Фармако-токсикологическое исследование скай-форса и его эффективность при колибактериозе цыплят-бройлеров
|
Скачать 294.16 Kb.
|
|
На правах рукописи Труш Роман Викторович ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СКАЙ-ФОРСА И ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ 06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Троицк– 2015 Работа выполнена в ФГБОУ ВО «Белгородский государственный аграрный университет имени В.Я. Горина» на кафедре морфологии и физиологии. Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Горшков Григорий Иванович. Официальные оппоненты: Староверов Сергей Александрович доктор биологических наук, ФГБУН Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук, и.о. директора. Бойко Татьяна Владимировна доктор ветеринарных наук, доцент ФГБОУ ВПО «Омский Государственный Аграрный Университет имени П.А. Столыпина», кафедра диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства, доцент Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины». Защита состоится «_____»_____________ 2015 г. в «____» часов на заседании диссертационного совета Д 220.066.01 при ФГБОУ ВО «Южно-Уральский ГАУ» по адресу ул. Гагарина,13, г. Троицк, Челябинской области, 457100. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО «Южно-Уральский ГАУ» и на сайте tvi_t@mail.ru. Автореферат разослан «_____» ________________ 2015 г. Ученый секретарь диссертационного совета Борисенко Елена Валерьевна 1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИОННОЙ РАБОТЫ Актуальность темы. Самая актуальная ветеринарная проблема в птицеводстве, снижающая рентабельность животноводства РФ, это – желудочно-кишечные и респираторные болезни (А.Г. Шахов, 2008; Ю.Н. Бригадиров, М.А. Иванов, 2008). Для эффективного лечения больных животных требуется применение химиотерапевтических средств (ХТС) с широким спектром и разным механизмом действия на возбудителей (М.И. Рабинович, Г.А. Ноздрин, И.М. Самородова, 2006; В.И. Фисинин, 2009; С.В. Шабунин, Г.А. Востроилова, В.И. Беляев с соавт., 2010; Г.А. Востроилова, В.И. Беляев, Л.Ю. Сашнина, 2011; А. Г. Шахов, Л. Ю. Сашнина, Д. В. Федосов, 2012, и др.). При этом важным направлением в химиотерапии является предотвращение или замедление развития резистентности микроорганизмов, а также борьба с уже сформировавшейся лекарственно-устойчивой микрофлорой (А.Г. Шахов, Л.Ю. Сашнина, Г.А. Востроилова, В.В. Чернов, 2008). Сложившийся традиционный способ химиотерапии путем тотального насыщения организма ХТС с точки зрения затрат на препараты расточителен и, кроме того, не отвечает врачебному принципу «Не навреди лекарством», т.к. практически все средства химиотерапии в рекомендуемых дозах дают те или иные осложнения. В то же время снижение рекомендуемых доз недопустимо и чревато потерей эффективности (М.И. Рабинович, 2006; Н.А. Лагункин, 2006; Б. Ф. Бессарабов, 2009; Г.И. Горшков, С.Б. Носков, Е.Г. Яковлева, 2009; И.С. Плитов, 2011). Наноструктурная форма ХТС имеет существенные преимущества перед традиционными лекарственными формами или их простыми комбинациями большей эффективностью и возможностью сокращения лечебных или профилактических доз, локальностью действия в очаге поражения и скопления возбудителя, менее выраженным побочным влиянием на организм животных (Б.М. Уша, А.А. Концевова, А.М. Смирнов с соавт., 2012; В.Е. Романов, М.Б. Тарасов, И.П. Погорельский, 2013). В НПО «НаноТехПром» (г. Белгород) с помощью нанотехнологий созданы ХТС – пентациклин, эндосупер, скай-форс, рифомаст. Изучены их физико-химические параметры (М.Б. Тарасов, 2006; М.Б. Тарасов, Г.И. Горшков, 2010), доказано лечебное действие пентациклина при желудочно-кишечных и респираторных заболеваниях у телят (Э.А. Кравченко, Г.И. Горшков, А.Я. Хмельков, М.Б. Тарасов, 2011). Препарат скай-форс никто не изучал, этому и посвящена данная работа. Цель и задачи исследования. Цель исследования – изучить фармако-токсикологические свойства скай-форса, обосновать безопасность применения и определить его терапевтическую эффективность при колибактериозе птиц. По реализации этой цели были поставлены следующие задачи:
Научная новизна работы. Новый препарат скай-форс, испытанный на лабораторных животных и цыплятах не обладает острой и хронической токсичностью. В максимальных дозах не вызывает гибель животных и изменений в печени, селезенке, тимусе и бурсы Фабрициуса. Впервые примененный в условиях крупнейшей птицефабрики страны ЗАО «Приосколье», скай-форс показал высокую эффективность при колибактериозе цыплят-бройлеров. Введение скай-форса в питьевую воду цыплят-бройлеров полностью подавлял вспышку колибактериоза, а эффективность применения с профилактической целью не уступал антибиотикам (энрофлоксацину, норфлоксацину гидрохлориду, диоксидину, доксициклину хихлату, колистину сульфату, гентамицину сульфату). Дано клинико-экспериментальное обоснование применения скай-форса в ветеринарной практике с целью лечения и профилактики заболеваний цыплят-бройлеров. Проведена сравнительная оценка его химиотерапевтической эффективности с другими ХТС. Сохранность цыплят при использовании скай-форса составлял 96,72 и 98,15%. Подана заявка на патент РФ на изобретение «Способ идентификации водорастворимого лекарственного вещества путем сравнения с эталоном» №20131417702(063890) от 10.09.2013, МПК G 01 N21/33, G 01 N33/53. Практическая значимость работы. Предлагаются оптимальные дозы и способ применения скай-форса в условиях промышленного выращивания цыплят-бройлеров. Препарат нетоксичен, и его можно применять взамен антибиотиков для профилактики и лечения болезней бактериальной этиологии с первых дней жизни цыплят. Апробация результатов исследований. Материалы диссертационной работы были представлены на международных научно-практических конференциях «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2012, 2014, 2015), Всероссийской научно-практической конференции «Молодежь в аграрной науке и образовании – инновационный потенциал будущего» (Новосибирск, 2013), международном конкурсе молодежных проектов «Инновационный потенциал молодежи-2012» (М., 2012), 15-м Московском международном Салоне изобретений инновационных технологий «Архимед 2012» (М., 2012), на расширенном заседании кафедр морфологии и физиологии и инфекционной и инвазионной патологии БелГАУ (2014). Основные положения, выносимые на защиту: -физико-химические свойства наноструктурного препарата скай-форса; -фармако-токсикологические свойства скай-форса; -антимикробная активность препарата скай-форса и его влияние на ультраструктуру эшерихий; -терапевтическая эффективность препарата при колибактериозе птиц. Публикации результатов исследования. Материалы диссертации опубликованы в 8 научных статьях, из которых 4 помещены в изданиях, включенных в Перечень ВАК. Структура и объём диссертации. Диссертация представляет собой рукопись компьютерного набора объёмом 133 страниц. В списке использованной литературы 190 источников, в т.ч. 166 отечественных авторов. Текст иллюстрирован 28 таблицами и 25 рисунками. Имеется приложение. 2.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Работа выполнялась в период с 2010 по 2014 гг. на цыплятах-бройлерах в ЗАО «Приосколье» (откормочная площадка «Пятницкое-2»), а также на лабораторных животных. В экспериментальной части работы использовано 30 белых мышей, 1400 цыплят различных возрастных групп; в клинических и научно-производственных испытаниях – 900000 цыплят-бройлеров кросса Hubbard F-15. Первичное фармакологическое и токсикологическое исследования скай-форса проводили согласно требованиям к доклиническому изучению новых фармакологических веществ, а также с учётом имеющихся по этому вопросу руководств (И. А. Кассирский, Г. А. Алексеев, 1970; Г.Н. Першин, 1971; В.В. Гацура, 1974; Б. И. Антонов, 1989; М.Н. Аргунов, 2007). Острую токсичность препарата изучали при пероральном его введении общепринятым методом (Г.Н. Першин, 1971). В опытах использовали белых мышей и цыплят-бройлеров. Хроническую токсичность определяли на цыплятах-бройлерах. Биохимические исследования крови проводили согласно общепринятым методам. В сыворотке крови определяли содержание общего белка и его фракции, сумму иммуноглобулинов, билирубин, мочевину, содержание витаминов А, Е, С, каротина, кальция, фосфора, цинка и йода, активность ферментов АлТ и AсT. Уровень фосфора определяли реакцией с аммония молибдатом в модификации ИЭВСиДВ (В.Н. Афонюшкин, С.В. Леонов, Ю.Г. Юшков, Е.В. Дударева, 2005), уровень кальция – в реакции с ортокрезолфталеинкомплексоном, концентрацию общего белка – методом Кингслея-Вейксельбаума, альбумина – в реакции с бромкрезоловым зеленым, концентрации железа, глюкозы, триацилглицеролов, холестерола тестировали с использованием стандартных тест-систем фирмы «Вектор-Бэст». Фотометрирование реакционных смесей проводили на вертикальном спектрофотометре «Tecan Sunrise». В работе по оценке антимикробных свойств матричного наноструктурного препарата скай-форса (В.Е. Романов, М.Б. Тарасов, И.П. Погорельский, 2013) проводили методом серийных разведений, при этом использовали следующие штаммы бактерий: кишечной палочки – Е.соli С 6ОО, золотистого стафилококка – S. aureus АТСС 25178 - 1 и кишечного иерсиниоза – Y. еnterocolitica 1407. Бактерии выращивали на бульоне и агаре Хоттингера при оптимальной температуре. Изучение ультраструктуры бактерий Е.сoli С 600 проводили с помощью сканирующего электронного микроскопа JЕОL JSМ – 6510LV (Япония). Материалом для гистологических исследований служили образцы внутренних органов цыплят-бройлеров, отобранные в различные периоды опыта (тимус, сумка Фабрициуса, печень, селезенка). Серологические исследования крови проводили на базе Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории, а также в лаборатории ЗАО «Приосколье» с помощью ИФА с использованием тест-наборов производства компании «BioChek B.V.» согласно наставлениям к наборам диагностикумов. Кровь на исследование от цыплят-бройлеров брали в 38 сут. В качестве средства для лечения цыплят-бройлеров и профилактики колибактериоза испытывался препарат скай-форс НПФ «НаноТехПром». Диагноз на заболевание устанавливали комплексно, на основании клинического обследования цыплят-бройлеров, лабораторных исследований и патолого-анатомического вскрытия. Для клинических испытаний были созданы группы из цыплят-бройлеров односуточного возраста. В каждых опытах выделяли контрольную и опытную группы. В опытных группах применяли перорально водный раствор скай-форса в дозе 25-100 мг/кг живой массы цыпленка. В контрольной группе вводили препараты сравнения в дозах и кратности согласно наставлению по их применению, такие как, докси-10, гентамицин, диоксинор, карифлокс, гидроколистин, витроцил. За птицей вели ежедневное клиническое наблюдение, учитывали общее состояние, рост и развитее массы тела, затраты корма на прирост, падёж, сроки выздоровления. Определение сроков выведения остаточных количеств ДВ препарата скай-форса проводили в Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории (ФГБУ «Белгородская МВЛ») и лаборатории ЗАО «Приосколье». Препарат вводили цыплятам-бройлерам (n=24) внутрь вместе с водой в дозе 25; 300 и 375 мг/кг ж.м. с концентрацией активного вещества 2; 4 и 6% в течение 5-8 суток. Отбор проб от вынуждено убитых цыплят осуществляли через 4 и 24 часа после начала применения препарата, а также на 2; 3 и 4-е сутки после последнего приема препарата. Пробы мяса исследовали на хроматографе (Капель) методом капиллярного электрофореза и ВЭЖХ-МС/МС. Статистический анализ цифровых показателей приведен согласно описанию Г.Ф. Лакина (1973). 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 3.1.Физико-химическая характеристика скай-форса. Препарат скай-форс представляет собою мелкодисперсный порошок песочно-красновато-оранжевого цвета, плотностью 1,52 г/см2. Легко растворим в воде – насыщенный раствор в дистиллированной воде при температуре 20°С составляет 32%. Органолептические показатели: вкус – сладковато-горький; запах – характерный, почти не ощущается. Легко смешивается с водой и комбикормом. Результаты исследований в наших опытах показывают, что исследования, проведенные методом ионометрии, имеют однозначную зависимость показателя рН от концентрации водного раствора скай-форса. Титриметрический метод выявил характерную для препарата зависимость протекания во времени реакции нейтрализации 0,5%-ным раствором NаОН. В течение шести суток растворы оставались относительно стабильными. Растворы скай-форса изучались также методом спектрофотометрии в видимой и ультрафиолетовой областях спектра. Диапазон измерений водного насыщенного раствора составил 220-920 нм; водного 2%-ного раствора – 360-630 нм; раствора в метаноле – 200-359 нм. При спектрофотометрическом исследовании раствора препарата в метаноле погрешность не превышала 1,09%. При исследовании водного насыщенного раствора препарата расхождений на основной частоте поглощения не было, на второй частоте – 0,61%, на третьей – 1,84%. При исследовании 2%-ного водного раствора на основной частоте поглощения погрешность не превышала 1,36%, на второй – не более 0,35%. 3.2. Определение токсичности скай-форса. Определение острой токсичности на белых мышах. При наблюдении за белыми мышами (n=30) как в первые часы после перорального введения скай-форса в дозах 25; 37,5; 50; 62,5 и 75 мг/кг ж.м., так и в последующем не выявлено каких-либо изменений в их общем состоянии. На протяжении всего времени наблюдения (14 сут) мыши были подвижны, адекватно реагировали на внешние раздражители, активно проявляли исследовательский рефлекс, потребляли корм и воду, свободно перемещались. Заболеваний и падежа не отмечено. Изучение острой токсичности на цыплятах-бройлерах. Испытывали дозы 20-70 мг/кг массы тела на цыплятах (n=35). После введения скай-форса никаких клинически выраженных изменений у цыплят даже от дозы 70 мг/кг не наблюдалось. За период опыта пал 1 цыпленок в последней группе с максимальной дозой. На вскрытии павшего цыпленка выявлено кровоизлияние и отечность перикарда. Другие органы были без визуальных изменений. Изучение хронической токсичности на цыплятах. В этом опыте на цыплятах (n=50) испытаны повышенные дозы скай-форса. После их ежесуточного перорального введения (150-375 мг/кг), начиная с 14-суточного возраста, также не наблюдалось никакой выраженной реакции на препарат. Весь период наблюдения (22 сут) цыплята ничем не отличались от интактных (по поведению, оперению, общефизиологическим показателям, потреблению воды и корма). Заболеваний и падежа не отмечено. Существенных изменений в темпах роста не выявлено. Высокая переносимость препарата цыплятами подтверждает нетоксичность наноструктурной формы скай-форса и «родственных» ему других препаратов, испытанных исследователями на телятах при желудочно-кишечных и респираторных заболеваниях (Г.В. Сноз, Г.И. Горшков, Е.Г. Яковлева с соавт., 2010). |
Похожие:
 |
Инструкция по заполнению формы первичной учетной документации №272/у... «Направление № на химико-токсикологическое исследование на наличие этилового и алифатических спиртов» |
 |
Профилактика инфекционных заболеваний Эффективная профилактика инфекционных... Эффективная профилактика инфекционных заболеваний цыплят-бройлеров в первый период выращивания |
|
Фармако-токсикологические свойства и эффективность применения препарата... Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных |
|
Фармако-токсикологические свойства и эффективность применения препарата... Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных |
|
Фармако токсикологические свойства минерал сорбента сорби и его применение... |
|
Исследование рынка услуг Наилучшую координацию деятельности всех экономических субъектов, высокую результативность и эффективность использования трудовых,... |
|
Исследование №2 30 Исследование №3 31 Исследование №4. Создание сайта... Поэтому школьнику необходимо не только усвоить основные понятия и положения теории экономики, но и научится применять полученные... |
|
Фармако-токсикологические свойства гепаветА и его применение в животноводстве Актуальность темы. В специализированных хозяйствах с промышленной технологией производства, в птицеводстве и свиноводстве, одной... |
|
П/п мнн ( при отсутствии такового: фармако-терапевтическая группа) Цена за 1 ед товара,планируемая к формированию начальной (максимальной) цены договора |
|
Г. И. Ханин советское экономическое чудо 40-50-х годов Сталина, а после его смерти из-за борьбы за власть в послесталинском руководстве и значительных изменений в структуре органов хозяйственного... |
|
Курсовая работа на тему: Исследование организации учета фонда заработной... Сущность заработной платы и ее влияние на эффективность строительного производства |
|
Рик Скай Начало формы Вперед → 1 из 31 Конец формы Глава 1 Ушли близкие друзья, проведшие здесь несколько последних недель, — Элтон Джон, диск-жокей Кенни Эверетт, остальные музыканты «Куин».... |
|
Экспериментальная и клиническая фармакология лекарственных препаратов... Лекарственных препаратов на основе диоксидина и доксициклина и их эффективность при мастите |
|
Исследование влияния массы универсальных малогабаритных погрузчиков... Целью данного исследования является разработка метода расчета показателей эффективности умп со сменным рабочим оборудованием на основе... |
|
Инструкция по применению амоксифарма при бактериальных инфекциях цыплят, индеек и свиней Амоксифарм содержит в 1 г в качестве действующего вещества 800 мг амоксициллина тригидрат, а в качестве вспомогательных веществ:... |
|
Боль терпеть нельзя! Только вместе с пациентом доктор может разработать план лечения и оценить его эффективность |