Инструкция о мероприятиях по борьбе со случной болезнью одно- копытных Общие положения
|
Скачать 110.15 Kb.
|
|
14.01.97 г__ № __13-4-2/819____ ИНСТРУКЦИЯ О мероприятиях по борьбе со случной болезнью одно- копытных 1. Общие положения. Случная болезнь (дурина) инвазионная болезнь лошадей, ослов, мулов, вызывае-мая Trypanosoma equiperdum протекает преимущественно хронически. Заражение животных происходит, в основном, половым путем, при искусствен-ном осеменении спермой, содержащей возбудителя, а также механическим - через предметы ухода, руки, различные инструменты (влагалищное зеркало, мочевой катетер, искусственная вагина.). Заболевание животных случной болезнью наблюдают в любое время года. Бо-лезнь характеризуется длительным (3-4 нед) инкубационным периодом, появле-нием отеков половых органов, вымени, живота (отечный брус), язв, депигмента-цией кожи, бляшек, парезов, параличей губ, ушей и расстройством координации движения. При патологоанатомическом исследовании отмечают истощение, де-генеративные изменения в мышцах сердца, крупа и задних конечностей. 1.4 Диагноз на случную болезнь однокопытных устанавливают на основании эпи-зоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов ла-бораторных исследований (микроскопического, серологического). 1.5 В лабораторию для исследования на случную болезнь направляют соскобы с примесью крови из различных мест слизистой оболочки влагалища, мочеиспуска-тельного канала, сперму, экссудат из надрезов отеков и бляшек. Соскобы из различных мест слизистой оболочки уретры берут с помощью урет-ральной ложки. Для этого жеребца фиксируют и вводят внутримышечно в область крупа рометар в дозе 7,5 см3 на 100 кг массы тела. Через 7-10 мин вводят урет-ральную ложку на глубину 5-6 см и делают 3-4 возвратно-поступательных движе-ния по стенке уретры. После чего уретральную ложку осторожно извлекают, опускают материал в пробирку с 2 см3 физиологического раствора рН 7,0-7,2 и закрывают пробкой. Сперму от жеребцов получают на искусственную вагину в хозяйстве, переливают в стерильные пробирки (флаконы) по 2см3 и закрывают пробками. Соскобы со стенок влагалища берут уретральной ложкой через влагалищное зер-кало. Материал опускают в пробирку с 2 см3 физиологического раствора рН 7,0-7,2 и закрывают пробкой. Экссудат из надрезов отеков и бляшек собирают шприцем, переносят в пробирку и закрывают пробкой. 1.6 Для серологического исследования направляют 1-2 см3 сыворотки крови, на-тивной или консервированной 5 %-ным раствором фенола (1 капля на 1см3 сыво-ротки) или сухой борной кислотой (2-4% к объему). 1.7 Отобранный патологический материал в пробирках, доставляют в лаборато-рию в термосе со льдом не позднее 4-х часов, сыворотку крови - не позднее 2 дней с момента взятия. 1.8 Исследования биологического материала проводят согласно действующим ме-тодическим указаниям по лабораторным исследованиям на трипаносомозы лоша-дей, верблюдов, ослов, мулов и собак. 1.9 Результаты обследования лошадей. 1.9.1 Больными считают животных при наличии одного из следующих показате-лей: обнаружение трипаносом в мазках из исходного материала, обнаружение характерных для случной болезни клинических признаков (бляшки, парезы, параличи губ, ушей, зада, характерная депигментация, отеки половых губ и др) при отрицательных результатах микроскопического и серологического ис-следований; получение положительного серологического исследования; получе-ние дважды сомнительного серологического исследования. 1.9.2 Подозрительными по заболеванию считаются лошади: имеющие неясные клинические признаки при отрицательных результатах сероло-гических исследований, бывшие в случке с больными; давшие в РСК один раз сомнительный результат при трехкратном исследовании. Повторно на случную болезнь лошадей исследуют серологическим методом через 30 дн. 2. Мероприятия по предупреждению заболевания лошадей случной болезнью 2.1 В целях профилактики случной болезни необходимо: - комплектовать коневодческие хозяйства (фермы) лошадьми из благополучных хозяйств-поставщиков; - не допускать к случке племенных жеребцов с кобылами (конематками), не про-веренными на случную болезнь в РСК; - перед случкой клинически и серологически обследовать на случную болезнь племенных и пользовательных взрослых однокопытных животных дважды с ин-тервалом 30 дней; 2.2 Животных, вновь поступивших из других хозяйств, содержат изолированно не менее 30 дней, подвергают тщательному клиническому осмотру, микроскопи-ческому и серологическому исследованиям. 2.3 В случае выявления среди завезенных животных больных, положительно и сомнительно реагирующих в РСК, всю партию лошадей убивают. 2.4 На случных пунктах обслуживающий персонал при искусственном осемене-нии животных должен использовать одноразовые полиэтиленовые перчатки и пи-петки. Инструменты, применяемые для отбора материала, дезинфицируют путем кипячения в течение 10-15 мин. Подставных кобыл (на которых получают спер-му) в обязательном порядке обследуют на случную болезнь клинически и сероло-гически. 2.5 Для получения спермы за каждым жеребцом закрепляют отдельную искусст-венную вагину. 2.6 Ректальное исследование кобыл проводят в перчатках разового применения. 3. Мероприятия, проводимые в неблагополучном хозяйстве. 3.1 При установлении диагноза хозяйство (ферму) объявляют неблагополучным по случной болезни и в нем решением администраций района вводят ограниче-ния. При этом запрещают ввод в хозяйство и вывод из него лошадей, ослов, мулов для племенных и пользовательных целей, а также перегруппировку их внутри хо-зяйства. 3.2 Взрослое поголовье лошадей, ослов и их гибридов неблагополучного хозяйст-ва подвергают клиническому, микроскопическому и серологическому исследова-ниям. Больных, положительно и дважды сомнительно реагирующих в РСК, жи-вотных убивают, а подозрительных по заболеванию случной болезнью содержат изолированно и вновь обследуют микроскопическим и серологическим методами с интервалом 30 дн до получения трехкратного отрицательного результата по группе. 3.3 В неблагополучных хозяйствах ведут точный учет жеребцов (ослов, мулов), кобыл, идущих в случку. 3.4.Мясо больных и положительно реагировавших животных перерабатывают в вареные колбасы согласно п. 5.1 действующих Правил ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продук-тов. При истощении животного или обнаружении дистрофических изменений в мы-шечной ткани, мясо и внутренние органы направляют на утилизацию. Шкуры от павших и вынужденно убитых больных животных выпускают без ог-раничений. 3.5.После каждого случая выделения зараженного животного и убоя его, а также перед снятием ограничений помещения, предметы ухода, оборудование считают от навоза, моют и подвергают дезинфекции одним из следующих препаратов: 2 %-ный раствор натра едкого, 2 %-ный раствор формалина, параформальдегида, 2 %-ный раствор хлорной извести, 5 %-ный раствор лизола из расчета 0,3-0.5 л/м2 площади. Раствор натра едкого применяют горячим (30-90°С). 3.6.Ограничения с неблагополучного хозяйства по случной болезни лошадей сни-мают через 2 года после последнего случая выделения клинически больного жи-вотного и получения ежегодно в течение этого периода отрицательных результа-тов серологических исследований. 3.7.После оздоровления хозяйства от случной болезни жеребцов-производителей и кобыл случного возраста ежегодно в течение 5 лет подвергают трехкратному серологическому исследованию за 3, 2 и 1 месяц до начала случной компании. Животных, давших положительную или дважды сомнительную реакции, убивают и поступаю согласно п. 3 настоящей инструкции. С утверждением настоящей инструкции на территории Российской Федерации утрачивает силу « инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации случной болезни однокопытных», утвержденная Главным управлением ветерина-рии Госкомиссии Совмина СССР по продовольствию и закупкам 12 ноября 1990 года. УТВЕРЖДАЮ Заместитель начальника Департамента ветеринарии В.В. Селиверстов Поделиться223-02-2008 16:02:38
Методические указания по лабораторным исследованиям на случную болезнь лошадей, ослов, мулов (Утверждены. 16 октября 1984 г.) 1. Общие положения. 1.1. Случная болезнь—протозойное заболевание лошадей, ослов, мулов, вызываемое возбудителем Trypanosoma equiperdum; про-текает преимущественно хронически. 1.2. Диагноз на случную болезнь ставят на основании результатов микроскопического и серологического исследований материалов с учетом клинических и эпизоотологических данных. 1.3. Для исследования в лабораторию направляют: соскобы со слизистой оболочки влагалища, мочеиспускательного канала, взятые уретральной ложкой; выпот из надрезов отеков и бляшек, собранный шприцем в стерильные пробирки; сыворотку крови нативную или консервированную одним из общепринятых методов. Патологический материал доставляют в термосе со льдом и иследуют не позднее 6 ч, а сыворотку крови — не позднее 2 дней пос-ле взятия. 2. Микроскопическое исследование. 2.1. Из доставленного материала делают раздавленные капли и 6—8 тонких мазков. 2.1.1. Соскоб или выпот густой консистенции разбавляют теплым физиологическим раствором (37 °С) 1:2, наносят каплю на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют на наличие подвижных трипаносом в затемненном поле микроскопа при малом увеличении. 2.1.2. Тонкие мазки высушивают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом в течение 3—5 мин или этиловым 20—25 мин, окрашивают по Романовскому в течение 20—30 мин, затем промывают водой, высушивают и исследуют с использованием иммерсионной системы микроскопа. Протоплазма трипаносом окрашивается в голубой цвет, ядро - в розовый, жгутик и ундулирующая мембрана — в светло-розовый. 3. Серологическое исследование. 3.1. Серологическое исследование сыворотки крови проводят в реакции связывания комплемента (РСК). 3.2. Компоненты реакции: антиген трипаносомный жидкий или лиофилизированный; комплемент — нативная, консервированная или сухая (изготовленная на биофабрике) сыворотка крови морской свинки; гемолитическая сыворотка (гемолнзин) с титром не ниже 1:1000; нормальная и испытуемые сыворотки нативные или консервированные одним из общепринятых методов; 2,5 %-ная взвесь эритроцитов барана на физиологическом рас-творе; физиологический раствор—0,85 %-ный раствор химически чистого хлорида натрия на дистиллированной воде с рН 6,8—7,2. 3.3. Подготовка компонентов для реакции. 3.3.1. Перед постановкой реакции готовят разведение каждого компонента в соответствии с указаниями на этикетках и в количе-стве, необходимом для всего опыта, включая титрование. В процессе работы не допускается дополнительно разводить компоненты, смешивать их с ранее разведенными и использовать в реакции без титрования. 3.3.2. При использовании сухого комплемента содержимое необходимого количества ампул растворяют в физиологическом растворе и сливают в одну пробирку. Полученный раствор комплемента используют для титрования (в разведении 1:20) и главного опыта. 3.3.3. Гемолизин используют в реакции в удвоенном титре. Например, при титре гемолизина 1:1000 его берут 2:1000. 3.3.4. Испытуемые трипаносомную и нормальную сыворотки, разведенные для главного опыта и титрования комплемента, инактивируют 30 мин при 56—58 С (сыворотки ослов и мулов — при 64 С). 3.3.5. Антиген трипаносомный лиофилизированный или жидкий используют в рабочем разведении, которое в 2 раза ниже его предельного титра. Например, титр антигена 1:200, его рабочее разведение будет 1:100. 3.3.6. Эритроциты барана отмывают физиологическим раствором путем центрифугирования при 1,5—3 тыс. об/мин в течение 10—15 мин до полной прозрачности надосадочной жидкости, после чего готовят 2,5 %-ную взвесь на физиологическом растворе. 3.3.7. Физиологический раствор, используемый для разведения компонентов, готовят в день постановки реакции и кипятят в течение 5 мин. 3.4. Разведенные компоненты перед постановкой реакции проверяют на антикомплементарность и гемотоксичность 3.5. После проверки компонентов готовят гемолитическую систе-му, смешивая равные объемы гемолизина в рабочем титре с 2,5 %-ной взвесью эритроцитов и выдерживают ее 25—30 мин при 37— 38 С 3.6. Титрование компонентов реакции. 3.6.1. Гемолизин титруют при использовании новой серии или в случае подозрения на снижение титра. Из основного разведения гемолизина 1:100 (0,1 мл гемолизина и 9,9 мл физиологического раствора) готовят следующие разведения 1:500; 1:1000; 1:1500; 1:2000; 1:2500; 1:3000. Затем в ряд пробирок переносят по 0,5 мл каждого разведения гемолизина, добавляют в каждую пробирку 0,5 мл комплемента в разведении 1:20, 0,5 мл 2,5 %-ной взвеси эритроцитов, 1,0 мл физиологического раствора и выдерживают в водяной бане 10 мин при 37-38 С. Титром гемолизина считают наибольшее его разведение, при ко-тором получен полный гемолиз эритроцитов. 3.6.2. Комплемент титруют в гемолитической системе из разве-дения 1:20 в дозах от 0,1 до 0,37 с интервалом 0,03 мл. В каждую пробирку добавляют недостающее до 0,5 мл количество физиологического раствора, по 1,0 мл гемолитической системы и физиологического раствора (вместо антигена и сыворотки) и выдерживают в во-дяной бане 10 мин при 37—38 °С. Титром комплемента в гемолитической системе считают наименьшее его количество, вызывающее полный гемолиз эритроцитов. При использовании биофабричного комплемента титрование его в гемолитической системе необязательно. 3.6.3. Титрование комплемента в бактериолитической системе проводят перед каждой постановкой реакции на 3—4 сыворотках: позитивной (трипаносомной), негативной и 1—2 сыворотках из опыта. Каждую сыворотку разливают по 0,1 мл в два ряда пробирок, добавляют по 0,4 мл физиологического раствора и инактивнруют, как указано в п. 3.3.4, или сначала готовят разведение сывороток 1:5, инактивируют и разливают по 0,5 мл. Затем в пробирки обоих рядов вносят комплемент, разведенный 1:20 в дозах от 0,13 до 0,37 с интервалом 0,03 мл. Для более точной дозировки рекомендуют приготовить в дополнительном ряду пробирок необходимые разведения комплемента в 10-кратных объемах, затем аппаратом Флоренского с пипетками объемом 0,5 мл перенести разведение комплемента в ряды с сыворотками для титрования. Внесение остальных компонентов и режим титрования указаны в таблице 3 на примере негативной сыворотки. Титром комплемента в бактериолитической системе считают минимальное количество его, вызывающее полный гемолиз эритроцитов в пробирках с негативной и испытуемой сывороткой без антигена, при полной задержке гемолиза в пробирках с трипаносомной сывороткой и антигеном (в таблице 1 титр равен 0,25). Для главного опыта берут дозу комплимента, полученную при титровании. 3.7. Общее количество комплемента для главного опыта определяют по формуле Х=ТП/20 где X— количество комплемента для главного опыта; Т-титр комплимента в бактериолитической системе; П-количество пробирок в реакции; 20-разведение комплимента при тировании; Например, в опыте 100 пробирок, титр комплименте 0,25, расчет его на опыт 025х100/20=1,25 Необходимое количество разведенного комплемента для реакции равно 50 мл (0,5х100), следовательно, к 1,25 мл основного раствора комплимента добавляют 48,75 мл физиологического раствора. 3.8. Постановка главного опыта. 3.8.1. Испытуемые сыворотки исследуют в разведении 1:5 и 1:10 с антигеном и 1:5 без антигена (контроль). При массовых исследованиях допускается постановка реакции в одном разведении 1:5 (без контроля) с последующей перестановкой всех реагирующих сывороток, как указано выше. Для этого каждую сыворотку разливают по 0,1 и 0,05 мл (опытные пробирки) и 0,1 мл (контрольные), добавляют соответственно 0,4, 0,45 и 0,4 мл физиологического раствора и инактивируют, как указано в п. 3.3.4. В опытные пробирки вносят по 0,5 мл трипаносомного антигена в рабочем разведении, в контрольные — по 0,5 мл физиологического раствора, во все пробирки—по 0,5 мл комплемента в установленном титре. После выдерживания реакции в водяной бане (20 мин при 37—38С) во все пробирки вносят по 1 мл гемолитической системы и вновь помещают в баню на 15 мин при 37—38С. 3 8.2. Контроли главного опыта: позитивная и негативная сыворотки в разведении 1:5 с антигеном и без антигена; антиген в двойной дозе без сыворотки (на антикомплементарность); антиген в двойной дозе без сыворотки и комплемента (на гемотоксичность). 3.9. Учет и оценка результатов реакции. 3.9.1. Учет результатов реакции проводят дважды: сразу после водяной бани и на следующий день при хранении реакции в холодильнике. Сначала учитывают результаты контролей: в пробирках с позитивной сывороткой и антигеном, с двойной дозой антигена без сыворотки и комплемента должна быть полная задержка гемолиза; в пробирках с позитивной и негативной сыворотками без антигена, с негативной сывороткой и антигеном, с двойной дозой антигена без сыворотки — полный гемолиз. Степень задержки гемолиза эритроцитов определяют по шкале, приготовленной перед учетом реакции. Для этого содержимое 4—5 пробирок с полным гемолизом сливают в одну и готовят разведения по таблице Разведения гемолизированной жидкости Гемолизированная жидкость 1,0 0,75 0,5 0,25 - Физиологический раствор --- 2,5 0,5 0,75 1 Процент гемолиза 100 75 50 25 0 Степень гемолиза в пробирках с исследуемыми сыворотками определяют в сравнении с гемолизом в пробирках шкалы. Процент гемолиза выражают в крестах: (++++) – отсутствие гемолиза, надосадочная жидкость бесцветная; (+++) – гемолиз 25% эритроцитов; (++) – гемолиз 50% эритроцитов; (+) – гемолиз 75% эритроцитов; (-) – полный гемолиз эритроцитов, осадок отсутствует. 3.9.2 Диагностическая оценка реакции. Положительной считают реакцию, оцененную на 2—4 креста в разведении 1:5 или 1—4 креста в разведении 1:10, сомнительной—на 1 крест в разведении 1:5, отрицательной — при полном гемолизе эритроцитов в обоих разведениях сыворотки. 3.10. Животных, с сывороткой крови которых получена сомни-тельная РСК, исследуют повторно через месяц. 4. Диагноз считают установленным при получении одного из следующих показателей: обнаружение возбудителя при микроскопическом исследовании патматериала; получение положительного результата РСК. 5. Сроки исследований, микроскопического — 1 день, серологиче-ского — 4 дня. |
Похожие:
 |
Инструкция по борьбе с болезнью ауески Инструкция по борьбе с болезнью ауески сельскохозяйственных животных и пушных зверей |
|
Инструкция о мероприятиях по борьбе с вирусным гепатитом утят общие положения Вирусный гепатит утят острая контагиозная болезнь, характеризующаяся поражением печени |
 |
Инструкция о мероприятиях по борьбе с аэромонозом карповых рыб общие положения Аэромоноз инфекционная болезнь карпов, сазанов и их гибридов. Более устойчивы к аэромонозу караси, лини, белые амуры и некоторые... |
|
Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с миксобактериозами лососевых рыб общие положения Миксобактериозы широко распространенные бактериальные заболевания пресноводных рыб, вызывающие поражения жабр и кожи рыб при их выращивании... |
|
Инструкция о мероприятиях по борьбе с бранхиомикозом рыб общие положения Бранхиомикоз опасное инфекционное (микозное) заболевание рыб разных видов и возрастов, возникающее в прудовых, садковых рыбоводных... |
|
Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с болезнью марека (нейролимфоматозом) птиц Марека инфекционная болезнь птиц (преимущественно кур), вызываемая онкогенным вирусом герпес из группы b и проявляющаяся парезами,... |
|
Инструкция о мероприятиях по профилактике и борьбе с весенней виремией... Весенняя виремия карпа (ввк) высококонтагиозная вирусная болезнь, поражающая карпа, cyprinus carpio L. Заболевание протекает по типу... |
|
Инструкция о мероприятиях по борьбе с рожей свиней общие положения Рожа инфекционная болезнь, поражающая преимущественно свиней 3 12-месячного возраста. Протекает остро и хронически в форме энзоотических... |
|
Инструкция о мероприятиях по профилактике и борьбе с весенней виремией карпа (ввк) инструкция Инструкция о мероприятиях по профилактике и борьбе с весенней виремией карпа (ввк) |
|
Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с миксобактериозами лососевых рыб Заболевание протекает быстро, часто бессимптомно, сопровождается массовой гибелью |
|
Инструкция по борьбе с болезнью Ауески сельскохозяйственных животных... Перечень правовых актов СССР и рсфср или их отдельных положений, подлежащих инкорпорации |
|
Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с ринопневмонией (вирусным абортом) лошадей Утверждена Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 7 января 1975 г |
|
"Инструкция о мероприятиях по борьбе с вирусным гепатитом утят" Вирусный гепатит утят острая контагиозная болезнь, характеризующаяся поражением печени |
|
Инструкция о мероприятиях по борьбе с листериозом животных Утверждена Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 6 августа 1974 г взамен временной инструкции от... |
|
Инструкция о мероприятиях по профилактике и борьбе с инфекционным некрозом Заболевание протекает по типу эпизоотии и характеризуется развитием септического процесса, тяжелым поражением органов гемопоэза,... |
|
Инструкция по профилактике передачи вич-инфекции от матери ребенку... Инструкция предназначена для медицинских работников центров по профилактике и борьбе со спид и инфекционными заболеваниями, службы... |