., корни и корневища I. helenium L., Glyсyrrhiza glabra L., листья Plantago major L., трава Gnaphalium uliginosum L. В состав сбора № 6 для лечения и профилактики хронического колита входят черные листья B. сrassifolia, листья M. piperita, цветки M. recutita, трава A. millefolum L. В состав эритрофита входят экстракты сухие из травы A. millefolium L., P. aviculare L., листьев U. dioica L., мелкоизмельченные порошки из корневищ Zingiber officinalis Roscoe, коры Cinnamomum cassia L. Фармакопейное сырье для сборов приобретено в аптечной сети, листья B. crassifolia собраны в осенне-весенний период на хребте Хамар-Дабан (Иволгинский район) и Улан-Бургасы (Прибайкальский район) в Бурятии в период 2008–2010 гг.
3–5 г сбора (точная навеска) или 1 г (точная навеска) средства, содержащего экстракты сухие, обрабатывали дважды по 25 мл гексана, затем по 25 мл хлороформа (3-кратная экстракция) для удаления липофильных веществ. Шрот экстрагировали последовательно 80%, 40% этиловым спиртом, трижды горячей водой по 25 мл, извлечения отфильтровали, спирт удалили, водный остаток концентрировали до 10–15 мл. Водный остаток обработали 30 мл этилацетата (пятикратно), извлечения отделяли от водного слоя, растворитель удалили, сухой остаток этилацетатной фракции растворили в 10–50 мл (точный объем) 96% этилового спирта.
0,001 г (точная навеска) хроматографически чистого образца галловой кислоты растворили в 10 мл 96% спирта этилового, путем разведения приготовили раствор ГК с концентрацией 10 мкг/мл.
Качественный и количественный состав в исследуемых образцах определяли методом ВЭЖХ-МС, с помощью высокоэффективного жидкостного хроматографа марки «Agilent 1200», с тандемным масс-спектрометрическим детектором «ионная ловушка» 6330, способ ионизации электроспрей. Колонка Zorbax Eclipse C18, 5 мкм, 4,6150 мм. Элюирование проводили в градиентном режиме, в качестве подвижной фазы использовали смесь 0,1% раствора муравьиной кислоты и ацетонитрила в соотношении (1 : 0, 1 : 9, 9 : 1). Объемная скорость потока элюента – 1,0 мл/мин, объем вводимой пробы 10 мкл, время элюирования 30 мин. Анализ проводился в режиме регистрации отрицательных ионов, по полному ионному току TIC, по массовым зарядам характеристических (МS) и дочерних (МS2) отрицательных ионов, режим UltraScan 50–1300 m/z, AutoMS.
В хроматограф вводили по 20 мкл исследуемых растворов и раствора галловой кислоты, хроматографировали в выше приведенных условиях при 212 нм.
ТСХ анализ ГК в изучаемых объектах проводили на пластинках с силикагелем в системах растворителей хлороформ – этилацетат – уксусная кислота (50 : 50 : 1) (I), этилацетат – муравьиная кислота – уксусная кислота – вода (100 : 11 : 11 : 26) (II), гексан – этилацетат – муравьиная кислота (15 : 9 : 2) (III). Объем пробы этилацетатной фракции, наносимой на пластинку – 0,05 мл, проявляющий реагент – 1% ванилин в серной кислоте (конц.) Количественное содержание таннинов в водных извлечениях средств определено перманганатометрическим методом.
Обсуждение результатов
ГК проявляется на пластинках с силикагелем на уровне достоверного образца в виде пятна серого (видимый свет), коричневого (в УФ свете до проявления реагентом) и фиолетово-красного цвета (в УФ свете после проявления) с Rf – 0,20–0,26 (I), 085–0,95 (II), 0,26–0,35 (III) в этилацетатной фракции сборов №3, 4, 5, 6, эритрофите и не обнаруживается в сборах №1, 2.
Данные анализов этилацетатной фракции исследуемых объектов методом ВЭЖХ приведены в таблице.
Содержание таннинов и галловой кислоты в многокомпонентных сборах и эритрофите
Наименование |
Содержание танинов*, в % |
Содержание галловой кислоты (метод ВЭЖХ) |
|
RT, мин |
Содержание галловой кислоты, мкг / в 1 г средства** |
||
Сбор 1 |
3,52±0,01 |
2,3–2,7 |
2,586 |
Сбор 2 |
4,32±0,08 |
2,3–2,5 |
1,666 |
Сбор 3 |
7,53±0,31 |
2,2–2,9 |
3,139 |
Сбор 4 |
3,00±0,01 |
2,3–2,8 |
4,206 |
Сбор 5 |
2,20±0,01 |
2,4–2,7 |
5,834 |
Сбор 6 |
9,45±0,11 |
2,3–2,8 |
8,501 |
Эритрофит |
4,72±0,03 |
1,7–2,7 |
43,754 |
Примечание: * – перманганатометрический метод; ** – среднее из трех определений.
ГК (стандартный образец) элюируется при 2,5 мин, из исследуемых растворов при 1,7–2,9 мин (табл.). Структурную идентификацию ГК (М.в. 170) проводили по данным МС-, УФ-спектроскопии: пики с m/z 169 [M-H]+, m/z 125 [М-H–CO2] являются индикаторами триоксифенольной части молекулы ГК и соответствуют ее молекулярной формуле – С7H6О5. В УФ-спектрах ГК, обнаруженной в этилацетатных фракциях исследуемых средств, наблюдается характерная для этого вещества полоса поглощения при 212–220, 269–270 нм.
В сборе №1 источником ГК являются листья V. vitis-idaea [9], M. piperita [10]. Высоким содержанием ГК отличаются сборы № 3, 4, 6, в состав которого входят черные листья B. сrassifolia содержащие ГК в свободном виде, а также в больших количествах галлотаннины, в которых ГК является структурным звеном [11]. Галлотаннины содержатся и в других компонентах сборов: V. vitis-idaea, C. sativum, Z. officinale, T. vulgaris [12]. В составе сбора №5 источниками cвободной ГК являются C. sativum и H. rhamnoides [13, 14]. В плодах H. rhamnoides ГК содержится в свободном виде и в составе сложных эфиров [14]. Листья U. dioica являются источником свободной ГК [15] в сборе №2 и эритрофите.
Выводы
Таким образом, наибольшее количество галловой кислоты содержится в сборах, в состав которых входят листья Bergenia crassifolia (L.) Fritsch., Urtica dioica L., Mentha piperita L., плоды Hippophae rhamnoides L.
Список литературы
Kumagai J., Kawaura T., Miyazaki T., Prost M., Prost E., Watanabe M., Quetin-leclercq J. Test for antioxidant ability by scavenging long-lived mutagenic radicals in mammaliam cells and by blood test with intentional radicals: an application of gallic acid // Radiation Physics and Chemistry. 2003. Vol. 66. Pp. 17–25.
Niho N., Shibutani M., Tamura T., Toyoda K., Uneyama C., Tanahashi N., Hirose M. Subchronic toxicity study of gallic acid by oral administration in F344 rats // Food and Chemical Toxicology. 2001. Vol. 39, N11. Pp. 1063–1070.
Giftson J.S., Jayanthi S., Nalini N. Chemopreventive efficacy of gallic acid, an antioxidant and anticarcinogenic polyphenol, against 1,2-dimethyl hydrazine induced rat colon carcinogenesis // Invest New Drugs. Preclinical studies. 2009. 10 pp.
Yen G.-C., Duh P.-D., Tsai H.-L. Antioxidant and pro-oxidant properties of ascorbic acid and gallic acid // Food Chemistry. 2002. Vol. 79. Pp. 307–313.
Yoshino M., Haneda M., Naruse M., Htay H.H., Iwata S., Tsubouchi R., Murakami K. Prooxidant action of gallic acid compounds: copper-dependent strand breaks and the formation of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine in DNA // Toxicology in vitro. 2002. Vol. 16. Pp. 705–709.
Zong Li, Makoto I., Mitsuhiko N., KeisukeK., Nahoko S., Kasuto I., Tahahiro T., Yukio O. Metabolic fate of gallic acid orally administered to rats // Biol. and Pharm. Bull. 1999. Vol. 22. N3. Pp. 326–329.
Гунькин И.Н. Оценка качества коньяков электрофоретическим и спектроскопическим методами: автореф. дис. … канд. хим. наук. Краснодар, 2010. 25 с.
Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Руководство Р.4.1.1672-03. М., 2003.
Yan W., Zhou L., Deng G., Wang P., Creech D., Li S. Anthocyanins, phenolics, and antioxidant capacity of Vaccinium L. in Texas, USA // Pharmaceutical crops. 2011. Vol. 2. Pp. 11–23.
Зинченко Л.А. Изучение промышленных отходов фармацевтического производства как дополнительных источников биологически активных соединений (на примере шрота плодов боярышника и шрота листьев мяты) : автореф. дис. … канд. фарм. наук. Пятигорск, 2007. 19 с.
Лубсандоржиева П.Б. Фитохимическая характеристика листьев бадана толстолистного и получение адаптогенного средства : автореф. дис. … канд. фарм. наук. Улан-Удэ, 1997. 18 с.
Suhaj M. Spice antioxidant isolation and their antiradical activity: a review. // Journal of Food Composition and Analysis. 2006. Vol. 19. Pp. 531–537.
Нерсесян З. М. Химическое исследование травы кориандра посевного (Coriandrum sativum) с целью получения фармакологически активных веществ : автореф. дис. … канд. фарм. наук. Пятигорск, 2007. 23 с.
Zadernowski R., Naczk M., Czaplicki S., Rubinskene M., Szatkiewicz M. Composition of phenolic acids in sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) berries // JAOCS. 2005. Vol. 82. Pp. 175–179.
Головкин Б.Н., Руденская Р.Н., Трофимова И.А., Шретер А.И. Биологически активные вещества растительного происхождения. М., 2001. Т. 1. 350 с.; Т. 2. 764 с.
Поступило в редакцию 12 сентября 2012 г.
Lubsandorzhieva P.B.1*, Boldanova N.B.2, Popov D.V.2 DETERMINATION OF GALLIC ACID IN MULTICOMPONENT PREPARATIONS BY HPLC METHOD
1Institute of General and Experimental Biology, Siberian Branch, Russian Academy of Sciences, ul. Sakh"ianovoi, 6, Ulan-Ude, 670047 (Russia)
2The Baikal Institute of Nature Management Siberian Branch, Russian Academy of Sciences, ul. Sakh"ianovoi, 6, Ulan-Ude, 670047 (Russia), e-mail: bpunsic@mail.ru
The content of gallic acid in multicomponent remedies is defined by HPLC method. The greatest number of gallic acid contains in remedy including leaves of Bergenia crassifolia (L.) Fritsch., Urtica dioica L., Mentha piperita L., fruits of Hippophae rhamnoides L.
Keywords: gallic acid, HPLC, Bergenia crassifolia (L.) Fritsch., Urtica dioica L., Mentha piperita L., Hippophae rhamnoides L.
References
Kumagai J., Kawaura T., Miyazaki T., Prost M., Prost E., Watanabe M., Quetin-leclercq J. Radiation Physics and Chemistry, 2003, vol. 66, pp. 17–25.
Niho N., Shibutani M., Tamura T., Toyoda K., Uneyama C., Tanahashi N., Hirose M. Food and Chemical Toxicology, 2001, vol. 39, no. 11, pp. 1063–1070.
Giftson J.S., Jayanthi S., Nalini N. Invest New Drugs. Preclinical studies, 2009. 10 pp.
Yen G.-C., Duh P.-D., Tsai H.-L. Food Chemistry, 2002, vol. 79, pp. 307–313.
Yoshino M., Haneda M., Naruse M., Htay H.H., Iwata S., Tsubouchi R., Murakami K. Toxicology in vitro, 2002, vol. 16, pp. 705–709.
Zong Li, Makoto I., Mitsuhiko N., KeisukeK., Nahoko S., Kasuto I., Tahahiro T., Yukio O. Biol. and Pharm. Bull., 1999, vol. 22, no. 3, pp. 326–329.
Gun'kin I.N. Otsenka kachestva kon'iakov elektroforeticheskim i spektroskopicheskim metodami: avtoref. dis. … kand. khim. nauk. [Assessment of quality cognacs electrophoretic and spectroscopic methods: the dissertation author's Ph.D.]. Krasnodar, 2010. 25 p. (in Russ.).
Rukovodstvo po metodam kontrolia kachestva i bezopasnosti biologicheski aktivnykh dobavok k pishche. Rukovo-dstvo R.4.1.1672-03. [Guidance on how to control the quality and safety of dietary supplements to food. Guide R.4.1.1672-03.]. Moscow, 2003. (in Russ.).
Yan W., Zhou L., Deng G., Wang P., Creech D., Li S. Pharmaceutical crops., 2011, vol. 2, pp. 11–23.
Zinchenko L.A. Izuchenie promyshlennykh otkhodov farmatsevticheskogo proizvodstva kak dopolnitel'nykh is-tochnikov biologicheski aktivnykh soedinenii (na primere shrota plodov boiaryshnika i shrota list'ev miaty): avtoref. dis. … kand. farm. nauk. [The study of industrial waste pharmaceutical production as additional sources of biologically active compounds (for example, hawthorn fruit meal and meal mint leaves): the dissertation author's Ph.D.]. Pyatigorsk, 2007, 19 p. (in Russ.).
Lubsandorzhieva P.B. Fitokhimicheskaia kharakteristika list'ev badana tolstolistnogo i poluchenie adaptogennogo sredstva: avtoref. dis. … kand. farm. nauk. [Phytochemical characterization crassifolia leaves and getting adaptogenic means: the dissertation author's Ph.D.]. Ulan-Ude, 1997, 18 p. (in Russ.).
Suhaj M. Journal of Food Composition and Analysis, 2006, vol. 19, pp. 531–537.
Nersesian Z.M. Khimicheskoe issledovanie travy koriandra posevnogo (Coriandrum sativum) s tsel'iu polucheniia farmakologicheski aktivnykh veshchestv: avtoref. dis. … kand. farm. nauk. [Chemical study of grass seed coriander (Coriandrum sativum) to produce pharmacologically active substances: the dissertation author's Ph.D.]. Pyatigorsk, 2007, 23 p. (in Russ.).
Zadernowski R., Naczk M., Czaplicki S., Rubinskene M., Szatkiewicz M. JAOCS, 2005, vo l. 82, pp. 175–179.
Golovkin B.N.,. Rudenskaia R.N, Trofimova I.A., Shreter A.I. Biologicheski aktivnye veshchestva rastitel'nogo proiskhozhdeniia. [Biologically active substances of plant origin.]. Moscow, 2001, vol. 1, 350 p.; vol. 2, 764 p. (in Russ.).
Received September 12, 2012
* Автор, с которым следует вести переписку.
* Corresponding author.
Похожие:
 |
Г Основы заготовительного процесса растительного сырья (сбор, первичная... Заготовка лекарственного растительного сырья является многогранным процессом, охватывающим цикл операций, начиная со сбора и заканчивая... |
 |
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
|
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
|
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
|
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
|
Фармакогнозия Под подлинностью лекарственного растительного сырья понимают соответствие сырья Под доброкачественностью лекарственного растительного сырья понимают соответствие сырья |
|
Химия растительного сырья Гальбрайх, А. Ф. Гоготов, И. П. Дейнеко, В. А. Елкин, А. А. Ефремов, В. И. Комаров, С. Г. Маслов, А. И. Михайлов, Р. З. Пен, С. М.... |
|
Заготовка сырья дикорастущих и культивируемых лекарственных растении Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение лекарственного растительного сырья |
|
Курсовая работа по аптечной технологии лекарств на тему: «Современные... «Современные экстракционные лекарства из растительного сырья. Лекарственные формы» |
|
Общая фармакопейная статья Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов осуществляется в соответствии с офс «Хранение... |
|
Бизнес-план развитие предприятия по сбору и переработке растительного... Обоснование рентабельности развития предприятия по сбору, переработке и экспорту для реализации на территории Российской Федерации... |
|
Ростехнадзор приказ «Требования к применению взрыворазрядителей на оборудовании взрывопожароопасных производственных объектов хранения и переработки... |
|
Школы двфу школа биомедицины Заведующий кафедрой продуктов питания из растительного сырья и технологии живых систем |
|
Основной документ, регламентирующий приемку фасованного лрс Под доброкачественностью лекарственного растительного сырья понимают соответствие его |
|
2. Место производственной практики в структуре ооп бакалавриата Кафедра: Товароведение, технология сырья и продуктов животного и растительного происхождения имени С. А. Каспарьянца |
|
Поручителе Оглавление Приложение № Информация о Поручителе 172 Оглавление 173 Ii. Основная информация о финансово-экономическом состоянии поручителя 176 |