Комбинированная иммуноферментная тест-система для одновременного выявления антигена ВИЧ и выявления сероконверсии к вирусу иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ-1, ВИЧ-1 группы O) и к ВИЧ 2 типа в сыворотке и плазме крови человека
Обратите внимание на выделенные изменения
См. раздел РЕАГЕНТЫ для полного пояснения символов, используемых для обозначения компонентов набора.
НАЗВАНИЕ
Murex HIV Ag/Ab Combination
НАЗНАЧЕНИЕ
Усовершенствованная тест-система предназначена для выявления сероконверсии вируса иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ 1, ВИЧ-1 группы O) и выявления антител к ВИЧ 2 типа (анти ВИЧ 2) методом иммуноферментного анализа.
РЕЗЮМЕ И ОПИСАНИЕ ТЕСТА
Синдром приобретенного иммунодефицита человека (СПИД) вызывается двумя типами вируса иммунодефицита человека: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Оба являются ретровирусами и передаются с некоторыми биологическими жидкостями организма, преимущественно с кровью и генитальными секретами, а также трансплацентарно. ВИЧ-1 распространен по всему миру; ВИЧ-2 обнаруживается в основном в Западной Африке и некоторых странах Европы.1
Показана существенная антигенная перекрестная реактивность белков gag и pol двух типов вирусов, в то время как перекрестная реактивность гликопротеинов оболочки отмечается реже.
При скрининге с целью выявления антител к обоим типам вируса на всех стадиях инфекции важно кроме основных перекрестно реагирующих белков gag и pol, анализировать эпитопы белков оболочки обоих вирусов.2,3 У пациентов из Камеруна и Европы были обнаружены варианты ВИЧ-1, объединенные в группу О.4,5 Вирусы группы О сильно отличаются от описанных первоначально подтипов ВИЧ-1 (относящихся к группе М). Для выявления антител к вирусу группы О у инфицированных индивидов могут использоваться специфичные эпитопы оболочки вируса этой группы; перекрестная реактивность с другими подтипами ВИЧ не значима.6 В ответ на инфицирование ВИЧ возникает реакция образования специфичных антител: вначале иммуноглобулинов М (IgM), а в последующем – иммуноглобулинов G (IgG).7 Максимальная чувствительность в выявлении сероконверсии антител к ВИЧ достигается в таких анализах, в которых определяются как IgM, так и IgG, ядерный антиген обычно обнаруживается кратковременно перед появлением антител.
В анализе Murex HIV Ag/Ab Combination выявляется ядерный антиген ВИЧ, а также IgG, IgM и IgA к гликопротеинам оболочки и перекрестно реагирующим белкам pol ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Анализ позволяет идентифицировать потенциально инфицированные образцы сыворотки крови и плазмы крови с ЭДТА и цитратом.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
В анализе Murex HIV Ag/Ab Combination используются микроячейки, покрытые синтетическим пептидом, представляющим иммунодоминантный участок ВИЧ-1 (О), рекомбинантным белком, полученным из белков оболочки ВИЧ-1 и ВИЧ-2, белком pol ВИЧ и моноклональными антителами к р24 ВИЧ-1. Конъюгат представляет собой смесь тех же эпитопов и различных моноклональных антител, в том числе и к р24, меченных пероксидазой хрена.
Образцы и контрольная сыворотка инкубируются в ячейках; реактивный ядерный антиген ВИЧ и/или антитела к ВИЧ из образца или контрольной сыворотки связываются с антителами и/или антигенами на микроячейках. Затем проводится промывание для удаления образца и оставшихся антител. На последующем этапе добавляется конъюгат, который, в свою очередь, связывается с реактивным ядерным антигеном ВИЧ и/или специфическими антителами, ранее связавшимися с реагентами на ячейках. В образцах, не содержащих реактивного ядерного антигена или специфических антител, связывания конъюгата с ячейкой не происходит.
После промывания для удаления несвязанного конъюгата в ячейки добавляется раствор, содержащий 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (ТМБ) и перекись водорода. В ячейках со связавшимся конъюгатом появляется сине-зеленое окрашивание, которое сменяется на оранжевое после добавления серной кислоты для остановки реакции. Интенсивность окрашивания оценивается спектрофотометрически при 450 нм.
|