Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П2539 от 20 ноября 2009 г. Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова»

Введение 6

Глава 1 Аналитический обзор 8

1.1 Регуляция биосинтеза и активности ферментов в микробной клетке 8

1. 2 Обмен лизина в микробной клетке 23

1.2.1 Общие пути обмена лизина в микробной клетке 23

1.2.1.1 Биосинтез лизина в микробной клетке 25

1.2.1.2 Катаболизм лизина в микробной клетке 29

1.2.2L-лизин--оксидаза и ее противоопухолевая активность 32

Глава 2 Выбор и обоснование оптимального варианта направления исследований 37

2.1 Штамм-продуцент L-лизин--оксидазы 37

2.2 Среды, используемые при исследовании биосинтеза L-лизин--оксидазы в культуре Trichoderma sp. 37

2.3 Факторы, влияющие на накопление L-лизин--оксидазы в культуре Trichoderma sp. 38

2.4 Исследование биостимуляторов бактериального происхождения в качестве индукторов L-лизин--оксидазной активности 39

Глава 3 План проведения экспериментальных и теоретических исследований 43

Глава 4 Экспериментальные и теоретические исследования 46

4.1 Исследование биосинтеза и регуляции активности специфической оксидазы L- аминокислот грибного происхождения 46

4.1.1 Разработка модификации спектрофотометрического метода определения ферментативной активности L-лизин--оксидазы с помощью ортофенилендиамина 46

4.1.2 Влияние сред разного состава на биосинтез специфической оксидазы L- аминокислот грибного происхождения 54

4.1.3 Изучение оптимальных условий биосинтеза штаммом-продуцентом фермента L-лизин--оксидазы 57

4.1.4 Изучение влияния физико-химических факторов на динамику накопления L-лизин--оксидазы 58

4.1.5 Изучение влияния биологически активных добавок на динамику накопления L-лизин--оксидазы 60

4.2 Ферментация активного продуцента Trichoderma sp. методом глубинного культивирования 63

63

4.2.1 Регуляция оксидазных активностей продуктами метаболизма бактериального происхождения 63

4.2.2 Регуляция ферментативной активности в зависимости от рН – среды 64

4.3 Выделение и очистка L-лизин--оксидазы Trichoderma sp. 65

Заключение 69

Список использованных источников 74