Химия растительного сырья
|
Скачать 3.83 Mb.
|
II.1. Сорбенты для СЭХВ качестве наполнительного материала колонок для СЭХ водорастворимых полисахаридов нашли применение жесткие носители: пористое стекло (биоглас), пористый силикагель (порасил), а также полужесткие и мягкие носители: сшитые сополимеры стирола и дивинилбензола (стирогель), поливинилацетатные, полиакриламидные и декстрановые (сефадекс) гели [9]. Ниже приводятся примеры, использующихся в последнее время, различных гелей. Так, например, в пористом силикагеле по эксклюзионному механизму выполнено разделение водных растворов декстранов Т-10, Т-20, Т-40, Т-70, Т-110, Т-161, Т-250, Т-500 [19]. Shodex ОН Pak KB 806 был применен для изучения ММР пуллулана с использованием в качестве подвижной фазы 0,05 н водного раствора NaH2PO4 при pH 4.95 [20]. ММР хитозана получено на высокосшитом полидивинилбензоле, используя в качестве элюента 4%-ный водный раствор уксусной кислоты [21]. Жесткий гель Jordi GBR (полидивинилбензол с привитой глюкозой) был использован при СЭХ декстранов с водной и водно-диметилсульфоксидной подвижными фазами [22]. Все еще используются сшитые декстрановые гели – сефадекс G-50 и G -100 [17], а также Superose 12 HR 10 [14]. Существенным недостатком декстрановых гелей является деструкция углеводной матрицы, обусловливающая появление пиков, не соответствующих разделяемым веществам [9]. В последнее время для исследования ММР водорастворимых эфиров целлюлозы широко используются TSK GM PW (Toya Soda, Япония) [23], PL Aquagel OH (Polymer Laboratories, Англия) [24] и PSS Suprema (Polymer Standard Service, Германия) [25]. II.2. Хроматографы и методы детектирования при эксклюзионной хроматографии полисахаридовДля СЭХ используются жидкостные хроматографы различных фирм-производителей (Хьюлет-Паккард, Дюпон, Бекман, Вариан, Шимадзу, Алтекс и др.), которые выпускают, помимо самих приборов, комплектующие части к ним, насосы, детекторы, упакованные сорбентом колонки, инжекторы, фильтры и др. Исходя из поставленных задач, для хроматографического исследования выбирается подходящий хроматограф и укомплектовывают его соответствующими колонками и чувствительными детекторами [18]. В связи с низкой концентрацией вводимого образца полимера к чувствительности детекторов предъявляются особые требования. В СЭХ применяют следующие типы детекторов: дифференциальные рефрактометры [21, 22], фотометр многоуглового лазерного светорассеяния (ФМЛС) [10–12, 26–28], реже используют УФ детекторы [8, 9]. Дифференциальные рефрактометры измеряют непосредственно отклонение светового пучка, обусловленное различием в показателях преломления образца и эталонной жидкости. С его помощью можно определить небольшие изменения показателя преломления. Показатель преломления ∆n пропорционален изменению плотности ∆ρ (при концентрации полимера ∆с) раствора. Недостаток рефрактометрических детекторов – высокая чувствительность к изменениям температуры. Повышение температуры вызывает увеличение уровня шумов [8]. При малоугловом лазерном рассеянии света измерения проводят в интервале углов 2–10°. Поскольку объем рассеяния света геометрически определен, получаемые значения Мw представляют собой абсолютные величины. Достоинством такого детектора является то, что проблема осветления раствора образца для исследования сводится к минимуму, что связано с очень маленьким объемом (0,1 мкл) рассеивания. Кроме того, этот метод детектирования не сопряжен с деструкцией полимеров; обеспечивает возможность абсолютной калибровки при определении ММ; высокая чувствительность позволяет исследовать небольшие объемы разбавленных растворов образцов; конструкция измерительной кюветы позволяет исключить фоновое рассеяние; длинноволновый лазерный излучатель дает возможность исключить флуоресценцию. Поэтому этот метод детектирования нашел широкое применение в СЭХ водорастворимых полисахаридов для определения ММ, радиуса вращения и ММР [10–12, 26–29]. Недостатком детектора малоуглового лазерного светорассеяния является то, что СЭХ более низкомолекулярных фракций невоспроизводима и эта проблема увеличивается из-за более низкой интенсивности сканирования света [18, 26]. С помощью ФМЛС и рефрактометрического детектора в СЭХ можно определить абсолютные значения молекулярных масс исследуемых полимеров и не требуется провести калибровки колонок с полимерными стандартами [12, 18, 30, 31]. Используя такой хроматограф, авторы работы [28, 32, 33] для водорастворимых простых эфиров целлюлозы определили ММР, ММ и RG. При проведении СЭХ метилгидроксиэтилцеллюлозы (МГЦ) [28] элюент дегазировали с использованием дегазатора ERK 3315а. Пробы вводили через автоматизированный узел ввода НР серии 1100 (Хьюлетт Паккард). Непосредственно перед колонками установлен поликарбонатный фильтр с размерами пор 0,8 мкм (Nucleopore, Cornino Costar Bodenheim). Для фракционирования МГЦ использованы четыре TSK PW XL колонки, установленные в порядке уменьшения размеров пор (TSK G 6000 PW XL, G 5000 PW XL, G 4000 PW XL и G 3000 PW XL). Колоночный термостат служит для поддержки постоянной температуры 25 °С в эксклюзионных колонках. Детекторами служили ФМЛС и дифференциальный рефрактометр. Измеренные данные вносятся в стандартный персональный компьютер (ПК) с программой ASTRA 2.11в и просчитывается в версии ASTRA для Windows 4.73.04. Диаграмма элюирования раствора образца МГЦ с мономодальной кривой для концентрационного (рефрактометрического) (сплошная линия) и светорассеянного (пунктирная линия) сигналов показана на рисунке 3. На графике приведены также кривая для ММ (абсцисса слева) и радиус вращения в интервале от 100 до 30 нм (абсцисса справа). Отсюда определены средневесовая ММ Мw = 318 000 г/моль и средний радиус вращения RG= 67 нм [28]. В ФМЛС светорассеивающая кювета дает возможность on-line детектирования (т.е. «в темпе поступления информации») полимерных молекул в потоке элюента. Информация по ММ здесь может быть получена непосредственно как функция интенсивности рассеяния. Использование ФМЛС имеет то преимущество, что информация о радиусе вращения (RG) молекул больше, чем λ/20 может быть получена на угловой зависимости рассеяния света [18]:
где K = 4 π2 no2 (dn/dc)2/NAλ4, Rj = Ij h2/IoVs. Интенсивность рассеяния света при угле j, Ij вносится как понижающий параметр Rj, который нормализует до интенсивности падающего излучения Io и расстояние от детектора h, от рассеивающего объема Vs. Интенсивность рассеянного света зависит от ММ и от радиуса вращения RG. Необходимо учитывать, что определение функции распределения производных целлюлозы при сочетании рефрактометрического детектора с ФМЛС возможно лишь в случае изолированных клубков в системах растворителей, которые не формируют агрегаты, а образуют дисперсии.
|
Похожие:
 |
Г Основы заготовительного процесса растительного сырья (сбор, первичная... Заготовка лекарственного растительного сырья является многогранным процессом, охватывающим цикл операций, начиная со сбора и заканчивая... |
|
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
 |
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
|
Химия растительного сырья Ю. Д. Алашкевич, В. И. Белоглазов, В. К. Дубовый, Д. А. Дулькин, И. Н. Ковернинский, Б. Н. Кузнецов, А. В. Кучин, Ю. С. Оводов, Г.... |
|
Фармакогнозия Под подлинностью лекарственного растительного сырья понимают соответствие сырья Под доброкачественностью лекарственного растительного сырья понимают соответствие сырья |
|
Заготовка сырья дикорастущих и культивируемых лекарственных растении Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение лекарственного растительного сырья |
|
Общая фармакопейная статья Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов осуществляется в соответствии с офс «Хранение... |
|
Курсовая работа по аптечной технологии лекарств на тему: «Современные... «Современные экстракционные лекарства из растительного сырья. Лекарственные формы» |
|
Бизнес-план развитие предприятия по сбору и переработке растительного... Обоснование рентабельности развития предприятия по сбору, переработке и экспорту для реализации на территории Российской Федерации... |
|
Ростехнадзор приказ «Требования к применению взрыворазрядителей на оборудовании взрывопожароопасных производственных объектов хранения и переработки... |
|
Основной документ, регламентирующий приемку фасованного лрс Под доброкачественностью лекарственного растительного сырья понимают соответствие его |
|
2. Место производственной практики в структуре ооп бакалавриата Кафедра: Товароведение, технология сырья и продуктов животного и растительного происхождения имени С. А. Каспарьянца |
|
Особенности заготовки и анализа дальневосточных видов лекарственного растительного сырья Выявить виды, морфологически сходные с лекарственными; научиться различать их между собой |
|
Федеральный горный и промышленный надзор россии постановление Утвердить "Инструкцию по составлению планов ликвидации аварий и защиты персонала на взрывопожароопасных производственных объектах... |
|
Разработка и интенсификация процесса сублимационной сушки растительного... Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Дагестанский... |
|
Отдел вирусологии и молекулярной диагностики Перечень нормативной... Му 3 1917-04 Порядок и организация контроля за пищевой продукцией, полученной из/или с использованием сырья растительного происхождения,... |